鸡卵黄抗体的研究与应用

２（Ｄ７年９月　韶关学院学报・自然科学　Ｊｏｕｍａｌ　ｏｆ　Ｓｈａｏｇｕａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ・Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｓｅｐ．２（Ｄ７　第２８卷　第９期　Ｖ０１．２８　Ｎｏ．９　鸡卵黄抗体的研究与应用　刘博婷　。朱必凤　（１．南昌大学生命科学学院，江西南昌３３００２９；２．韶关学院英东生物工程学院，广东韶关５１２００５）　摘要：免疫母鸡的卵黄内舍有抗体这一发现，推动了卵黄抗备技术的发展．研究发现卵黄抗体更优于哺乳动　物所产生的抗体，而且减少了对动物的伤害．分析了卵黄抗体的生物学特性、作用机理以及用途，　关键词：卵黄抗体；提取；纯化　中图分类号：￥８５２，５　文献标识码：Ａ　文章编号：１１９０７—５３４８（２ｏ０７）０９一ＯＯ９４—０４　卵黄抗体（ＩｇＶ）指从免疫禽蛋中提取出的针对特定抗原的抗体．鸟类、爬行类和两栖类动物的蛋黄中仅　含有免疫球蛋白ＩｇＧ一种成分．因为只有免疫球蛋白ｒｇＧ分子能通过卵黄囊转输至蛋黄中，因此用抗原免疫　的母鸡所生的鸡蛋黄中含有丰富的免疫球蛋白ＩｇＧ．由于鸡蛋黄的英文名称为“Ｙ０ｌｌ（”，特取它的第一个字母　“Ｙ”为代表，将鸡蛋黄中的免疫球蛋白ＩｇＧ称为ＩｇＹ（Ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｈｎ—Ｙ０ｌｋ）．　１卵黄抗体ＩｇＹ的特性　ＩｇＹ的性质与哺乳动物的ＩｇＧ相似．正常鸡ＩｇＹ的等电点约为５．２，分子量约为１８０　ｋｕ，由两条轻链（２Ｌ）　和两条重链（２ｒｔ）组成．与应用抗原免疫哺乳动物所产生的血清ｒｇＧ相比，鸡卵黄免疫球蛋白ＩｇＹ具有以下特　性：（１）鸡卵黄中ＩｇＶ纯度高、含量大．用抗原免疫母鸡后，由免疫母鸡所生的鸡蛋黄中只有　Ｙ一种抗体，其　含量和纯度超过鸡血清ＩｇＧ．（２）特异性高．利用鸡蛋黄免疫球蛋白作为医学上的诊断试剂，其特异性高，不　产生假阳性反应，（３）稳定性好．ＩｇＹ在室温保存半年，其抗体活性不变，在４℃冰箱贮存６～７年，经免疫扩散　法测定其活性降低不超过５％“Ｊ．（４）产量高．免疫的产蛋母鸡是高效率、高质量的　“生产厂”．经用特定抗　原免疫的产蛋母鸡，对抗原可产生持久性应答．抗体在卵黄中出现的时间比在血清中约晚一周，一般在母鸡　被免疫后ｌ５天左右出现．卵黄抗体的消长趋势与血清抗体基本一致，维持时间在数月至一年以上，长于血清　抗体　】．Ｈａｔｔａ等报道ｂ】，经轮状病毒（ＨＲＶ）免疫成功的母鸡，所产蛋中的抗ＨＲＶ　ＩｇＹ效价可维持一年以上．　卵黄中ＩｇＹ的含量超过哺乳动物血清抗体含量，每个卵黄中　ｒＹ含量可达１００～２５０　ｍ　引．从一只兔子体内一　个月可提取　约２００　ｎａｇ，而一只母鸡一个月可提取２　０００～２　８００　ｎａｇ　ｉｇＶ，生产效率是哺乳动物的ｌＯ倍．（５）　采集抗体方便．用抗原免疫母鸡收集鸡蛋方便，无需放血或宰杀动物．可连续获得高滴度抗体，对动物的应　激小，符合动物保护要求．省工、省时，适合大规模生产，且可以大大降低抗体的生产成本．（６）ＩｇＹ不结合类　风湿因子（Ｒｒ）．在免疫学试验中，抗原一抗体复合物能激活Ｆｃ受体，引起蛋白表面发生改变，进而可能对试　验结果产生干扰作用　Ｊ．由于ＩｇＹ不与人血清中抗哺乳动物抗体的抗体反应，如类风湿因子和（人的抗ｒｇＧ　抗体；同时ＩｇＹ也不能与人或细菌Ｆｃ受体结合，如葡萄球菌蛋白Ａ或葡萄球菌蛋白Ｇ　】．