２０１７年Ｏ８月 牡丹江医学院学报 Ｊｏｕｍａｌ ｏｆ ＭｕＤａｎＪｉａｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ａｕｇ．２０１７ 第３８卷第４期 Ｖｏ１．３８ Ｎｎ ４ ２０１７ ・３９・ 全自动血红蛋白电泳仪诊断地中海贫血的临床价值 叶健翔，冼艳斌，温宝欣，刘勇波 （肇庆市第二人民医院；广东摘要： 目的肇庆５２６０６０） 选择２０１５年２月至２０１６年２月期间医 分析全自动血红蛋白电泳仪诊断地中海贫血的临床价值。方法院收治的地中海贫血患者２００例，均经地贫基因确诊，采用全自动血红蛋白电泳仪对２００例患者血生化指标进行检测，并进行 地贫基因分析，对血红蛋白Ｆ水平进行检测，比较不同方式对 型、Ｂ型、 Ｂ型地中海贫血符合情况，评估全自动血红蛋白电 泳仪的诊断价值。结果以地贫基因诊断结果为标准，全自动血红蛋白电泳仪检出４７例 型地中海贫血，符合率为７１． 在地中海贫血临床诊 ２１％，检出１２９例ｐ型地中海贫血，符合率为９７．７３％，检出２例 Ｂ复合型地中海贫血，符合率为１００．００％；基因位点检测， 型地中海贫血以一ＳＥＡ／ａａ基因型较为常见，Ｂ型地中海贫血以ＣＤ４１—４２位点突变较为常见。结论具有重要的临床应用价值。 关键词：地中海贫血；全自动血红蛋白电泳仪；诊断价值 中图分类号：Ｒ５８７．１ 文献标识码：Ａ文章编号：１００１—７５５０（２０１７）０４—００３９—０２ 断中，全自动血红蛋白电泳仪具有准确性高、精确性高等特点，必要时可结合基因位点检测，为疾病的诊断提供重要的依据， 地中海贫血，又称为海洋性贫血，是一组遗传 电泳仪检查。全自动血红蛋白电泳仪、自动扫描仪 性、溶血性贫血疾病，主要包括仪型地中海贫血、 及配套试剂由法国Ｓｅｂｉａ公司提供。采集患者肘静 型地中海贫血、 Ｂ复合型地中海贫血等。据相关数 脉血２ｍＬ作为血液样本，ＥＤＴＡ—Ｋ２抗凝处理，氯 据显示，全球约１．８亿无症状携带者，每年出生的 化钠溶液洗涤３次样本，混合摇匀红细胞１Ｏ ＋溶 ａＬ，取混合液１Ｏ Ｌ注入加样孑Ｌ内，经仪器 １００万缺陷患儿中，重症地中海贫血患儿≥２Ｏ万，是 血素１３０１危害较大的一种遗传疾病，严重影响患者身体健康 进行自动点样、电泳、染色、脱色、烘干等处理。分析 和生活质量。目前临床针对地中海贫血缺乏特效治 Ｈｂ中各成分水平，描绘出扫描图谱。全部操作严格 疗方法，为避免地中海贫血人群扩大，往往需要对育 按照说明书进行。同时，采用Ｇａｐ—ＰＣＲ技术检测 龄人群进行筛查。全自动血红蛋白电泳仪具有诊断 常见３种缺失型０【地中海贫血基因，采用反向斑点 和分离异常血红蛋白的作用，对筛查和诊断血红蛋 杂交技术检测Ｂ地中海贫血１７种基因。白疾病、地中海贫血提供科学依据，但最终需要采用 １．３ 诊断标准 ｏ【型地中海贫血阳性：ＨｂＡ２≤ 基因确诊。本文收集了２００例经基因确诊的地中海 ２．５％，或血红蛋白带（ＨｂＨ）存在异常；Ｂ型地中海 贫血患者临床资料，分析全自动血红蛋白电泳仪的 贫血阳性：ＨｂＡ２＞３．５％，或血红蛋白Ｆ带存在异常 （ＨｂＦ＞２．０％）。 诊断价值，情况如下。 １资料与方法 １．１ 临床资料选择２０１５年２月至２０１６年２月 期间医院收治的地中海贫血患者２００例，男性８９ 例，女性１１１例，年龄６个月～６８岁，平均年龄（３０． ５４±３．８２）岁；０ｌ型地中海贫血６６例，Ｂ型地中海贫 血１３２例， Ｂ复合型地中海贫血２例。