DNA甲基化在结直肠癌早期诊断中的应用研究

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（）文章编号：１００７－４２８７２０１２０８－１５３１－０３

ＤＮＡ甲基化在结直肠癌早期诊断中的应用研究

马丽红综述，唐彤宇＊审校

（）吉林大学第一医院胃肠内科，吉林长春１３００２１

　　结直肠癌（

ＣＲＣ）是一种基因病，是常见的消化道恶性肿瘤。欧洲ＣＲＣ发病率及死亡率居恶性肿瘤的第二位［１］。我国ＣＲＣ发病率呈逐渐上升趋势［２］。由于饮食和生活习惯变化２００７年全世界新增１２０万ＣＲＣ病例中有６０万人［３］死亡。

目前常用诊断方法如粪便隐血试验（ｆｅｃａｌ　ｏｃｃｕｌｔ　ｂｌｏｏｄ　ｔｅｓｔ，ＯＢＴ）、结直肠镜检查、影像学检查等存在不足，甚至可导致肠道出血、穿孔、感染等并发症，限制了它们在ＣＲＣ早期诊断中的应用，一旦确诊ＣＲＣ多数已为进展期。近年来，表观遗传学机制受到人们的关注，并发现在肿瘤发生发展中

ＤＮＡ序列外的调控机制异常非常普遍［４］

，因此ＤＮＡ甲基化

与肿瘤的关系成为研究热点。ＤＮＡ异常甲基化作为肿瘤发

生发展中的早期事件［５］

，使其成为诊断治疗肿瘤的标志物。

本文就特定基因甲基化在早期诊断ＣＲＣ中的应用综述如下。

　表观遗传学与ＤＮＡ甲基化

表观遗传学是研究非基因核苷酸序列改变所导致的基因表达变化如ＤＮＡ甲基化、

组蛋白乙酰化、染色体重塑等［６］

。研究结果表明，表观遗传学异常与肿瘤发生发展密切

相关，特别是基因启动子区的异常甲基化导致的抑癌基因转

录失活，

影响着肿瘤发生发展的各个阶段［７］

。ＤＮＡ甲基化是指在ＤＮＡ甲基转移酶（ＤＮＡ　Ｍｅｔｈｙｌ－ｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＤＮＭＴ）的作用下，ＤＮＡ的ＣＧ两个核苷酸的胞嘧啶被选择性的添加甲基形成５－甲基胞嘧啶的化学修饰过

程［８］

，ＤＮＡ的不同甲基化状态（

超甲基化与去甲基化）与基因的活性和功能有关。ＤＮＡ甲基化转移酶有两种，持续性甲基化转移酶如ＤＮＭＴ１和另一种是重新甲基化转移酶如ＤＮＭＴ３ａ和ＤＮＭＴ３ｂ，它们可以使去甲基化的ＣｐＧ位点重新甲基化。甲基化位点可随ＤＮＡ的复制而遗传给后代细胞

［９，１０］

。ＤＮＡ甲基化是发生在ＤＮＡ复制之后的基因外修

饰，不改变ＤＮＡ的碱基序列，而是通过影响ＤＮＡ的表达而改变其功能。在人类基因组中，ＣｐＧ常成簇存在，ＣｐＧ岛是碱基ＣＧ出现频率较高的区域，其常位于ＤＮＡ的５’端启动子区，并且人类基因启动子６０％以上包含在ＣｐＧ岛内。基因启动子区ＣｐＧ岛异常甲基化导致基因转录失活，并通过有丝分裂传递这种后生性改变［１１］

。生理情况下，Ｃｐ

Ｇ岛多呈非甲基化状态，大部分散在的Ｃｐ

Ｇ二核苷酸则可为甲基化状态。

异常的基因甲基化可分为总体基因组的低甲基化和局

＊通讯作者

部ＣｐＧ岛的高甲基化。异常的基因甲基化影响基因表达，进一步影响肿瘤发生与发展的各个环节，启动子区ＣｐＧ岛高甲基化导致转录抑制，从而使抑癌基因失活，导致肿瘤发生发展。大量研究表明抑癌基因启动子区的Ｃｐ

