宁夏医学杂志２０１３年１１月第３５卷第１１期Ｎｉｎｇｘｉａ Ｍｅｄ Ｊ，Ｎｏｖ．２０１３，Ｖｏｌ ３５，Ｎｏ．１１ ・１０３３・ 文章编号：１００１—５９４９（２０１３）１１—１０３３—０３ ・论 著・ 携带ＨＧＦ基因的脐带血干细胞异种移植 促进烧伤创面修复的实验研究 金丽娟，汪玉海 ［摘要］ 目的探讨携带人肝细胞生长因子基因的重组腺病毒（Ａｄ—ＨＧＦ）修饰的脐血干细胞局部异种移 植对烧伤创面愈合的作用。方法用密度梯度离心法检测体外分离培养人脐血干细胞，并以感染复数（ＭＯＩ＝ １００）体外转染Ａｄ—ＨＧＦ。将２４只Ｗｉｓｔａｒ大鼠分为脐血干细胞治疗组（Ａ组，ｎ＝８），Ａｄ—ＨＧＦ修饰脐血干细胞 治疗组（Ｂ组，ｎ＝８），空白对照组（ｃ组，ｎ：８）。建立大鼠深Ⅱ度烧伤模型，根据不同组别将细胞悬液及生理盐水 于创面下多点注射，伤后３、５、７、１４、２１ ｄ观察创面收缩率并采集创面标本，行ＨＥ染色以及创面组织羟脯氨酸的测 定。结果伤后７、１４、２１ ｄ，Ｂ组创口收缩率高于与其他２组，差异有统计学意义意义（Ｐ＜０．０５）；ＨＥ染色显示， ３、５ ｄ各组ＨＥ染色差异无统计学意义，７ ｄ可见Ｂ组表皮化明显；２１ ｄ Ｂ组再生表皮明显厚于其它各组，并可见较 多的新生血管和皮肤附属器生成。伤后５ ｄ Ｂ组羟脯氨酸升高明显，与其他２组比较差异有统计学意义（Ｐ＜ ０．０５）；１４ ｄ羟脯氨酸含量降低，与其他２组比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结论Ａｄ—ＨＧＦ修饰脐血干细 胞异体移植可显著提高烧伤创面愈合速度和质量，为烧伤创面修复提供了新的策略。 ［关键词］ 烧伤创面；重组腺病毒；脐血干细胞；愈合 ［中图分类号］ Ｒ６４４ ［文献标识码］ Ａ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ａｄ—ＨＧＦ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｃｏｒｄ ｂｌｏｏｄ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｏｌｌ ｈｅａｌｉｎｇ ｏｆ ｂｕｒｎ ｗｏｕｎｄｓ ａｆｔｅｒ ｘｅｎｏｇｒａｆｔ ＪＩＮ Ｌ旬 ｎ，ＷＡＮＧ Ｙｕｈａｉ．Ｎｉｎｇｘｉａ Ｐｅｏｐｌｅ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｙｉｎｃｈｕａｎ ７５００２１，Ｃｈｉｎａ ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｃｏｒｄ ｂｌｏｏｄ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｗｉｔｈ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｄｅｎｏｖｉｒａｌ ｖｅｃｔｏｒ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｈｕ— ｍａｎ ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ（Ａｄ—ＨＧＦ）ａｆｔｅｒ ｘｅｎｏｇｒａｆｔ ｏｎ ｈｅａｌｉｎｇ ｏｆ ｂｕｒｎ ｗｏｕｎｄｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｃｏｒｄ ｂｌｏｏｄ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｗｅｒｅ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ，ｃｕｌｔｕｒｅｄ ａｎｄ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ Ａｄ—ＨＧＦ．２４ Ｗｉｓｔａｒ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ ｔｏ ｂｏｉｌｉｎｇ ｗａｔｅｒ ｆｏｒ １２ ｓｅｃｏｎｄｓ ｔｏ ｐｒｏｄｕｃｅ ａ ｐａｒｔｉａｌ ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ ｓｋｉｎ ｂｕｒｎ．