RNA电泳操作步骤

来源：好走旅游网

RNA电泳

试剂：

琼脂糖（Agarose）、甲醛、甲酰胺、MOPS、EDTA、DEPC水。

步骤

一 5 x MOPS-EDTA Buffer的配制（0.1 M MOPS pH7； 5mM EDTA； 10mM NaAc） 1. 称量20.9g的MOPS，置于1L烧杯中。 2. 加700mL DEPC水溶解。 3. 用2N NaOH调节pH至7.0

4. 在上述溶液中加入10mL的1M的NaAC 5. 溶液中加入10mL的0.5M的EDTA pH=8.0 6. 加DEPC水定容至1L

7. 用0.45um滤膜过滤后避光保存

二 RNA样品处理方法

RNA样品甲醛甲酰胺 5 x MOPS-EDTA Buffer 6 x Loading Buffer DEPC水 X uL 3.5 uL 4.0 uL 4uL 3.0 uL Up to 20 uL

混合均匀后，70°C加热5min，迅速冷却至室温。（PCR仪操作）

三甲醛变性琼脂糖凝胶的制备加1g琼脂糖到31mL DEPC水中，另加10mL 5 x MOPS-EDTA Buffer煮沸溶解。加入DEPC水定容至41mL。将溶液冷却至60°C左右，加入9mL 37%甲醛，倒入胶槽中静置1小时。（胶中加入EB染料）四电泳

混匀电泳槽中的1 x MOPS-EDTA Buffer电泳液，加样，10v/cm条件下电泳约1小时。电泳期间每隔15min混匀电泳槽中的电泳液一次。

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