Ｇ岛常出现高甲基化现象［１２，１３］

。Ｃｐ

Ｇ岛甲基化在ＣＲＣ中是一种常见的表观遗传改变，如大肠腺瘤息肉基因（ＡＰＣ）、６－甲基鸟嘌呤－ＤＮＡ甲基转移酶（６－ｍｅｔｈｙｌｇｕａｎｉｎｅ－ＤＮＡ　ｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓ－ｅｒａｓｅ，ＭＧＭＴ）、Ｒａｓ相关区域家族１Ａ（ＲＡＳＳＦ１Ａ）等基因在ＲＣ中发生Ｃｐ

Ｇ岛甲基化，这些基因在细胞周期调节、信号转导、血管形成、ＤＮＡ修复等方面发挥重要功能［１

４－１７］，甲基化使其表达异常，从而导致肿瘤的发生发展。　结直肠肿瘤的甲基化表现

．１　总基因组的低甲基化　通过检测肿瘤中的５－ｍＣ，发现整个基因组甲基化水平很低，其中卫星ＤＮＡ、重复序列和内含子中的Ｃｐ

Ｇ位点的低甲基化可能与细胞增殖及细胞周期调控相关［

１８］

，但总体基因组低甲基化的原因和作用机理尚不清楚。Ｃｈｅｎ等［１９］

报道当胚胎干细胞的ＤＮＭＴ出现纯合

性缺失时，ＤＮＡ出现的严重低甲基化（＞７５％）使突变率大大提高，但这种程度的低甲基化是否在存在于ＣＲＣ中，还有待进一步证实。

特定的癌基因在ＣＲＣ中也出现低甲基化，使癌基因（如Ｋ－ｒａｓ基因）表达水平提高。异常高表达的基因表现为低甲基化，

说明低甲基化与肿瘤的发病机制有一定联系。研究表明，

在细胞群体中，原本低甲基化的细胞形成肿瘤的趋势相对较大，基因低甲基化可能是导致肿瘤形成的祖先细胞克隆

扩大的关键因素之一［

２０］

。．２　局部ＣｐＧ岛的高甲基化　和整个基因组低甲基化状态一样，基因启动子区ＣｐＧ岛的局部高甲基化也被认为是肿瘤发生发展过程中的早期事件，

然而两者的发生机制一样亦或是来源于肿瘤发生中的不同机制［

２１］

，目前的研究热点是抑癌基因启动子区的高甲基化，它是除基因突变外的另一种使基因转录失活的机制。Ｒｂ基因是第一个被研究证实与肿瘤相关的高甲基化基因，此后人们开始研究多种抑癌基因，并证实其启动子区的高甲基化状态与肿瘤的发生发展密切相关，如细胞周期依赖性激酶抑制基因（ＣＤＫＮ２Ａ）、ＭＧ－ＭＴ和上皮钙粘素（Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ，ＣＤＨｌ）等。ＣＲＣ的发生发展与很多基因的高甲基化有关，

如抑癌基因、错配修复基因和细胞周期调节基因等。研究表明，ＤＮＡ异常甲基化在肿瘤发生发展中的可逆性为从表观遗传角度治疗肿瘤提供了理

论依据［

２２］

。ＦｆＣ２２１ｔ２—１５３２—

３　基因甲基化在ＣＲＣ早期诊断中的应用

ＤＮＡ甲基化常发生在ＣＲＣ的早期阶段和癌前病变如腺瘤中，故可作为ＣＲＣ早期诊断的指标。正常肠黏膜每２４ｈ有ｌ×１０１０～５×１０１０个上皮细胞脱落，鉴于肿瘤上皮细胞快速的更新速度，

每天至少有１％的细胞脱落入肠道，随粪便排出体外。基因能在粪便内稳定存在，且持续脱落，故微量ＤＮＡ是一种很好的标志物，

并可通过扩增技术如聚合酶链反应（ＰＣＲ）等检测出。并且鉴于粪便检查的无创性、无需肠道准备、肠道任意部位性，大大提高了ＣＲＣ的检出率。尤其随着甲基化特异性ＰＣＲ技术的进展，检测粪便中的ＤＮＡ甲基化情况可作为筛查ＣＲＣ的早期途径。目前国内外已经通