Ｔｈｅ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ３ ｇｒｏｕｐｓ：ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｃｏｒｄ ｂｌｏｏｄ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ（ｇｒｏｕｐ Ａ），ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｄ—ＨＧＦ ｍｏｄｉｉｆｅｄ ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｃｏｒｄ ｂｌｏｏｄ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ（ｇｒｏｕｐ Ｂ），ａｎｄ ｓａｌｉｎｅ ｃｏｎｔｒｏｌ（ｇｒｏｕｐ Ｃ）．Ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｒｏｕｐｓ，ｇｔｈｅ ｓｕｓｐｅｎ— ｓｉｏｎ ｏｆ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ，ａｎｄ ｓａｌｉｎｅ ｗｅｒｅ ｉｎｊｅｃｔｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｄｅｒｍａ ｏｆ ｂｕｒｎ ｗｏｕｎｄｓ．Ｔｈｅ ｃｏｎｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｂｕｒｎ ｗｏｕｎｄｓ ｗａｓ ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ａｎｄ ｈｉｓｔｏ－ ｌｏｇｉｃａｌ ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ａｔ ３，５，７，１４ ａｎｄ ２１ ｄａｙｓ ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ｉｎｊｕｒｙ．Ａｔ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｔｉｍｅ，ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｌｉｎｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｗｏｕｎｄ ｔｉｓｓｕｅ ｗａｓ ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ，ｓｅｃｏｎｄ ａｎｄ ｔｈｉｒｄ ｗｅｅｋ ａｆｔｅｒ ｂｕｒｎ，ｔｈｅ ｃｏｎｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｂｕｒｎ ｗｏｕｎｄｓ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｂ ｗａｓ ｍｕｃｈ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ａ ａｎｄ Ｃ（Ｐ＜０．０５）．Ｈｉｓｔｏｌｇｉｃａｌ ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈｅ ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ ｏｆ ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｂ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｄｅｅｐｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒ ｇｒｏｕｐｓ，ａｎｄ ｍａｎｙ ｓｍａｌｌ ｖｅｓｓｅｌｓ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｄｅｒｍａ ｏｆ ｂｕｒｎ ｗｏｕｎｄｓ．Ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｌｉｎｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆ ｗｏｕｎｄ ｔｉｓ－ ｓｕｅｓ ｉｎ ｇｒｏｕｐ Ｂ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｏｔｈｅｒｓ ａｆｔｅｒ ５ ｄａｙｓ，ａｎｄ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｍａｒｋｅｄｌｙ ａｔ ｔｈｅ １４ｔｈ ｄａｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｍｏｄｉｉｃａｔｉｆｏｎ ｏｆ ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｃｏｒｄ ｂｌｏｏｄ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｗｉｔｈ Ａｄ—ＨＧＦ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ ｈａｓ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｔｈｅ ｈｅａｌｉｎｇ ｏｆ ｂｕｒｎ ｗｏｕｎｄｓ，ｗｈｉｃｈ ｍａｙ ｐｒｏｖｉｄｅ ａ ｎｅｗ ｗａｙ ｔｏ ｂｕｒｎ ｗｏｕｎｄ ｒｅｐａｉｒ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］ Ｂｕｒｎ ｗｏｕｎｄ；Ａｄ—ＨＧＦ；Ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｃｏｒｄ ｂｌｏｏｄ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ；Ｈｅａｌｉｎｇ 烧伤创面的修复常采用自体皮肤移植，但大面 积烧伤患者常存在自体皮肤不足。近十余年来，组 织工程学的发展为大面积皮肤缺损修复开辟了新途 径。脐血干细胞是一类与骨髓干细胞相同的具有多 向分化潜能的原始祖细胞，有特殊的生物学特性，表 广泛，被认为是替代自体外周血干细胞移植的理想 来源…。肝细胞生长因子（ＨＧＦ）是一种有效促进血 管生长因子，已被应用于促进放射性损伤皮肤愈合 的实验性研究，并得出了肯定的结论 ｊ。本研究利 用组织工程的原理将构建的携带肝细胞生长因子的 重组腺病毒（Ａｄ—ＨＧＦ）转染人脐血干细胞，应用于 烧伤创面，观察对创面愈合方面的效果。 １材料与动物 面抗原性弱，不易被排斥，能在体内长期存活，来源 ［作者单位］宁夏人民医院，宁夏银川７５００２１ ［作者简介］金丽娟（１９８０一），女，主治医师，硕士研究生，从事超声 修复方向。 ［网络出版地址］ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｊｌ／６４．１００８．Ｒ． ２０１３ｌ１１２．１２３１．０ｏ８．ｈｔｍｌ １．１ 实验动物：３月龄Ｗｉｓｔａｒ雌性大鼠，体重（１８０ｇ ±４０ｇ），由甘肃省中医学院提供，动物合格证号： ＳＣＸＫ（甘）２００４—０００６。 宁夏医学杂志２０１３年ｌ１月第３５卷第ｌｌ期Ｎｉｎ￣ｉａ Ｍｅｄ Ｊ，Ｎｏｖ．２０１３，Ｖｏｌ ３５，Ｎｏ．１】 １．２ 实验材料：Ａｄ—ＨＧＦ病毒（兰州军区实验中心 梭形。 ２．２ 烫伤创面愈合情况观察：伤后７、１４、２１ ｄ，Ｂ 惠赠），小牛血清（美国ＧＩＢＣＯ公司），胰蛋白酶（美 国ＳＩＧＭＡ公司）。 组创口收缩率明显较其他２组高，差异有统计学意 义（Ｐ＜０．０５），见表１。 表１ 烫伤后不同时间各组大鼠创面愈合率的比较（ ±ｓ） １．３ 实验方法：①脐带血干细胞体外培养，用脐静 脉穿刺法抽取健康足月产妇约５０ ｍＬ脐血，采用密 度梯度离心法分离，用含１０％血清的ＤＭＥＭ—ＬＧ分 瓶培养。本实验使用细胞为传代培养的３～５代细 胞。＠ａａ—ＨＧＦ修饰脐带血干细胞，将生长旺盛的 脐血干细胞以１×１０ 个・孔。。接种于６孔板，２４ ｈ 后弃去培养上清，加入含Ａｄ—ＨＧＦ病毒颗粒的 ＤＭＥＭ—ＬＧ培养基（（ＭＯＩ＝１００，ｐｆｕ／ｃｅｌ１）孵育２ ｈ， 换含５％血清的培养基继续培养４８ ｈ。