因此，使用ｉｇＶ可以　避免由抗哺乳动物ＩｇＧ抗体引起的干扰作用，以避免在免疫检测中经常呈现假阳性反应．（７）ｉｇＶ不激活补　体．鸡的ＩｇＹ不激活哺乳类动物和人的补体系统，补体系统激活后会减少抗原与抗体的结合，从而导致假阴　性结果的产生　】．若用鸡的ＩｇＹ包被微孔板作为捕获抗体，则不含补体，从而可避免补体系统的干扰．（８）ＩｇＶ　能抗酸耐热．杨耀中等用ＥＬＩＳＡ分析不同温度条件下抗体的结合活性，表明ＩｇＹ与兔以外的哺乳类ＩｇＧ有着　收稿日期：２Ｏ（）７—０３一ｏ５　作者简介：刘　婷ｆ１９８１一），女，广东英德人，南昌大学、韶关学院联合培养硕士研究生，主要从事分子生物学研究　维普资讯 http://www.cqvip.com 第６期　刘博婷，等：鸡卵黄抗体的研究与应用　・９５・　大致相同的热稳定性　Ｊ．那红等同样用ＥＬＩＳＡ技术研究，结果表明：ＩｇＹ具有良好的热稳定性，只要温度低于　７５℃就不会发生热变性　ｊ．同时实验发现ＩｇＹ活性在ｐＨ３　３．５时活性才发生下降．因此ＩｇＹ能口服，用以杀　灭胃肠道的病菌．⑨安全．服用ＩｇＹ安全可靠，王忠泽等用治疗剂量（８ｏ一３００　ｍｇ／ｋｇ）的ＩＯ一４Ｏ倍进行试验，　没有发现毒性反应－９Ｊ．美国食品和药品管理局（ＦＤＡ）认为，卵黄免疫球蛋白作为食品比作为药物更有利，并　将其列入“一般公认安全物质”（Ｇｅｎｅｒａｌｌｙ　Ｒｅｃｏｇｎｉｚｅｄ　ａｓ　Ｓａｆｅ，ＧＲＡＳ）范畴．因此，如同每日饮用牛奶一样，消费　者可以放心食用卵黄抗体．　２卵黄抗体的作用机理　特定病原菌的卵黄抗体能直接粘附于病原菌的细胞壁上，改变病原细胞的完整性，直接抑制病原菌的　生长．卵黄抗体可粘附于细菌的菌毛上，使之不能粘附于肠道粘膜上皮细胞．一部分卵黄抗体在肠道内被消　化酶降解为可结合片段，这些片段含有抗体末端的可变小肽（Ｆａｂ部分），这些小肽很容易被肠道吸收，进入　血液后能与特定病原菌粘附因子结合，使病原菌不能粘附易感细胞而失去致病性，从而对非肠道病原菌发　挥抑菌作用．这些Ｆａｂ部分还能与宿主血液中的球蛋白末端相结合，使其免遭机体破坏．患乳房炎的奶牛口　服含抗无乳链球菌和葡萄球菌的卵黄抗体后，乳中体细胞数下降２８％，说明ＩｇＹ起了重要作用．用卵黄抗体　治疗奶牛乳腺炎已得到美国农业部的批准¨０＿　・　３卵黄抗体的提取与纯化　鸡卵黄中含有水分４８．０％、蛋白质１７．８％和脂肪３０．５％，其中大部分脂肪与蛋白质结合以脂蛋白的形　式存在于卵黄颗粒中，不溶于水，只有卵黄球蛋白（Ｏｒ－，Ｉ３、７）是水溶性的（ＷＳＦ），而ＩｇＹ是－／卵黄球蛋白．因此　ＩｇＹ的分离纯化首先需有效地去除卵黄中的脂类，从水溶性蛋白中分离ＩｇＹ．　近十几年来，已建立了许多较为高效而经济的方法．这些方法大多以ＰＥＧ、硫酸葡聚糖、自然胶，如藻酸　钠、角叉菜胶或乙醇沉淀等方法初步纯化蛋白质，产量约为１．５～７．５　ｍｇ／ｍｌ，纯度８７％　８９％．Ａｋｉｔａ等建立　了水稀释法（ＷＤ法），即以９份水稀释１份卵黄，调节ｐＨ值至５．２，４￣Ｃ静置６　ｈ以上，离心去除颗粒，再用硫　酸盐沉淀法浓缩，并经超滤或乙醇沉淀或盐沉淀进一步纯化、浓缩，再经凝胶过滤提纯，产量达９．８　ｍ＃ｍｌ，纯　度９４％ｌ１　．水稀释法提取ＩｇＹ效率高，纯度高，适合卵黄抗体的大规模制备．蛋白质的提纯主要采用层析技　术，ＩｇＹ的纯化也基于这一方法，并加以改进．最常用方法是凝胶层折和离子交换层折．Ｙａｎｇ等用ＤＥＡＥ离子　交换层析提取ＩｇＹ证实回收的抗体不会减少活性ｌ１　．ＩｓＹ的纯化多采用两种层析结合的方法．　４鸡卵黄抗体ＩｇＹ的应用　４．