过分析粪便基因来早期诊断ＣＲＣ，Ｂｅｌｓｈｗａ等［２

３］首先证实可把检测粪便ＤＮＡ甲基化水平作为早期ＣＲＣ筛查的有效途

径，Ｍｕｌｌｅｒ等［２４］

的研究结果进一步证实粪便ＤＮＡ甲基化检

测用于ＣＲＣ筛查的良好应用前景，并报道分析分泌性卷曲相关蛋白２（ＳＦＲＰ２）基因甲基化能够检出７７％～９０％的

ＣＲＣ。Ｌｅｎｈａｒｄ［２

５］

报道粪便肿瘤高甲基化基因分析诊断ＣＲＣ的敏感性和特异性分别为４２％、９８％。黄朝晖、

李莉华等［２６］

通过对不同人群ＣＲＣ患者、

结直肠腺瘤患者和正常对照者粪便中增生性息肉蛋白（ＨＰＰｌ）基因甲基化分析，得出ＨＰＰｌ基因甲基化是ＣＲＣ发生发展中的早期事件并有望成

为ＣＲＣ早期诊断的新途径。程之红等［２７］

通过对ＣＲＣ或良

性病变的患者及２４例正常对照者粪便ＳＦＲＰ２基因甲基化状态的分析，得出ＳＦＲＰ２基因甲基化是ＣＲＣ发生发展过程中早期事件，并有望）成为ＣＲＣ早期无创诊断的新途径。很多研究表明，粪便ＤＮＡ甲基化检测可作为ＣＲＣ早期诊断的一种新途径。

ＳＦＲＰ２是一种新的肿瘤抑制基因，在大多数ＣＲＣ中表

现出过甲基化［２８，２９］

；Ｍｕｌｌｅｒ等［２４］分析粪便ＳＦＲＰ２基因甲基

化水平检出７７％～９０％的ＣＲＣ。目前国内研究ＣＲＣ中ＳＦＲＰ２超甲基化发生率大于９０％，对于无创性检测ＣＲＣ具有高度的潜力

［２７，３０］

。ＳＦＲＰ２基因甲基化诊断ＣＲＣ的敏感

度最高，但特异度低，ＭＧＭＴ基因甲基化的特异度最高，敏感度低，因此，联合检测能提高诊断的敏感度，其特异度也略有降低。所以临床上需要筛选不同的基因组合用于粪便甲

基化检测，

以同时保证高水平的诊断敏感度及特异度［３１］

。Ｔ淋巴细胞成熟相关蛋白（Ｔ－ｃｅｌｌ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｐｒｏｔｅｉｎ，ＭＡＬ）基因定位于２ｑ１３，共含有４个外显子，其ｃＤＮＡ长为１０５１ｂｐ

。ＭＡＬ是组成向顶端运输的细胞膜和分泌性蛋白的必不可少的组成部分。Ｇｕｒｏ等［３２］

的研究指出，在ＣＲＣ中

ＭＡＬ基因启动子区甲基化率为８０％，结直肠腺瘤为７１％，正常上皮组织中为４５％，在甲基化阳性的标本中，其蛋白不表达或表达明显降低。粪便中ＭＡＬ、ＣＤＫＮ２Ａ、ＭＧＭＴ基因启动子区甲基化水平在ＣＲＣ和腺瘤患者中明显升高，其联合检测有望成为ＣＲＣ及其癌前病变早期诊断的无创性检测方法

［３１，３３］

。

ＭＧＭＴ是一种ＤＮＡ修复酶，基因定位于１０ｑ２６，全长约为１７０ｋｂ

，含有５个外显子和４个内含子，可以用其编码产Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｌａｂ　Ｄｉａｇｎ，Ａｕｇｕｓｔ，２０１２，Ｖｏｌ　１６，Ｎｏ．８物ＭＧＭＴ从ＤＮＡ上移除烷化剂在０６位形成的０６－鸟嘌呤化合物，使存在ＤＮＡ损伤的细胞停止增殖，恢复ＤＮＡ的结构和功能，是机体抵抗烷化剂损伤的主要保护因素。研究表明，ＭＧＭＴ基因启动子的高甲基化是ＭＧＭＴ表达缺失的主要原因。消化系统直接接触烷化致癌物，

因此ＭＧＭＴ失表达在消化系统肿瘤的发生发展过程中具有更为重要的意义。有研究显示，ＣＲＣ中ＭＧＭＴ启动子区ＣｐＧ岛的超甲基化，导致ＭＧＭＴ失表达，基因损伤修复失败，从而导致肿瘤的发

