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[打印]江西省部分地区猪伪狂犬病血清学调查

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防检技术

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本栏目主持人:庞素芬sufen40@hotmail.com

中国动物检疫2008年第25卷第3期

文章编号:(2008)1005-944X03-0029-02

江西省部分地区猪伪狂犬病血清学调查

邓舜洲刘文峰戴益民张文波陈松昌1)万文忠1)王建敏1)

(江西农业大学动物科学技术学院南昌330045)

目前绝大部分猪场都注射了伪狂犬疫苗(主要是基因缺失苗),且市场上出售的国内外伪狂犬疫苗免疫效果一般都很好,因此,暴发猪伪狂犬病的猪场比较少见。近年来,猪伪狂犬病的流行方式及表现症状有所变化,单纯伪狂犬病引起种猪繁殖障碍问题有所下降;商品猪群,尤其是3-20日龄仔猪发病率不高(一般在

,但死亡率几乎是100%,主2-15%)

要表现为拉稀、神经症状、呼吸困难等。为了解我省母猪出现的繁殖障碍及仔猪的高死亡率发生原因是否与伪狂犬病有关,伪狂犬病毒在我省猪场的感染程度,2005年5月~2006年

对江西省九江市、东乡县、2月期间,

新建县、高安市等11个地区30个注射过伪狂犬gE基因缺失苗养殖规模不同的猪场进行了伪狂犬野毒感染的血清学检测,并将获得的血清学检测数据进行了分析。1实验材料与方法1.1实验材料

1.1.1待检血清样品来源于我省11个县、市养殖规模不同的30个猪场(均注射过伪狂犬gE基因缺失苗),按不同阶段随机采集母猪及小猪的血液,送检血液离心后,分离血清,进行伪狂犬gE-ELISA检测,剩余血清冷冻保存,先后共分离到血清585份。

猪伪狂犬病gE1.1.2抗体检测试剂:

鉴别诊断ELISA试剂盒(包被抗原的酶标板,抗gE蛋白阴、阳性对照血清,抗猪IgG-HRP结合物,洗涤浓缩液,底物A液、B液,终止液,样品稀释液)。以上均由华中农业大学动物病毒室生产,武汉科前动物生物制品有限公司提供。

1.2实验方法

⑴取已包被好的微孔条板,用洗涤液洗板5次,每次静置3分钟倒掉,每次在吸水纸上拍干。

⑵每孔加入以样品稀释液1∶40稀释

1)南昌金牧动物保健服务有限公司江西330013

好的待检样品,每孔100μ同样稀L,释对照血清,设阳性对照1孔,阴性对照1孔,空白对照孔则加100μL样品稀释液,轻轻振匀孔中样品,置37℃温育30分钟。

用洗涤液洗板5⑶倒掉板中的液体,

次,方法同上。

⑷每孔加酶标二抗100μL,置37℃温育30分钟。

方法同上。⑸洗板5次,

B液各1滴(50⑹每孔加底物A液、

室温避光显色10~μL),15分钟。⑺每孔加终止液1滴(50μL),15分钟内在酶标仪上以空白孔调零,测定OD630值。

以空白孔调零,试验成⑻结果判断:

立条件是阳性对照孔OD630值≥0.8,阴性对照孔OD630值必须低于0.2;样品孔OD630值大于0.39为阳性;样品孔OD630值小于0.39为阴性。

⑼对血清学检测结果进行分类统计分析。

2结果与分析对江西省11个县区的30个养猪场母猪和商品猪进行猪伪狂犬野毒感染的血清学检测,结果表明江西省猪场存在较严重的伪狂犬野毒污染,检测的30个猪场中有23个猪场存在不同程度的感染,不同猪群的

母猪和仔PRV感染率为0%~79.21%,

猪血清中伪狂犬野毒抗体阳性率分别为63.34%和20.56%(表1、表2),同时发现在不同区域,猪伪狂犬的血清阳性率呈现出不同的流行规律。2.1江西省猪伪狂犬的区域分布调查结果

从2005年5月~2006年2月对我省养猪比较集中的地区进行了猪伪狂犬病血清学调查。其检测结果表明不同地区阳性率相差较大(见表1、表2),进贤县、新建县、抚州市、高安市血清阳性率较高,均超过50%,以进贤地区最高,达到了66.67%(30/。从区域划分上看,新建、进贤、高45)安、抚州、南昌这五个邻近区域猪伪狂犬阳性率都很高,平均达58.24%。

