红细胞渗透脆性检验试剂盒(一管法)

1、 【预期用途】

适用于体外检测贫血等引起的红细胞渗透脆性病变，特别是红细胞渗透脆性降低一类的贫血症筛查。（如地贫症、严重缺铁性贫血症）

2、 【检验原理】

贫血症者常伴有红细胞渗透脆性的改变。测定红细胞在一定渗透浓度下的溶血率，可筛查是否贫血，特别是溶血率降低引起的贫血。

3、 【主要组成成分】

组成

由A母液（红细胞渗透脆性检测液）；B母液（终止红细胞溶血液）；C母液（红细胞溶血液）组成；

成分

A母液采用氯化钠（NaCl）、磷酸氢二钠（Na2HPO4）、磷酸二氢钠（NaH2PO4）制成；B母液采用氯化钠制成；C母液采用皂素（saponin）制成。

4、 【贮存条件及有效期】

避光贮存在2℃~8℃环境中，其保质期12个月。

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A和B试验液可在室温保存，C试验液在2℃~8℃保存；试剂开瓶后有效期为3个月。

5、 【适用仪器】

具有530波长的分光光度计；普通离心机；水浴箱。

6、【样品要求】

新鲜抗凝全血（肝素、EDTA-Na、ACD），置2℃~8℃保存。已发生溶血或有血凝块的标本为不合格样品。标本采集后，测试应在三日内完成。

7、 【检测方法】

【试验液配制】

1、 A试验液：

用一个100ml容量瓶（不要用量筒！），上放一个小漏斗。将A母液倒入漏斗中。用纯化水洗净装A母液的管和盖，将管内余液倒入100ml容量瓶，然后加纯化水于100ml容量瓶中，准确至100ml刻度，混匀后即为A试验液。

2、 B试验液：

将B母液倒入100ml容量瓶中，加入纯化水100ml，混匀后，即为B试验液。

3、 C试验液：

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将C母液倒入100ml容量瓶中，加入纯化水60ml，混匀后，即为C试验液。

【实验操作】

1、 取试管一只，加入A试验液1ml，放37℃，预热1-2分钟。

2、 加入待测抗凝全血10μl，立刻混匀，继续放在37℃保温5分钟。

3、 5分钟后，加入B试验液1ml。混匀，3000转/分钟，离心5分钟。

4、 将上清液轻轻倒入1.0cm × 1.0cm的比色杯中（切勿搅动试管底的红细胞），于530nm波长读取光密度D1（以纯化水作空白对照）。（勿倒掉比色杯中的溶液）

5、 向试管中加入C试验液0.4ml，混匀，待血液全部溶血（透明红色）后，将比色杯中已比色的溶液倒入试管中混匀。

6、 将混匀后的溶液，倒入比色杯中，再于530nm波长比色，读取光密度D2。

7、 按下列公式计算出溶血率百分比。

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溶血 ％ = D1 ×100 ％

D2 X 1.25

8、 【参考值（参考范围）】溶血率％ >65％为正常溶血率；<55％为溶血率降低；（注 56-％为溶血率轻度降低）。

9、 【检验结果的解释】

正常溶血率：指红细胞渗透脆性在正常范围。

溶血率降低：指红细胞渗透脆性降低；常见于地贫或低频基因携带者、严重缺铁性贫血者，小性红细胞增多症贫血者等。

溶血率轻度降低：指红细胞溶血率不明显减低，在正常与可疑贫血症之间。

10、【检验方法的局限性】

本试剂盒仅用于红细胞渗透脆性的检测。使用非新鲜或凝血血标本，可导致结果不可靠。

11、【产品性能指标】

试剂变色或有浑浊沉淀则应判断为失效。

12、【注意事项】

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1、本法对血液标本的新鲜度要求高，应采用72小时内采集的，2-8℃保存的血液进行测试。

2、所有母液放2-8℃保存。此时有结晶析出。用时，必须放在37℃加温摇动至完全溶解后才能使用。A和B试验液可放室温保存，C试验液放2-8℃保存。

3、有效期内的不同批次试剂可疑互相使用。

【参考文献】

1、 杜传书 增瑞萍 华小云等。地中海贫血一管筛查法《一种简易筛查人群地中海贫血的方法1983年》

2、 Sirchotiyakui S,et al. Erythrocyte osmmtic fragility test for screening of alpha-thalssemia-1 and beta-thalassemia trait in pregnancy. Int Gynaecol & Obstet 2004

3、 Panyasei S et al.A simplified screening for alpha-thalassemia 1(SEA type)using a combination of a modified osmotic fragility test and a direct PCR on whole blood lysates.Acta Haematol.108:74-78,2002

4、 Sirichotivakul; S,et al.A comparison of the accuracy of the corpuscular fragility and mean corpuscular volume tests for the alpha-thalassemia 1 and beta-thalassemia trait.Int J.Gynecol Obstet 2009;(in printing)

撰写人：陈丽忠

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审核人：谭少仪

批准人：肖增磺

批准日期 2011年12月1日

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