生［３４］

。有研究表明，联合检测ＨＰＰｌ和ＭＧＭＴ基因甲基化

对进展期腺瘤有较高的检出率（８０％），对于早期发现和切除癌变前的腺瘤，降低ＣＲＣ的发病率和死亡率具有重大的意

义［

３１，３５］

。　结语与展望

ＣＲＣ是常见的消化道恶性肿瘤之一，近年来其发病率、死亡率呈逐年上升趋势，并逐渐年轻化。目前ＤＮＡ甲基化是ＣＲＣ疾病发展过程中的重要环节，鉴于ＣＲＣ发生发展是多因素、

多基因、多途径共同作用的结果，且单个基因甲基化水平的敏感度不高，

因此必须联合检测仅发生于结直肠肿瘤的多种基因的甲基化水平才可获得理想的敏感度与特异度。进一步研究ＤＮＡ异常甲基化的机制，有助于结直肠癌的早期诊断，为结直肠癌的治疗开辟新的道路。参考文献：

［１］Ｆｅｒｌａｙ　Ｊ，Ａｕｔｉｅｒ　Ｐ，Ｂｏｎｉｏｌ　Ｍ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｓｔｉｍａｔｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃａｎｃｅｒ　ｉｎｃｉ－ｄｅｎｃｅ　ａｎｄ　ｍｏｒｔａｌｉｔｙ　ｉｎ　Ｅｕｒｏｐｅ　ｉｎ　２００６［Ｊ］．Ａｎｎａｌｓ　ｏｆ　Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２００７，１８：５８１．

［２］Ｌｉｎｇ　

Ｙａｎｇ，Ｄ．Ｍａｘ　Ｐａｒｋｉｎ，Ｊａｃｑｕｅｓ　Ｆｅｒｌａｙ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｓｔｉｍａｔｅｓ　ｏｆＣａｎｃｅｒ　Ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ　ｉｎ　Ｃｈｉｎａ　ｆｏｒ　２０００ａｎｄ　Ｐｒｏｊｅｃｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　２００５［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ　Ｅｐ

ｉｄｅｍｉｏｌ　Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ　Ｐｒｅｖ，２００５，１４（１）：２４３．［３］Ｊｅｍａｌ　Ａ，Ｓｉｅｇ

ｅｌ　Ｒ，Ｗａｒｄ　Ｅ，ｅｔ　ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ　ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ　２００７［Ｊ］．ＣＡＣａｎｃｅｒ　Ｊ　

Ｃｌｉｎ，２００７，５７：４３．［４］Ｍａｅｋａｗａ　Ｍ，Ｗａｔａｎａｂｌｅ　Ｙ．Ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃｓ：ｒｅｌａｔｉｏｎｓ　ｔｏ　ｄｉｓｅａｓｅ　ａｎｄｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｆｉｎｄｉｎｇｓ［Ｊ］．Ｃｕｒｒ　Ｍｅｄ　Ｃｈｅｍ，２００７，１４（２５）：２６４２．［５］Ｋｏｎｄｏ　Ｙ，Ｉｓｓａ　ＪＰ．Ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃ　ｃｈａｎｇ

ｅｓ　ｉｎ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ　ａｎｄ　Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ　Ｒｅｖｉｅｗｓ．２００４，２３（１－２）：２９．［６］Ｂｉｒｄ　Ａ．Ｐｅｒｃｅｐｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃｓ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，２００７，４４７：３９６－３９８．

［７］Ｊｏｎｅｓ　Ｐ　Ａ，Ｂａｙｌｉｎ　Ｓ　Ｂ．Ｔｈｅ　ｅｐｉｇｅｎｏｍｉｃｓ　ｏｆ　ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｃｅｌｌ，２００７，１２８

（４）：６８３．［８］Ｊｏｎｅｓ　ＰＡ，Ｔａｋａｉ　Ｄ．Ｔｈｅ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ＤＮＡ　ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｍａｍｍａｌｉａｎｅｐｉｇ

ｅｎｅｔｉｃｓ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００１，２９３：１０６８．［９］Ｌｉｎ　Ｈ，Ｙａｍａｄａ　Ｙ，Ｎｇｕｙｅｎ　Ｓ，ｅｔ　ａｌ．Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｉｎｔｅｓｔｉｈｎａｌ　ｎｅｏ－ｐｌａｓｉａ　ｂｙ　ｄｅｌｅｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｄｎｍｔ３ｂ［Ｊ］．Ｍｏｌ　Ｃｅｌｌ　Ｂｉｏｌ，２００６，２６（８）：２９７６．