１　应用鸡卵黄抗体ＩｇＹ制备实验诊断试剂　由于鸡蛋黄免疫球蛋白ＩｇＹ不激活补体，不结合类风湿因子，也不与哺乳类动物免疫球蛋白分子的Ｆｃ　受体结合，这使得卵黄抗体在检测诊断上具有更强的特异性和灵敏度．，所以卵黄抗体可以应用于免疫荧光　试验、ＥＬＩＳＡ试验、免疫扩散、免疫电泳等．郑厚旌等用卵黄琼扩实验检验卵黄中的ＩＢＤ抗体水平，结果表明　用卵黄琼扩试验替代血清琼扩试验检测ＩＢＤ抗体水平是可行的，并且具有经济、省力、省时的特点ｌ１引．Ａｌｅｍ．　ｅｉｄａ等用菌毛结构重复蛋白Ａ亚单位（Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ　ｒｅｐｅａｔｉｎｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ　Ａ　ｓｕｂｕｎｉｔ，ＢｆｐＡ）免疫鸡，制各了抗ＢｆｐＡ的　ＩｇＹ，发现该ＩｇＹ可以特异地鉴定致病性大肠杆菌¨引．故ＩｇＹ可作为一种特异而廉价的免疫生物学试剂来识　别和鉴定致病性大肠杆菌．Ｓｈｉｎ等用幽门螺杆菌（Ｈｐ）的不同蛋白质成分免疫鸡，制备的ＩｇＹ鉴别出了５种幽　门螺杆菌的免疫优势蛋白，为制备Ｈｐ的特异性诊断抗体开辟了前景ｌ１　．此外卵黄抗体有望取代传统的多克　隆抗体的生产，获取大量更有效的抗体，同时也可减少对动物的副反应．　４．２　鸡卵黄抗体ＩｇＹ用于免疫防治　卵黄抗体在已患病个体体内对病原微生物有特异性的结合和灭活作用，从而可以治疗疾病．用于健康　动物时，可以提高动物个体对病原微生物的抵抗能力，起到预防作用．目前，卵黄抗体在各种畜禽疫病的免　疫防治方面已经得到了广泛的应用．例如，口服ＩｇＹ对奶牛乳房炎、仔猪、犊牛、幼兔的腹泻都有很好的防治　效果．在抗病毒方面，杨晓梅等用鸭病毒性肝炎Ｉ型鸡胚毒免疫鸡制备的鸡抗鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体，　维普资讯 http://www.cqvip.com ・９６・　韶关学院学报・自然科学　２ＯＯ７年　实际应用于预防时，雏鸭的平均成活率为９６．９％ｎ刮．轮状病毒是引起秋冬季婴幼儿腹泻的主要病原体之一，　目前尚无有效的疫苗．荫俊、郭立君等分别对抗轮状病毒ＩｓＶ的制备，获得了高效的特异性ＩｓＶ，并对其生物　学活性进行了研究ｎ　副．目前抗轮状病毒ｔｓｖ（￣ｎ百贝宁）是我国已商品化的治疗和预防该病的生物制品．在　龋齿的研究方面，Ｄａｎｉｅｌ等用突变链球菌葡聚糖结合蛋白Ｂ（ＧＢＰ—Ｂ）免疫鸡，制备了抗ＧＢＰ—Ｂ的ｔｓＹ（ｔｓＹ—　ＧＢＰ—Ｂ），用此抗体对鼠龋齿模型进行了研究，发现该ＩｓＶ—ＧＢＰ—Ｂ可以预防突变链球菌感染及其引起的龋　齿【１引．近年来，ＩｓＶ还作为药物载体用于胃肠道癌症的治疗．Ｙａｎｇ等从人胃癌ＭＧＣ一８０３细胞中提取ＰｌｌＯ蛋　白作抗原免疫鸡，制备了抗胃癌蛋白ＰｌｌＯ的ＩｓＶ，将之作为运送抗癌药物的载体，发现该抗体能特异地识别　胃肠系统的癌组织ｕ　．这为胃肠系统癌症的治疗开辟了一条新途径，也为其他肿瘤的治疗提供了新思路．用　卵黄抗体治疗疾病，具有安全、高效且无公害的特点，是人们理想的兽医临床药物．据报道，中国农科院哈尔　滨兽医研究所已启动用免疫鸡卵黄抗体治疗ＳＡＰＳ冠状病毒的研究，如若成功，这将为人们防治ＳＡＰＳ提供　一种廉价、高效、方便的治疗手段．可以预见，随着人们对ＩｓＶ的更深入研究，它将会在人类疾病控制中扮演　更重要的角色．当然，应用ＩｓＶ治疗动物疫病也应注意一些问题【加Ｊ．一般说来，ＩｇＹ在疾病发生早期使用效果　较好；它不能与疫苗同期接种，应间隔一定的时间；同时应慎重与抗生素搭配．实践证明，ＩｓＶ以肌肉注射为　好．　４．