・２・ 生 旦筮 卷第１２期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｍｏｄ Ｄｒａｇ Ａｐｐ｜，Ｊｕｎ ２０１０．Ｖｏ１．４．Ｎ０．１２ 气相色谱法测定双柏膏中冰片的含量 孙树周何玲 【摘要】 目的用气相色谱法测定双柏膏中的冰片含量。方法 以水杨酸甲酯为内标物，采用内 标物预先加入法，弹性石英毛细管柱Ｓｕｐｅｌｃｏｗａｘ一１０（３０ ｍ×０．３２ ｍｍ，０．２５ ｍ），ＦＩＤ检测器，氮气为载 气，柱温为１１０２２。结果在该色谱条件下，冰片中异龙脑和龙脑及内标物水杨酸甲酯均得到良好的分 离，冰片的回收率为１０３．４％（ＲＳＤ＝０．４％）。结论该法灵敏、准确，重复性好，可用于控制该制剂的 质量。 【关键词】双柏膏；冰片；气相色谱 Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｂｏｒｎｅｏｌ ｉｎ ｓｈｕａｎｇｂａｉ ｏｉｎｔｍｅｎｔ ｂｙ ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ＳＵＮ Ｓｈｕ－ｚｈｏｕ，ＨＥ Ｌｉｎｇ．Ｔｈｅ Ｆｉｔｆｈ Ｂｒａｎｃｈ ｏｆ Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１１４００，Ｃｈｉｎａ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｂｏｒｎｅｏｌ ｉｎ Ｓｈｕａｎｇｂａｉ ｏｉｎｔｍｅｎｔ ｂｙ ＧＣ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｉｎｔｅｒｎａｌ ｓｔａｎｄａｒｄ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｅｍｐｌｏｙｅｄ．Ｍｅｔｈｙｌ ｓａｌｉｃｙｌａｔｅ，ｔｈｅ ｉｎｔｅｒｎａｌ ｓｔａｎｄａｒｄ，ｗａｓ ａｄｄｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅ ｂｅｆｏｒｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．Ｔｈｅ ＧＣ ｓｙｓｔｅｍ ｃｏｎｓｉｓｔｅｄ ｏｆ ｓｕｐｅｌｃｏｗａｘ．１０ ｃｏｌｕｍｎ（３Ｏ ｍ×０．３２ ｍｍ．０．２５ ｍ），ｎｉｔｒｏｇｅｎ ａｓ ｔｈｅ ｃａｒｒｉｅｒ ｇａｓ，ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ａｔ １ ＩＯ￣Ｃ，ａｎｄ ＦＩＤ ａｓ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｏｒ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｂｏｒｎｅｏｌ（ｂｏｍｅｏｌ ａｎｄ ｉｓｏｂｏｍｅｏ１）ａｎｄ ｍｅｔｈｙｌ ｓａｌｉｃｙｌａｔｅ ｗｅｒｅ ｓｅｐａｒａｔｅｄ ｗｅｌｌ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ． Ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｂｏｒｎｅｏｌ ｗａｓ １０３．４％．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ。ａｃｃｕｒａｔｅ，ａｎｄ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｔｏ ｃｏｎｔｒｏｌ ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ． 