要求检查的 原因：血常规检查发现平均红细胞容积（ＭＣＶ）减 少、红细胞脆性筛查＜６０％、家庭有地中海贫血携带 者、夫妇中一方为地中海贫血携带者。入组标 准 Ｊ：经基因检查确诊为地中海贫血；自愿接受全 自动血红蛋白电泳仪检查；临床依从性较高，临床资 料完整可靠，自愿签字知情同意书，同时经医院伦理 委员会批准。 １．２检查方法全部患者均接受全自动血红蛋白 ２结果 ２．１全自动血红蛋白电泳仪诊断结果比较以地 贫基因诊断结果为标准，全自动血红蛋白电泳仪诊 断结果显示，检出ｏ【型地中海贫血４７例，检出符合 率为７１．２１％（４７／６６）；检出Ｂ型地中海贫血１２９ 例，检出符合率为９７．７３％（１２９／１３２）；检出 ｐ复合 型地中海贫血２例，检出符合率为１００．００％（２／２）。 表１ 全自动血红蛋白电泳仪诊断地中海贫血结果 作者简介：叶健翔（１９８３一），男，本科，主管技师，从事分子遗传和生化免疫研究工作。 ２０１７年０８月 ・牡丹江医学院学报 ＪｏｕｍＭ ｏｆ ＭｕＤａｎＪｉａｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅ￣ｉｔｙ Ａｕｇ．２０１７ ＶｏＬ ３８ ＮＯ．４ ２０ｌ７ ４０・ 第３８卷第４期 ２．２基因位点检测结果分析检出的４７例０【型地 中海贫血患者中，一ＳＥＡ／ａｏ￣２８例（５９．５７％），一 ＳＥＡ／一０【ｊ＿１ １１例（２３．４０％），一ＳＥＡ／一ｏ【 ４例（８． ５１％），一４，２￣ｏｒａｌ例（２．１３％），一仅 ／ｃ￣ｏｔ３例（６． ３８％）。检出的１２９例Ｂ型地中海贫血患者中，发 现了７个位点变异，ＣＤ４１～４２者４１例（３１．７８％）， ＣＤ１７者２８例（２１．７１％），ＩＶＳ一Ⅱ一６５４者２８例 （２１．７１％），一２８者１２例（９．３０％），ＣＤ４３者１０例 组研究中，采用全自动血红蛋白电泳仪检测２００例 已确诊的地中海贫血患者，０ｃ型地中海贫血检出符 合率７１．２１％（４７／６６），Ｂ型地中海贫血检出符合率 为９７．７３％（１２９／１３２），０【Ｂ复合型地中海贫血检出 符合率为１００．００％（２／２），可见全自动血红蛋白电 泳仪在地中海贫血检测中具有重要价值，诊断准确 率高，可广泛应用于地中海贫血筛查中。笔者结合 临床经验，发现血红蛋白电泳法受一些因素的限制： （７．７５％），ＣＤ７１—７２者６例（４．６５％），Ｅ ４例（３． １０％）。 ３讨论 珠蛋白生成障碍性贫血，即地中海贫血，因遗传 基因缺陷，引起血红蛋白中一种或以上珠蛋白链合 成缺如、不足所引起的贫血状态。地中海贫血在世 界许多地区广泛分布，我国四川、广东、广西发生率 较高，需引起高度重视。地中海贫血患者病情严重 时，可出现贫血、肝脾肿大、黄疸、发育不良等，伴有 骨骼改变、胸腔肿块、下肢溃疡等，随着病情的进展， 可能引起脏器损害，导致患者死亡。仪型地中海贫 血、 型地中海贫血是地中海贫血常见类型，仪型地 中海贫血者，Ｂａｒｔ’ｓ水肿胎儿早产夭折，标准型及静 止型患儿出生半年左右Ｈｂ Ｂａｒｔ’ｓ区带消失，可利 用电泳发发检出此病。Ｂ型地中海贫血表现为 ＨｂＦ、ＨｂＡ２水平上升。受基因缺陷复杂性、多样性 的影响，地中海贫血分类、分型多，临床症状变异性 大，早期诊断比较困难。国内外多采用聚合酶链反 应技术与分子生物学技术联合检测地中海贫血，基 因分析是临床对地中海贫血确诊和分型的“金标 准”＿３ Ｊ。由于分子生物学技术要求高，检测过程繁 琐，无法在基层医院广泛应用。因此探寻一种操作 简单、方便的检测方法十分重要。