３　添加剂　鸡卵黄抗体可以经口服而在小肠内局部发挥作用，不存在药物残留和耐药性的问题；而且卵黄抗体液是蛋白　质，有促生长作用．迄今，不同国家的学者已分别研制出多种可作为食品舔加剂的特异性ｔｓｖ来控制以下病菌：变异　链球菌、幽门螺旋杆菌、梭状芽孢杆菌以及产气荚膜芽孢杆菌．在饲料舔加剂方面，多价抗体微生态制剂是特异性　免疫球蛋白与益生菌两种活性物质有机组合的固剂，能充分发挥免疫球蛋白的特异性免疫功能与益生菌的非　特异性免疫及相应生理促进功能，达到预防和治疗感染性疾病的作用，而且具有无污染、无抗药性、无残留、药效持　续时间长等特点，可有效替代抗生素，在畜牧保健领域有广阔的应用前景．Ｙｏｋｏｙａｒｍ等用免疫获得的抗产肠毒素大　肠杆菌的抗体ＩｓＶ喂养新生仔猪，可防止大肠杆菌引发的腹泻【丑Ｊ．据报道，目前我国已生产出第一个产品——壮壮　崽，在防冶仔猪黄、白痢等腹泻，提高弱仔猪的成活率、健仔率，促进生长方面取得了独特的疗效　Ｊ．　５结语　病原体耐药率的增加，使抗生素几乎无效，因此寻找抗生素替代物是重要的．自ＫＩｅｍｐｅｒｅｒ首次报道鸡蛋中存　在抗体以来，人们对鸡蛋中抗体的研究不断深入．ＩｇＶ的结构与ＩｇＧ相似，具有典型的免疫球蛋白的空间构象，也可　与抗原结合．但在许多功能方面与哺乳动物ＩｇＧ不同．ＩｓＶ不与哺乳动物的血清补体和Ｆｃ受体结合，不受类风湿因　子（ＲＦ）的干扰，另外，ＩｓＶ对热、酸均有很强的耐受性，且稳定性好，禽类与以人为代表的哺乳动物亲缘关系较远，有　利于疾病控制，用鸡生产人用的免疫球蛋白，不会将导致人类疾病的病原微生物引入到病人的体内，可以解决治疗　上的后顾之忧．鸡卵黄中ＩｓＶ含量高，产量大，从免疫母鸡卵黄中提取ＩｓＶ是一种极好的选择．在国内，鸡是率先实　现产业化的实验动物，养殖场所简单且便宜，收集鸡蛋勿需强迫性放血，分离和纯化ＩｓＶ抗体简单快速，有利于规　模化生产．因此鸡卵黄抗体（ＩｓＶ）在疾病的诊断与防治中应用前景广阔．　ＩｇＹ在禽畜感染性疾病的研究中已广泛应用，如牛轮状病毒、牛冠状病毒、大肠杆菌、沙门氏茵感染等．　近年来，ｔｓｖ在人类疾病诊治中的应用也倍受关注．多年来的研究证实，口服ｔｓｖ的被动免疫替代抗生素治疗　可以成功地治疗许多肠道疾病．目前，日本和韩国已经有用于治疗预防幽门螺杆菌引起的人胃溃疡病的酸　奶面市．近年来ＩｓＶ应用于一系列的分析诊断技术，包括免疫沉淀、免疫荧光、免疫组化、免疫印迹等，为人类　疾病的诊断开辟了一条新途径．　应用卵黄抗体防治疾病也有不可避免的缺点，如可能带有蛋传染性疾病的病原，对养禽业存在潜在的　威胁．在一定程度上影响了卵黄抗体的开发和应用．今后应尽快制订该类产品质量标准，进一步改善产品性　状，提高产品质量，使其在畜牧生产及人体疾病防治中发挥更大的作用．　维普资讯 http://www.cqvip.com 第６期　参考文献：　刘博婷，等：鸡卵黄抗体的研究与应用　・９７・　［１］徐有良．新型饲料添加剂一鸡卵黄免疫球蛋白［Ｊ】．中国饲料，２００ｏ（２２）：ｌｌ一１２．　［２］吴文福，巫月生，李嘉爱，等．鸡抗猪大肠杆菌血清抗体和卵黄抗体消长规律及其相互关系的探讨［Ｊ］．中国兽药杂志，２ｏ０３，　３７（１）：１６—１８．　［３］ｎａｔｔａ　Ｈ，Ｔｓｕｄａ　Ｋ，Ａｋａｓｈｉ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ｏｒａｌ　ｐａｓｓｉｖｅ　ｉｎ￣ｎｕｎｉｚａｔｉｏｎ　ｅｆｅｃｔ　ｏｆ　ａｎｆｉｈｕｍａｎ　ｒｏｔａｖｉｒｕｓ　ＩｓＹ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｂｅｈａｖｉｏｒ　ａｇａｉＩｌｓｔ　ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃ　ｅｉｌ￣ｔｌｅｓ　［Ｊ］．Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９３，５７（７）：１０７７—１０８１．　［４］张玲，林学颜．免疫球蛋白ｔｓＶ的分子结构与功能［Ｊ］．广东科技，２００３（１）：５６．　［５］Ｋａｐｙａｈｏ　Ｋ，Ｔａｎｎｅｒ　Ｐ，Ｗｅｂｅｒ　Ｔ．Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ　ｂｉｎｇｉｎｇ　ｏｎ　ａ　ｓｏｌｉｄ—ｐｈａｓｅ　ｉｎｌｌｌｌｕｎｏｉｌ￣ｔｔｉｃ　ＴＳＨ　ａｓｓａｙ［Ｊ］．Ｓｃａｎｄｉｎａｖｉａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　ＬＭ￣ｍｔｏｒｙ　Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，１９８９，４９：２１１—２１５．　［６］Ｌａｒｓｓｏｎ　Ａ，Ｂａｌｏｗ　Ｒ　Ｍ，Ｌｉｎｃｌａｈｌ　Ｔ　Ｌ．Ｆｏｒｓｂｅｒｇ　Ｐ　０．Ｃｈｉｃｋｅｎ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ｔａｋｉｎｇ　ａｄｖａｎｔａｇｅ　ｏｆ　ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ［Ｊ］Ｐｏｌｔｒｙ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９３，７２：１８０７—　１８１２．　［７］杨耀中．鸡卵黄抗体的制备及其不均一性［Ｊ］．华东理工大学学报，２００ｏ，２６（１）：５３—５５．　［８］那红．鸡卵黄免疫球蛋白的研究进展［Ｊ］．中国生化药物杂志，１９９７，１８（３）：１５１—１５４．　［９］王忠泽，侯晓军，荫俊，等．抗大肠杆菌Ｏ１５７：Ｈ７鸡卵黄抗体的制备及其被动保护作用的研究［Ｊ］．中国人兽共患病杂志，　２００２，１８（２）：１７—１８．　［１Ｏ］￣Ｐ青．卵黄抗体的作用机理［Ｊ］．畜牧兽医科技信息，２Ｏ０２（４）：３９—４０．　［１１］Ａｋｉｔａ　Ｅ　Ｍ，Ｎａｋａｉ　Ｓ，Ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｍ　ｆｒｏｍ　ｅｇｇ—ｙｏｌｋｓ：Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｐｕｉｒｉｆｃａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉｅｎｅｅ，１９９２，５７：６２９—６３４．　［１２］Ｙａｎｇ　Ｊ．　ｓｅ．１ｅｅｔｉｖｅ　ｒｅｃｏｇｎｉｉｔｏｎ　ｏｆ　ｎｔａａ￣ａｙ　ＩｓＶ　ｆｏｒ　ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ　ｓｙｓｔｅｍ　ｃａｎｃｅ，ｓ［Ｊ］．Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，１９９７，１３（２）：８５—９ｏ．　［１３］郑后旌．用琼扩试验监测鸡传染性法氏囊病卵黄抗体的研究［Ｊ］．中国畜禽传染病，１９９０（３）：３７—３８．　［１４］Ｄｅ　Ａｌｅｍｅｉｄａ　Ｃ　Ｍ，ＱＩｌｉＴｌｔａｎａ　Ｆ　Ｗ，Ｍｅｄｉｎａ　Ａ　Ｅ，ｅｔ　ａ１．