【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】 Ｓｈｕａｎｇｂａｉ ｏｉｎｔｍｅｎｔ；Ｂｏｒｎｅｏｌ；Ｇａｓ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ 双柏膏是由黄柏、侧柏叶、冰片３味中药组成的复方制 石英毛细管柱Ｓｕｐｅｌｃｏｗａｘ一１０（３０ ｍ ｘ ０．３２ ｍｍ，０．２５ ｍ）。 剂，具活血化瘀、消肿止痛等功效；是较为常用、疗效确切的 １．２试剂冰片对照品（批号１１０７４３－２００５０４），购自中国药品 医院制剂，临床用于治疗跌打损伤早期、疮疡初起红肿热痛 生物制品检定所。 等。本实验建立了制剂中冰片的气相色谱测定方法，用以控 １．３ 双柏膏样品 （生产单位广州市番禺区中医院）。 制其质量…。 ２方法和结果 １仪器与试药 ２．１色谱条件与系统适用性实验Ｈ２流速为３０ ｍｌ／ｍｉｎ，空 １．１仪器岛津ＧＣ－２０１４型气相色谱仪，ＦＩＤ检测器；弹性 气流速为４００ ｍｌ／ｍｉｎ；柱温为１１０２２；进样口温度为２００℃，检 测器温度为２００２２，柱流量为０．９６ ｍｌ／ｍｉｎ，分流比为１２：１。 作者单位：５１１４００广州市药品检验所五分所 ２．８重复性试验取同一批号样品６份，测定含量，结果表 别加入绿原酸对照品溶液２５ ｍｌ（浓度为５１＿８０ ｇ／ｍ１），再精 明，本方法重复性良好，绿原酸含量ＲＳＤ＝１．４％（ｎ＝６）。 密加入５０％甲醇溶液２５ ｍｌ，按２．３项操作，进样，测得回收 ２．９加样回收率试验取同批号样品６份，每份０．２ ｇ，分 率，结果见表１。 表１测得回收率结果 ２．１０样品测定按２．３项下条件，分别测定３批感愈胶囊 ｍｉｎ，结果表明所测样品含量一致，故采用超声处理１５ ｍｉｎ， 样品含量，结果见表２。 供试品中的绿原酸即可提取完全。 表２ ３批感愈胶囊样品含量测定结果（ｎ＝３） 参考文献 ［１］王天志，李永梅．金银花的研究进展．华西药学杂志，２０００，１５ （４）：２９２－２９８． ［２］王月花，夏伯侯，刘月环．反相高效液相色谱法测定银翘解毒 ３讨论 片中绿原酸的含量．中国实验方剂学杂志，２００９，１５（９）：２０－２１． 本方法采用高效液相色谱法测定样品中绿原酸的含量， ［３］ 赵宇，崔晶，边逸群，等．ＲＰ—ＨＰＬＣ测定咽清颗粒中绿原酸的含 方法简单、可靠，可作为感愈胶囊的质控指标之一。文献报 量．食品与药品，２００９，１１（９）：２６－２８． ［４］ 国家药典委员会．中华人民共和国药典［ｓ］一部．化学工业出 道方法 ，用５０％甲醇超声提取，时间分别为ｌ５、３０、４５ 版社，２００５：３３４． ２０１０年６月第４卷第ｌ２期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｍｏｄ Ｄｒｕｇ Ａｐｐｌ，Ｊｕｎ ２ｏ１０，ＶｏＩ． ． ・３－ ２．２样品测定方法 密加入内标溶液１０ ｍｌ，超声３０ ｍｉｎ使溶解；放冷，补足减失 ２．２．１内标溶液的配制精密称取水杨酸甲酯适量，用乙 的重量。用０．４５ ｍ的微孔滤膜过滤，取续滤液１ ｌ注入气 酸乙酯溶解，制成每毫升含２ ｍｇ的溶液，摇匀，作为内标 相色谱仪，测定，计算，即得。 溶液。 ２．３专属性实验按处方量配制缺冰片原料的阴性对照样 ２．２．２对照品溶液的配制：精密称取冰片对照品适量，用内 品，照上述色谱条件与方法测定，比较了供试品溶液、冰片对 标溶液溶解，制成每毫升含１ ｍｇ的溶液，摇匀，作为对照品 照品溶液、阴性对照样品液的色谱图，结果在正文色谱条件 溶液。取１１ １注入气相色谱仪，计算校正因子。 