血液法是筛查地 中海贫血的重要手段，包括平均红细胞参数（ＭＣＨ、 ＭＣＶ、ＭＣＨＣ）、红细胞脆性、ＨｂＦ碱变性试验、血红 蛋白电泳等，红细胞脆性检查时，可有效确定患者是 否为地中海贫血，操作简单，经济性较高，可满足基 层医院的需求。但红细胞脆性试验灵敏度较低，贫 血严重的标本，由于溶血产生红细胞碎片或增加网 织红细胞，也可能因标本不新鲜影响检查结果。血 液学指标属于常规检查，可有效区分缺铁性贫血患 者，筛查健康人群，而血红蛋白电泳在地中海贫血诊 断中具有较高的价值。韦振空 研究发现全自动 血红蛋白电泳可以准确测定受检者ＨＢ含量，扫描 定量准确，提高异常血红蛋白检出率。采用全自动 血红蛋白电泳仪定量检测ＨｂＡ、ＨｂＡ２、ＨｂＦ水平，可 初步区分Ｏ／．型地中海贫血、Ｂ型地中海贫血，筛查出 各种异常血红蛋白，如ＨｂＨ、ＨｂＧ、ＨｂＥ，为疾病诊断 提供依据，为基因诊断和遗传咨询提供基础。在本 电泳成本高、标本需洗涤红细胞和溶血处理、检测周 期长等，延长患者等到结果，直接影响检查的依从 性。同时，不同试剂、不同检验人员操作可能出现不 同结果，增加了漏诊率。因此，需要定期培训工作人 员的操作技能，提高技术水平，并定期检查试剂保质 期，保养仪器，尤其对临界结果进行复查，提高诊断 准确率。在采用全自动血红蛋白电泳仪诊断时，应 注意以下几点 Ｊ：（１）在检查仪地中海贫血时，有 条件者同时进行ｐＨ ８．６微量醋酸纤维薄膜电泳对 照，避免漏诊，采用醋纤膜电泳复查时，ＨｂＡ２区带 淡染，ＨｂＡ２水平降低；或出现ＨｂＣＳ区带；或出现高 度怀疑结果：进１７％异丙醇试验为阳性、热不稳定 试验结果为阳性、红细胞脆性增加、形态异常等。 （２）一定程度上全自动血红蛋白电泳仪扫描上升的 ＨｂＦ可替代碱变性试验测定ＨｂＦ，但在正常范围内 ＨｂＦ无法扫描定量，只能作为正常参考。Ｈｂ Ｂａｒ’Ｓ 属于抗碱血红蛋白，全自动血红蛋白电泳仪无法完 全代替碱变性试验。（３）血红蛋白电泳法虽能作出 ＨｂＨ、Ｈｂ Ｂａｒ’ｓ定量，但醋纤膜电泳的定量检测更 加可靠。综上所述，采用全自动血红蛋白电泳仪诊 断地中海贫血时，对ＨｂＦ、ＨｂＡ２分辨率高，可直接 用肉眼观察，扫描出ＨｂＡ２定量，判定ＨｂＡ２含量是 否上升，扫描定量准确，电泳区带清楚，为地中海贫 血的临床诊断提供科学依据，有效提高诊断准确性。 由于此研究纳入的仅Ｂ复合型地中海贫血较少，在 以后研究中需适当增加例数，进一步完善检测。 参考文献 ［１］马勇．用全自动血红蛋白电泳仪诊断地中海贫血的临Ｊ未价值 ［Ｊ］．当代医药论丛，２０１４，１２（１４）：４６—４６，４７． ［２］卢新兆，黄晓华，赖东莲，等．全自动血红蛋白电泳在珠蛋白生 成障碍性贫血诊断中的临床价值［Ｊ］．国际检验医学杂志， ２０１ １，３２（２Ｏ）：２３８３—２３８４． ［３］黄东平．两种血红蛋白电泳技术在筛查及诊断地中海贫血中的 临床价值［Ｊ］．齐齐哈尔医学院学报，２０１３，３４（３）：３４５—３４６． ［４］吴东升，丁茜，王前．祛铁治疗对再生障碍性贫血患者造血恢复 的作用［Ｊ］．牡丹江医学院学报，２０１４，１２（４）：５８—５９ ［５］韦振空．全自动血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的应翊价值 ［Ｊ］．医药前沿，２０１３，１２（８）：２８０—２８１． ［６］郭昭鹏，郭伟逢，蔡建财，等．深圳市罗湖区居民对地中海贫血 知识和态度的调查研究［Ｊ］．牡丹江医学院学报，２０ｌ２，１Ｏ（５）： １３—１７． （收稿日期：２０１７一【）４—０２本文编辑：张春军）