Ｅｇｇ　ｙｏｌｋ　ａｎｔｉ—Ｂ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　８，８　ａ　ｔｏｏｌ　ｆｏｒ　ｒｅ（　ｒＩｉ２ｉｎｇ　ａｎｄ　ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ　ｅ￣ａｔｅｒｏ－　ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ　Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ［Ｊ］．Ｓｃａｎｄ　Ｊ　Ｉｍｍｕｎｏｌ，２ＯＯ３，５７（６）：５７３—５８２．　［１５］Ｓｈｉｎ　Ｊ　Ｈ．Ｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｉｍｍｕｎｏｄｏｍｉｎａｎｔ　Ｈｅｌｉｏｂｃａｃｔｅｒ　ｐｙｌｏｒｉ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｗｉｔｈ　ｒｅａｃｔｉｖｔｙ　ｔｏ　Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ—ｓｐｅｃｉｉｆｃ　ｅｇｇ—ｙｏｌｋ　ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ　［Ｊ］．Ｊ　Ｍｅｄ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，２１３０３（５２）：２１７—２２２．　［１６］杨晓梅，刘万钧，李力．鸡抗鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体的研制与应用［Ｊ］．四川畜牧兽医，１９９２（２）：９—１０．　［１７］郭立君，李春晖，赵锋，等．抗轮状病毒ＩｓＹ的研制［Ｊ］．中国生物制品学杂志，２００１，１４（１）：２４—２６．　［１８］荫俊，侯晓军，张松乐，等．抗轮状病毒卵黄免疫球蛋白制备工艺及生物学活性研究［Ｊ］．药学学报，２Ｏ００，１６（２）：５９—６１．　【１９］Ｄａｎｉｅｌ　Ｊ．Ｐａｓｓｉｖｅｔｒａｌ￣ｅｒ　ｏｆｉｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎＹａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｔｏ　ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｍｕｔａｎｓ　ｇｌ嗍ｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｄｅｎｔａｌ　ｃ　ｅｓ［Ｊ］．Ｉｎｆｅ　Ｉｍｕｎｏｌ，２００１，６９（５）：３１３５—３１４２．　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｐｒｏｔｅｉｎＢ　ｃａｒＩ　ｃｏｎｆｅｒｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ　一　［２０］董运起，张学勤，牛建军．注射卵黄抗体应注意的问题［Ｊ］．中国家禽，２００３，２５（１）：２１．　［２１］ＹｏｋｏｙａｍａＨ，ＰｅｒａｌｔａＣＲ，ＤｉａｚＲ，ｅｔ　ａ１．