下，样品中各分色谱峰能达到基线分离，阴性对照液中色谱 ２．２．３供试品溶液的配制：精密称取取双柏膏样品２ ｇ，精 峰对测定无干扰（见图１—３）。 ” ； １ 、 ｆ 一 图１阴性对照 图２冰片对照品 图３：双柏膏样品溶液 ２．４线性关系的考察精密称取冰片对照品适量，加乙酸 上述结果表明本方法具有良好的回收率。 乙酯溶解并制成每毫升含４．２ ｍｇ的溶液，作为储备液。分 ２．８样品测定本品３批，按样品测定方法项下操作，计算 别精密量取对照品储备溶液：①１ ｍｌ— ５ ｍｌ；②１ ｍｌ一１Ｏ ｍｌ； 冰片的含量分别为１．８７ ｍｇ／ｇ（批次０９０７０１），１．９８ ｍｇ／ｇ（批 ③２ ｍｌ一１０ ｍｌ；④２ ｍｌ一５ ｍｌ；⑤直接取储备液，加内标溶液 次０９０８０１），１．８６ ｍｇ／ｍｌ（批次０９０９０１）。 至刻度，摇匀。取１ ｌ注入气相色谱仪，按正文所述色谱条 ２．９超声时间考查取双柏膏样品６份，按样品测定方法 件测定峰面积，以浓度为横坐标（Ｘ），对照品峰面积与内标 项下操作，超声时间分别为３０ ｍｉｎ（２份），４５ ｍｉｎ（２份），６０ 峰面积之比为纵坐标（Ｙ），绘制标准曲线，计算回归方程。 ｍｉｎ（２份）。结果分别为：２．０６ ｍｅ，／ｇ（３０ ｍｉｎ），２．０８ ｍｒ，／ｇ（４５ 线性方程为：Ｙ＝０．５５２８Ｘ－０．００９０４５，ｒ＝０．９９９９ ｍｉｎ），２．０８ ｍｇ／ｇ（６０ ａｒｉｎ）。表明：超声时间定为３０ ｍｉｎ可以 结果表明冰片（以异龙脑和龙脑合计）在０．１７～４．２ ｍｇ／ 使样品完全溶解。另取了一份对照品溶液１０ ｍｌ，超声３０ ｍｌ范围内有良好的线性关系。 ｍｉｎ，同法操作，与未超声的对照品溶液进行比较，结果发现 ２．５精密度实验（重复性实验）取同一批号的双柏膏样品６ 对照品溶液超声３０ ｍｉｎ后，峰面积比基本没有变化，说明超 份，按样品测定方法项下平行实验，测定其含量，结果为冰片 声３０ ｍｉｎ不会造成冰片的挥发与损失。 含量（以异龙脑和龙脑合计）为１．８９ ｍｇ／ｇ，ＲＳＤ为１．７％（ｎ ３讨论 ＝６）。 ３．１药物制剂中冰片原料通常为合成品，在生产过程中有 ２．６样品溶液稳定性实验取同一批号的供试品溶液，精 异龙脑生成，用气相色谱分析为两个峰，故计算含量时应取 密吸取１ ｌ，在０ ｈ和间隔２４ ｈ后进样，测定，进行峰面积比 异龙脑和龙脑峰二者之和 Ｊ。 考察。０ ｈ的峰面积比为０．２１１，２４ ｈ后峰面积比为０．２０３， ３．２本实验也做了挥发油提取，冷浸提取，超声提取３种方 两者相对平均偏差为２．０％。结果表明，供试品溶液在２４ ｈ 法的比较，发现计算结果基本一致，因此采用了效率最高的 内基本稳定。 超声提取法。 ２．７加样回收率实验精密称取双柏膏样品约１ ｇ，精密加 ３．３做精密度实验时称取样品为２ ｇ，做回收率实验时称取 入内标溶液及对照品溶液（１ ｍｇ／ｍ１）各５ ｍ１，按样品测定方 样品为１ ｇ，都得到了较好的实验结果，说明无论称取１ ｇ～ 法项下操作，共６份；照上述色谱条件，以异龙脑和龙脑合 １Ｏ ｍｌ，还是２ ｇ～１０ ｍｌ，都能达到完全溶解。而称取２ ｇ样品 计，计算回收率。结果见表１。 灵敏度会更高，误差会更小，因此方法定为称取２ ｇ样品。 表１冰片回收率结果 ３．４本实验方法灵敏度高，专属性与重复性好，操作简便， 加入样品量 加入对照品量 澳惘量 回收率平均回收ＲＳＤ 可用于双柏膏冰片含量的质量控制。 （ｍｇ／１０ｍ１） （，ｗ／ｌＯｍ１）（ｍ １０ｍ１） （％） 率（％） （％） 参考文献 ［１］邢俊波，曹红．气相色谱法测定脑通注射液中冰片的含量．时 珍国医国药，２００８，１９（０９）：２２４５－２２４６． ［２］ 魏学冰．气相色谱法测定肤疡宁软膏中冰片的含量．中成药， ２００４，２６（Ｏ１）：７６＿７７．