［１０］Ｅｓｔｅｌｌｅｒ　Ｍ．Ｃａｎｃｅｒ　ｅｐｉｇｅｎｏｍｌｃｓ：ＤＮＡ　ｍｅｔｈｙ

ｌｏｍｅｓ　ａｎｄ　ｈｉｓｔｏｎｅ－ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｍａｐｓ［Ｊ］．Ｎａｔ　Ｒｅｖ　Ｇａｎｅｔ，２００７，８（４）：２８６．［１１］Ｃｈｉｍ　ＣＳ，Ｋｗｏｎｇ　ＹＬ，Ｌｉａｎｇ　

Ｒ．Ｇｅｎｅ　ｈｙｐｅｒｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｍｕｌｔｉ－ｐｌｅ　ｍｙｅｌｏｍａ：ｌｅｓｓｏｎｓ　ｆｒｏｍ　ａ　ｃａｎｃｅｒ　ｐａｔｈｗａｙ　ａｐｐｒｏａｃｈ［Ｊ］．ＣｌｉｎＬｙｍｐｈｏｍａ　Ｍｙ

ｅｌｏｍａ，２００８，８（６）：３３１．［１２］Ｈｅｒｍａｎ　ＪＧ，Ｂａｙｌｉｎ　ＳＢ．Ｇｅｎｅ　ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ　

ｉｎ　ｃａｎｃｅｒ　ｉｎ　ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｗｉｔｈ　ｐ

ｒｏｍｏｔｅｒ　ｈｙｐｅｒｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｎ　Ｅｎｇｌ　Ｊ　Ｍｅｄ，２００３，３４９４中国实验诊断学　２０１２年８月　第１６卷　第８期

（２１）：２０４２．

［１３］Ｆｅｉｎｂｅｒｇ　Ａ　Ｐ，Ｔｙｃｋｏ　Ｂ．Ｔｈｅ　ｈｉｓｔｏｒｙ　

ｏｆ　ｃａｎｃｅｒ　ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃｓ［Ｊ］．Ｎａｔ　Ｒｅｖ　

Ｃａｎｃｅｒ，２００４，４（２）：１４３．［１４］Ｌｅｅ　ＢＢ，Ｌｅｅ　ＥＪ，Ｊｕｎｇ　

ＥＨ，ｅｔ　ａｌ．Ａｂｅｒｒａｎｔ　ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＡＰＣ，ＭＧＭＴ，ＲＡＳＳＦ２Ａａｎｄ　Ｗｉｆ－１ｇｅｎｅｓ　ｉｎ　ｐｌａｓｍａ　ａｓ　ａ　ｂｉｏｍａｒｋｅｒ　ｆｏｒｅａｒｌｙ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，２００９，１５（１９）：６１８５．

［１５］Ａｈｌｑｕｉｓｔ　Ｔ，Ｌｉｎｄ　ＧＥ，Ｃｏｓｔａ　ＶＬ，ｅｔ　ａｌ．Ｇｅｎｅ　ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ　ｐ

ｒｏｆｉｌｅｓｏｆ　ｎｏｒｍａｌ　ｍｕｃｏｓａ，ａｎｄ　ｂｅｎｉｇｎ　ａｎｄ　ｍａｌｉｇｎａｎｔ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｔｕｍｏｒｓ　ｉ－ｄｅｎｔｉｆｙ　ｅａｒｌｙ　ｏｎｓｅｔ　ｍａｒｋｅｒｓ［Ｊ］．Ｍｏｌ　Ｃａｎｃｅｒ，２００８，７：９４．［１６］Ｋｒａｋｏｗｃｚｙｋ　Ｌ，Ｓｔｒｚｅｌｃｚｙｋ　ＪＫ，Ａｄａｍｅｋ　Ｂ，ｅｔ　ａｌ．Ｍｅｔｈｙ

ｌａｔｉｏｎ　ｏｆｔｈｅ　ＭＧＭＴ　ａｎｄ　ｐ１６ｇｅｎｅｓ　ｉｎ　ｓｐｏｒａｄｉｃ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ａｎｄｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ｎｏｒｍａｌ　ｃｏｌｏｎｉｃ　ｍｕｃｏｓａ［Ｊ］．Ｍｅｄ　ＳｃｉＭｏｎｉｔ，２００８，１４（１０）：２１９．

［１７］Ｃｈａｎ　ＡＯ，Ｒａｓｈｉｄ　Ａ．ＣｐＧ　ｉｓｌａｎｄ　ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｐ

ｒｅｃｕｒｓｏｒｓ　ｏｆｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ　ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ［Ｊ］．Ｃｕｒｒ　Ｍｏｌ　Ｍｅｄ，２００６，６（４）：４０１．

［１８］Ｇｏｏｄｍａｎ　Ｊｌ，Ｃｏｕｔｓ　ＪＬ．Ｈｙｐｏｍｅｔｈｙ

ｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＤＮＡ：ａｐｏｓｓｉｂｌｅｎｏｎｇｅｎｏｔｏｘｉｃ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇ　ｔｈｅ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｃｅｌｌ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｉｎ　ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ［Ｊ］．ＥｎｖｉｒｏｎＨｅａｌｔ　Ｐｅｒｓｐｅｃｔ，１９９３，１０１（ｓｕｐｐ

ｌ５）：１６９．［１９］Ｃｈｅｎ　ＲＺ，Ｐｅｔｔｅｒｓｓｏｎ　Ｖ，Ｂｅａｒｄ　Ｌ，ｅｔ　ａｌ．ＤＮＡ　ｈｙｐｏｍｅｔｈｙ

ｌａｔｉｏｎｌｅａｄｓ　ｔｏ　ｅｌｅｖａｔｅｄ　ｍｕｔａｔｉｏｎ　ｍｔｅｓｔ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，１９９８，３９５：８９．［２０］Ｒａｙ　

ＪＳ，Ｈａｒｂｉｓｏｎ　ＭＬ，ＭｃＣｌａｉｎ　ＲＭ，ｅｔ　ａｌ．Ａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｔｈｅｍｅｔｈｙｌａｌｉｏｎ　ｓｔａｔｕｓ　ａｎｄ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒａｓ　ｏｎｃｏｇｅｎｅ　ｉｎ　ｐｈｅｎｏ－ｂａｒｂｉｔａｌ－ｉｎｄｕｃｅｄ　ａｎｄ　ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ　Ｂ６Ｃ３Ｆ１ｍｏｕｓｅ　ｌｉｖｅ　ｔｕｍｏｒｓ［Ｊ］．Ｍｏｌ　Ｃａｒｃｉｎｏｇ

，１９９４，９：１５５．［２１］项平．大肠癌的表观遗传修饰改变［Ｊ］．中国消化内镜，２００８，１

（２）：３８．

［２２］Ｓｈａｈｒｚａｄ　Ｓ，Ｂｅｒｔｒａｎｄ　Ｋ，Ｍｉｎｈａｓ　Ｋ，ｅｔ　ａｌ．Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ＤＮＡ　ｈｙ

－ｐｏｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ　ｂｙ　ｔｕｍｏｒ　ｈｙｐｏｘｉａ［Ｊ］．Ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｅｓ，２００７，２：１１９．［２３］Ｂｅｌｓｈａｗ　ＮＪ，Ｅｌｌｉｏｔｔ　ＧＯ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ　ＥＡ，ｅｔ　ａｌ．Ｕｓｅ　ｏｆ　ＤＮＡ　

ｆｒｏｍｈｕｍａｎ　ｓｔｏｏｌｓ　ｔｏ　ｄｅｔｅｃｔ　ａｂｅｒｒａｎｔ　ＣｐＧ　ｉｓｌａｎｄ　ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｇｅｎｅｓｉｍｐｌｉｃａｔｅｄ　ｉｎ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ　Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ　ＢｉｏｍａｒｋｅｒｓＰｒｅｖ，２００４，１３（９）：１４９５．

—１５３３—

［２４］Ｍｕｌｌｅｒ　ＨＭ，Ｏｂｅｒｗａｌｄｅｒ　Ｍ，Ｆｉｅｇｌ　Ｈ，ｅｔ　ａｌ．Ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ　ｃｈａｎｇ

ｅｓｉｎ　ｆａｅｃａｌ　ＤＮＡ：ａ　ｍａｒｋｅｒ　ｆｏｒ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｃａｎｃｅｒ　ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ［Ｊ］．Ｌａｎ－ｃｅｔ，２００４，３６３（９４１７）：１２８３．