Ｐａｓｓｉｖｅ　ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ　ｅｆｅｃｔ　ｏｆｃｈｉｃｋｅｎ　ｅｇｇ　ｙｏｌｋｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ　ａｇａｉｎｓｔ∞　ｅｒｉⅡ　ｎｔｅｅｒｏｔｏｘｉｇｅｎ—　ｉｃ　Ｅｓｅｈｅｄｃｈｉａ　ｏｉｃｌ　ｉｆｎｅｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｎｅｏｎａｔａｌ　ｐｉｇｌｅｔｓ［Ｊ］，Ｉｎｆｅｃ　Ｉｎｌｍｕｎ，１９９２，６０：９９８—１００７．　［２２］井庆川，魏祥法，史勇．卵黄抗备及在畜牧业中的应用［Ｊ］，中国畜业导刊，２ＯＯ４，２１（１６）：２３．　Ｓｔｕｄｙ　ａｎｄ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｏｆ　ｅｇｇ　ｙ０ｌｌ【　ＬＩＵ　Ｂｏ．ｒｉｎｇ　，ＺＨＵ　Ｂｉ．ｆｅ．ｎ　（１．Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｎａｎｃｈａｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｃｈａｎｇ　３３００２９，Ｊｉ￣ｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ；　２．Ｙｉｎｇｄｏｎｇ　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｓｈａｏｇｕａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｏｇｕａｎ　５１２００５，Ｇｕａｎｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｆａｃｔ　ｔｈａｔ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　Ｃａｌｌ　ａｌｓｏ　ｂｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｙｏｌｋ　ｏｆ　ｅｇｇｓ　ｌａｉｄ　ｂｙ　ｉｍｍｕｎｉｚｅｄ　ｈｅｎｓ，ｌｄ　ｔｅｏ　ｔｈｅ　ｄｅｖｅｌｏｐ—　ｍｅｎｔ　ｏｆ　ｈｅ　ｔｙｏｌｋ　ａｎｔｉｂｏｄｙ　ｔｃｈｎｏｌｅｏｇｙ　ａｓ　ａｌｌ　ａｈｅｍａｔｉｖｅ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ　ｓｔｕｄｙ　ｓｈｏｗ　ｔｈａｔ　ｅｇｇ　ｙｏｌｋ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　ｏｆｆｅｒｓ　ａｄｖａｎｔａｇｅｓ　ｏｖｅｒ　ｍａｍｍａｌｉｎ　ａａｎｔｉｂｏｄｉｓ　ａｅｎｄ　ｌｓｓｅ　ｓｔｒｅｓｓｆｕｌ　ｔｏ　ｎｉａｍａｌｓ．Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ａｎｄ　ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｅａｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｕｓｅ　ｏｆ　ａｎｔｉｂｏｄｉｓ　ｆｅｒｏｍ　ｙｏｌｋ　ａｒｅ　ｄｅｓｃｒｉｂｅｄ　ｉｎ　ｔｈｉｓ　ａｒｔｉｃｌｅ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｙｏｌｋ　ａｎｔｉｂｏｄｙ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｉｏｌｓａｔｉｏｎ　（责任编辑：颜志森）