中国动物检疫2008年第25卷第3期

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(48.60%),见表5。

2.5不同日龄商品猪伪狂犬阳性检出结果

从表6可见,30日龄内与31-60日龄的商品猪伪狂犬阳性率相差不明显,60日龄以上的仔猪阳性率最小,低于平均值。

2.6不同免疫情况的商品猪伪狂犬阳性检出结果

从表7可见,未免疫疫苗的仔猪阳性率最高28.57%(12/42),而免疫两次的商品猪阳性率最低14.58%(7/48)。3讨论

3.1从本实验的猪伪狂犬野毒感染血清学调查结果看出,江西省部分猪场伪狂犬野毒感染仍较严重。调查的规模化养猪场中,母猪伪狂犬阳性率为

与63.34%,仔猪的阳性率为20.56%,

江苏省不同种2000年,何家惠等报道,

猪群的PRV感染率为4.00%~60.86%相比明显要高。流行病学调查同时发现这些猪场都不同程度出现过母猪繁殖障碍现象(流产、产死胎、弱仔)、哺乳仔猪以神经症状、拉稀为主的疫病,推测猪伪狂犬病可能是其原因之一。如果猪场始终存在伪狂犬的野毒感染,一旦伪狂犬疫苗免疫失败,就可能发生疫病给猪场造成损失。

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从总体上看,赣北地区要比赣南阳性率高,最高阳性率(进贤)是最低(赣州市)的5.0倍。

2.2不同养殖规模的母猪阳性检出结果

从表3可见,300头母猪以上的猪场阳性率(54.05%)低于平均阳性率(63.34%),100头母猪以下猪场阳性率最高达72.53%(66/91)。

2.3不同胎次母猪伪狂犬阳性检出结果

从表4可见,不同胎次母猪阳性率有所差异,总体上看1胎阳性率低于平均阳性率,而4胎以上的母猪高于平均阳性率。

2.4母猪不同免疫情况的伪狂犬阳性检出结果

每年免疫两次(大部分在产前一个月左右免疫一次)的母猪阳性率较高(69.32%),明显高于每年免疫三次(每四个月普免一次)的母猪

传播速度不快,通过正确诊断,及时注射疫苗,大多很快就能得到有效的控制。而母猪出现的繁殖障碍,通过本实验室的基因检测,PRV的检出率并不高,而猪繁殖与呼吸综合症、猪瘟的检出率最高。小规模猪场该病的发生率要比大规模猪场大的多,发病率也高,经常出现整窝的死亡,甚至暴发该病,几乎每年都要流行一两次,造成很大的损失。

大部分3.4根据本实验室检测结果,

猪场后备母猪的阳性率也很高,而本场自留的后备母猪要比外面引种的要高。主要由于众多猪场引种时未对购买种猪进行检测,也未对本场留种猪做检测。母猪胎次越多阳性率越高,这可能由于母猪饲养时间相对较长,感染病毒的机会越大,另外隐性感染的母猪由于自身抵抗力下降、应激等因素造成病毒大量复制。调查结果也证明对免疫效果不理想的猪场应考虑每年免疫三到四次。笔者认为根据我省养殖现状,大部分商品猪场想要净化该病很困难。本实验室2003年曾试着对3个感染严重商品猪场进行净化,对检测为阳性的种猪淘汰,每年全群种猪3次免疫,商品猪出生3天内滴鼻,50日龄二免,发现猪只感染该病立即淘汰,4年多的实践来看,这种方式对猪场带来明显的效果,伪狂犬的流行明显减少,但还是时有发生,没能根除。

3.5我省绝大多数猪场肉猪一般只免疫一次,根据本次检测结果显示免

进贤、高安、九江、南疫两次的仔猪阳性率要比未免疫或3.2针对新建、

昌县这五个邻近区域猪伪狂犬阳性免疫一次的要低,虽然该病对60日率最高进行分析,对该地区猪场整体龄以上的猪致死率不高,但影响其生调查,发现该地区频繁猪只进出,购长速度,另外,带毒的猪只持续排毒买后备母猪,从外省抓商品猪,养殖造成整个猪场病毒的传播。密度较大,分布不均,管理不严格等3.6尽管被调查的猪场种猪均接种可能是伪狂犬病流行的危险因素,尤了猪伪狂犬基因缺失疫苗,其中大部其是购买后备母猪越频繁,对发生伪分猪场使用的伪狂犬疫苗为国外公狂犬病的影响越显著。当两猪场距离司生产的基因缺失弱毒疫苗,但仍存过近时,一个猪场的伪狂犬病病原可在如此高的伪狂犬阳性率,这一现象能通过地表水、地下水传入另一个猪应引起高度重视。针对目前江西省部场,还可能通过风力、野生动物(鼠类)分猪场存在伪狂犬野毒感染较严重,的活动传播。兽医行政管理部门应加强对兽用疫

规范疫苗的运输、保存和3.3根据本实验室近年来对我省养苗的管理,

殖规模不同的猪场跟踪调查,采用抗销售;其次,猪场应根据本场的情况体水平监测及基因检测相结合的方由兽医专业人员制订合理的免疫程法。目前,绝大多数规模化猪场,伪狂序,规范疫苗接种的操作方法,减少犬造成的损失较猪繁殖与呼吸综合各种影响机体免疫应激因素(如疫病、症、圆环病毒、猪瘟造成的损失小得饲料中霉菌毒素、饲料环境、饲养密多。这些猪场该病往往造成个别母猪度等),定期进行抗体水平监测及时发产下的仔猪感染,一般在窝内流行,现存在的问题。

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