［２５］Ｌｅｎｈａｒｄ　Ｋ，Ｂｏｍｍｅｒ　ＧＴ，Ａｓｕｔａｙ　

Ｓ，ｅｔ　ａｌ．Ａｎａｌｙｓｉｓ　０ｆｐｒｏｍｏｔｅｒｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｓｔｏｏｌ：Ａｎｏｖｅｌ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｌｏｒｅｃ－ｔａｌ　ｃａｎｃｅｒＪ］．Ｃｌｉｎ　Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ　Ｈｅｐ

ａｔｏｌ，２００５，３：１４２．［２６］黄朝晖，李莉华，杨　帆等．粪便ＨＰＰ１基因甲基化分析在结直

肠癌早期诊断中的价值［Ｊ］．江苏医药，２００７，３３（４）：３７０．［２７］程之红．人粪便ＳＦＲＰ２基因甲基化分析对结直肠癌的诊断价值

［Ｊ］．山东医药．２００７，４７（６）：１０．

［２８］Ｔａｋｅｓｈｉ　Ｎａｇａｓａｋａ，Ｎｏｒｉａｋｉ　Ｔａｎａｋａ，Ｈａｒｒｙ　

Ｍ，ｅｔ　ａｌ．Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆＦｅｃａｌ　ＤＮＡ　Ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ　ｔｏ　Ｄｅｔｅｃｔ　Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ　Ｎｅｏｐｌａｓｉａ［Ｊ］．Ｊ　Ｎａｔｌ　Ｃａｎｃｅｒ　

Ｉｎｓｔ，２００９，１０１：１２４４．［２９］Ｍｉｃｈａｅｌ　Ｏｂｅｒｗａｌｄｅｒ，Ｍａｒｉｏｎ　Ｚｉｔｔ，Ｃｏｒｎｅｌｉａ　Ｗｎｔｎｅｒ，ｅｔ　

ａｌ．ＳＦＲＰ２ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｆｅｃａｌ　ＤＮＡ—ａ　ｍａｒｋｅｒ　ｆｏｒ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｐｏｌ－ｙｐ

ｓ［Ｊ］．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　Ｄｉｓ，２００８，２３：１５．［３０］汤　东，薛彦俊，傅文杰，等．检测粪便中ＳＦＲＰ２基因超甲基化

对筛查结直肠癌的意义［Ｊ］．Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｐｅｏ－ｐ

ｌｅ’ｓ　Ａｒｍｅｄ　Ｐｏｌｉｃｅ　Ｆｏｒｃｅ，２００９，２０（１０）：８７３．［３１］黄朝晖，李莉华，杨　帆，等．粪便ＤＮＡ甲基化分析在结直肠癌

诊断中的应用价值［Ｊ］．中华检验医学杂志．２００７，３０（６）：６１７．［３２］Ｇｕｒｏ　Ｅ　Ｌ，Ｔｅｏｅ　Ａ，Ｍａｔｔｈｉａｓ　Ｋ，ｅｔ　ａｌ．Ｈｙｐｅｒｍｅｔｈｙ

ｌａｔｅｄ　ＭＡＬｇｅｎｅ－ａ　ｓｉｌｅｎｔ　ｍａｒｋｅｒ　ｏｆｅａｒｌｙ　ｃｏｌｏｎ　ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｍａｌ　ｏｆＴｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ　

Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２００８，６（１３）：１２１．［３３

］康燕平，曹付傲，常文军，等．粪便基因甲基化检测在结直肠癌及其癌前病变筛查中的作用［Ｊ］．中华胃肠外科杂志，２０１１，１４（１）：５２．

［３４］Ｖａｓｉｌｉｋｉ　Ｐｓｏｆａｋｉ，Ｃｈｒｙｓｓｏｕｌａ　Ｋａｌｏｇｅｒａ，ｅｔ　ａｌ．Ｐｒｏｍｏｔｅｒ　ｍｅｔｈｙ

ｌａ－ｔｉｏｎ　ｓｔａｔｕｓ　ｏｆ　ｈＭＬＨ１，ＭＧＭＴ，ａｎｄ　ＣＤＫＮ２Ａ／ｐ１６ｉｎ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌａｄｅｎｏｍａｓ，［Ｊ］．Ｗｏｒｌｄ　Ｊ　Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，２０１０，１６（２８）：３５５３．［３５］黄朝晖，杨　帆，李莉华，等．粪便ＤＮＡ甲基化分析在结直肠癌

早期诊断中的价值［Ｊ］．中华消化杂志，２００７，２７（３）：１９０．

（收稿日期：２０１１－１２－１７

）