论 著・ 有天然的荧光，这样无论是体外基因转染或者转染细胞体内移 植后，都可以非常直观的利用荧光显微镜观察目的蛋白的表达 位置和情况。通过观察转染细胞相应荧光的有无及强弱，即可判 断对目的基因的表达情况，而无需繁琐的鉴定。 Ｓｃｉ ＵＳＡ，ｌ９９９，９６（１９）：１０７１１－１０７１６． ２０１０年２月第４８卷第６期 ｆ６１ Ｗｏｏｄｂｕｒｖ Ｄ．Ｓｃｈｗａｒｚ ＥＪ．Ｐｒ￣ｋｏｐ ＤＪ．ｅｔ ａ１．Ａｄｕｌｔ ｒａｔ ａｎｄ ｈｕｍａｎ ｂｏｎｅｍａｒｒｏｗ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅ ｉｎｔｏ ｎｅｕｒｏｎｓ［３［．Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ Ｒｅｓ， ２０００，６１（４）：３６４—３７０． ［７］Ｉｎｏｕｅ Ｍ，Ｈｏｎｍｏｕ Ｏ，Ｏｋａ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｒｅｍｙｅｌｉｎａｔｉｎｇ ｐｏｔｅｎｔｉｌ ｏｆ ｆａｏｃａｌ ａｎｄ ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ 本实验利用慢病毒载体将ｂＦＧＦ基因导人大鼠ＭＳＣｓ内，以 细胞作为ｂＦＧＦ的发生器，经ＥＬＩＳＡ检测到转染７２ｈ后的ＭＳＣｓ 内ｂＦＧＦ呈持续高水平表达，与空载体组和空白组比较具有显著 统计学意义，而对照组之间无显著统计学意义。ＲＴ—ＰＣＲ检测实 验组在ｍＲＮＡ水平的表达情况亦有类似结果：ｂＦＧＦ－ＧＦＰ —ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｃｅｌｌｓ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｒａｔ ｄｅｍｙｅｌｉｎａｔｅｄ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ［Ｊ［． Ｇｌｉａ，２００３，４４（２）：１１１－１１８． ｆ８］Ｈａｆｓｔｅｔｔｅｒ ＣＰ，Ｓｅｈ ａｒｚ ＥＪ，Ｈｅｓｓ Ｄ，ｅｌ ａ１．Ｍａｒｒｏｗ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｆｒｏｍ ｇｕｉｄｉｎｇ ｓｒｔｎｄｓａ ｉｎ ｔｈｅ ｉｎｊｕｒｅｄ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ａｎｄ ｐｒｏｍｏｌｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ［Ｊ］． ＢＭＳＣｓ组ｍＲＮＡ较对照组显著减少，而２个对照组问比较无明 显差别，说明带有目的基因的慢病毒，不论是在ｍＲＮＡ水平还是 蛋白质水平都显著提高ｂＦＧＦ的表达。 本实验采用慢病毒转染的方法相对简单，转染７２ｈ后即可 Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，２００２，９９（４）：２１９９—２２０４． ［９］Ｕｌｌｉａｎ ＥＭ，Ｈａｒｒｉｓ ＢＴ，Ｗｕ Ａ，ｅｔ ａ１．Ｓｃｈｗａｎｎ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ａｓｔｒｏｅｙｔｅｓ ｉｎｄｕｃｅ ｓｙｎａｐｓｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｂｙ ｓｐｉｎａｌ ｍｏｔｏｒ ｎｅｕｒｏｎｓ ｉｎ ｃｕｌｔｕｒｅ［Ｊ［．Ｍｏｌ 进行检测，随着细胞的传代，目的基因能过稳定的遗传给下一 代。通过本实验，我们获得可以稳定表达人ｂＦＧＦ基因并携带荧 光蛋白标记的ＭＳＣｓ，这为下一步的动物移植治疗脊髓损伤奠定 了基础。 Ｃｅ１１ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ ２００４，２５（２）：２４１—２５１． ［１０］Ｇａｒｃｉａ Ｒ，Ａｇｕｉｒ Ｊ，Ａｌａｂｅｒｔｉ Ｅ，ｅｔ ａ１．Ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｐｒｏｄｕｃｅ ｎｅｒｖｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ａｎｄ ｇｈａｌ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒｓ［Ｊ［．Ｂｉ￣ｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ，２００４，３１６（３）：７５３—７５４． ［１１］Ｋａｆｒｉ Ｔ，Ｖａｎ Ｐｒａａｇ Ｈ，Ｇａｇｅ ＦＨ，ｅｔ ａ１．Ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ ｖｅｃｔｏｒｓ：ｒｅｇｕｌａｔｅｄ 【参考文献】 ［１］Ｓｃｈｗａｂ ＭＥ．Ｒｅｐａｉｒｉｎｇ ｔｈｅ ｉｎｊｕｒｅｄ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ『Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００２，２９５ （５５５７）：１０２９—１０３１． ［２］Ｋａｓｓｅｍ Ｍ，Ｋｒｉｓｔｉａｎｓｅｎ Ｍ，Ａｂｄａｌｌａｈ ＢＭ．Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ：ｃｅｌｌ ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｕｓｅ ｉｎ ｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ［．Ｂａｓｉｃ Ｃｌｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｏｘｉｃｏｌ， ２００４．９５（５）：２０９—２１４． ［３】Ｂｉｋｆａｌｖｉ Ａ，Ｋｌｅｉｎ Ｓ，Ｐｉｎｔｕｃｃｉ Ｇ，ｅｔ ａ１．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｒｏｌｅｓ ｏｆ ｆｉｂｒｏｂｌｓｔａ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ－２［［［．Ｅｎｄｏｅｒ Ｒｅｖ，１９９７，１８【１）：２６—４５． 『４ Ｄｅｌ４］ｒｉｅｕ Ｉ．Ｔｈｅ ｈｉｇｈ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇｈｔ ｉｓｏｆｏｒｍｓ ｏｆ ｂａｓｉｃ ｆｉｂｒｏｂｌｓｔａ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ（ＦＧＦ－２）：ａｎ ｉｎｓｉｇｈｔ ｉｎｔｏ ａｎ ｉｎｔｒａｃｒｉｎｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ［Ｊ］． ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ［Ｊ［．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，２０００，１（６）：５１６－５２１． ［１２］ Ｓａｎｕｋｉ Ｔ，Ｙｕｍｏｔｏ Ｅ，Ｋｏｍｏｒｉ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ一２ ｉｎ ｔｈｅ ｎｕｃｌｅｕｓ ａｍｂｉｕｕｓｇ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ ｌａｒｙｎｇｅａｌ ｎｅｒｖｅ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｔ『Ｊ］．Ｌａｒｙｎｇｏｓｃｏｐｅ，２０００，１１０：２１２８－２１３４． ［１３］Ｍａｔｔｓｏｎ ＭＰ，Ｍｕｒｒａｉｎ Ｍ，Ｇｕｔｈｒｉｅ ＰＢ，ｅｔ ａ１．ＦＧＦ ａｎｄ ｇｌｕｔａｍａｔｅ ｏｐｐｏｓｉｎｇ ｒｏｌｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ ｎｅｕｒｏａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ［Ｊ］．Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，１９８９，９（１１）：３７２８—３７４０． ［１４］Ｍｏｃｈｅｔｔｉ Ｉ，Ｒａｂｉｎ ＳＪ．ｃｏｌａｎｇｅｌｏ ＡＭ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｂａｓｉｃ ｆｉｂｒｏｂｌｓｔａ ｒｏｗｇｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｃｏｎｔｕｓｉｖｅ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎｊｕｒｙ【Ｊ］． Ｅｘｐ Ｎｅｎｒｏｌ，１９９６，１４１（１）：１５４—１６４． ［１５］Ｌｅｅ ＴＴ，Ｇｒｅｅｎ ＢＡ，Ｄｉｅｔｒｉｃｈ ＷＤ，ｅｔ ａ１．Ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｂａｓｉｃ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｃｏｎｔｕｓｉｖｅ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｔ［Ｊ［．Ｊ Ｎｅｎｒｏｔｒａｕｍａ，１９９９，１６（５）：３４７—３５６． ＦＥＢＳ ｔｔ，２０００，４６８（１）：６－１０． ［５］Ｋｏｐｅｎ ＧＣ，Ｐｒｏｅｋｏｐ ＤＪ，Ｐｈｉｎｎｅｙ ＤＧ．Ｍａｒｒｏｗ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｍｉｒａｔｇｅ ｔｈｒｏｕｇｈｏｕｔ ｆａｒｅｂｒａｉｎ ａｎｄ ｃｅｒｅｂｅｌｌｕｍ，ａｎｄ ｔｈｅｙ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅ ｉｎｔｏ ａｓｔｒｏｃｙｔｅｓ ａｆｔｅｒ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｉｎｔｏ ｎｅｏｎａｔｌａ ｍｏｕｓｅ ｂｒａｉｎｓ［Ｊ［．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ （收稿日期：２００９—１１—０６） １６中国现代医生ＣＨＩＮＡ ＭＯＤＥＲＮ ＤＯＣＴＯＲ