③动物模型 制作及分组，Ｗｉｓｔａｒ雌性大鼠（１８０±４０）ｇ ２４只，经 腹腔注射戊巴比妥钠（３０ ｍｇ・ｋｇ ）麻醉后备皮， 背部以Ｎａ，Ｓ脱毛，大块橡胶剪一２ ｅｍ×２ ｅｌＴｌ大小 小洞，覆盖于大鼠背部脱毛处，放人９０℃热水中５ ｓ，造成大鼠背部深Ⅱ度烫伤模型，病理切片证实。 将造模成功的大鼠分为３组：脐血干细胞治疗组（Ａ 组），Ａｄ—ＨＧＦ修饰的脐血干细胞治疗组（Ｂ组）， 生理盐水对照组（ｃ组），每组８只。④细胞移植，将 生长旺盛的单纯脐血干细胞悬液（０．５ ｍＬ，３ ｘ １０。细 胞）、Ａｄ—ＨＧＦ修饰的脐血干细胞（０．５ ｍＬ，３ Ｘ １０。 细胞）悬液以及生理盐水（０．５ ｍＬ），于造模同时按 组别注射于创面真皮下，覆盖凡士林油纱，采用打包 法缝合固定后单笼饲养。⑤组织学检查，分别于伤 后第３、５、７、１４、２１ ｄ在无菌条件下用手术刀在烫伤 创面取材，标本常规石蜡包埋制片，ＨＥ染色，光镜下 观察。⑥细胞移植后皮肤创面的观察每组８只大 鼠，每天观察创面愈合情况，以完全上皮覆盖作为创 面愈合时间的依据。每组于伤后７、１０、１４ ｄ采用透 明胶片描记加称重法测定局部创面面积，按下列公 式计算：创面愈合率＝（原始创面面积一未愈合创 面面积）／原始创面面积×１００％。⑦皮肤组织中 羟脯氨酸（ＨＹＰ）的测量，烫伤创面取材的标本一 ７０￣Ｃ保存，按照ＨＹＰ试剂盒（上海继锦化学科技有 限公司）说明书步骤，测定所取的第３、５、７、１４、２１ ｄ 皮肤组织中ＨＹＰ的含量。 １．４统计学方法：计量资料以 ±ｓ表示，采用方差 分析及两两比较ｑ检验，以Ｐ＜０．０５为差异有统计 学意义。 ２结果 ２．１脐血干细胞的分离培养与扩增：原代细胞经过 ２４ ｈ体外培养后有少量细胞贴壁，在４ ｄ内呈相对静 止状态，之后细胞生长；速度加快，并呈克隆样生长； １２ ｄ左右达到细胞融合，细胞形态成比较均一的 注： 与Ａ组比较，Ｐ＜０．０５； 与Ｃ组比较，Ｐ＜０．０５。 ２．３各组烫伤愈合的组织学观察：肉眼观察烫伤后 ７ ｄ，３组动物所有创面均形成痂皮，未见溃破。伤后 １２ ｄ创缘有新生表皮生成，２１ ｄ部分创面愈合。ＨＥ 染色光镜显示，３、５ ｄ各组无明显差异；７ ｄ可见Ｂ组 表皮化明显，２１ ｄ Ｂ组再生表皮明显厚于其它各组， 并可见较多的皮肤附属器及新生血管生成（图１— ２，目录后）。 ２．４ 烫伤创面皮肤组织羟脯氨酸含量测定：见表２。 烫伤后３ ｄ Ｂ组羟脯氨酸含量高于其它组，但差异无 统计学意义；伤后５、７ ｄ羟脯氨酸继续高于其它２组 （Ｐ＜０．０５），１４ ｄ后Ｂ组羟脯氨酸含量低于其它２ 组（Ｐ＜０．０５）。 表２各组大鼠烧伤创面羟脯氨酸含量比较（ ｇ・ｍｇ～，元±ｓ） Ａ组８ １．６±Ｏ．３ ２．５±０．７ １．９±０．７ １．６±０．６ Ｂ组８ １．８±０．５ ２．９±Ｏ．４ １．８±Ｏ．７ １．２±０．６ Ｃ组８ １．５±０．６ ２．１±Ｏ．７ ２．０±Ｏ．５ １．７±Ｏ．６ Ｆ值 ３．８３ ３．７２ ３．５１ ３．４３ 笪 ： ： ：堕 ！ ：堕 ３讨论 创面修复是机体通过自身的再生能力，其本质 是以干细胞为主，包括内皮细胞、角质细胞等修复细 胞在创面不断生长、扩增，从而完成对创面的修 复 Ｊ。如何有效地对创面进行修复是目前创面临床 治疗的难点。近年来，随着对脐血干细胞研究的深 入，国内外学者认为，通过脐血干细胞移植修复创 面，可以较好地解决皮源供给以及皮肤结构、功能重 建等问题。需要探索新的途径以提细胞治疗的 效果。ＨＧＦ是一种多功能生长因子，可以促进血管 生成和抑制细胞凋亡。以往作者的研究已证实单纯 应用细胞因子流失大，且大面积创伤后创面周围存 活细胞少，为细胞因子的单独应用也带来困难 。 因此，本实验将两者联合应用，采用携带ＨＧＦ基因 的重组腺病毒转染脐血干细胞，使脐血干细胞表达 ＨＧＦ蛋白而发挥ＨＧＦ与脐血干细胞的双重作用，用 于促进对大鼠皮肤烫伤的研究。 宁夏医学杂志２０１３年ｌ１月第３５卷第ｌｌ期Ｎｉｎｇｘｉａ Ｍｅｄ Ｊ，Ｎｏｖ．２０１３，Ｖｏｌ ３５，Ｎｏ．１１ ・１０３５・ 文章编号：１００１—５９４９（２０１３）１１—１０３５—０３ ・论 著・ 持续输注瑞芬太尼抑制鼻内镜手术后 气管拔管反应的临床观察 曹池 ，张永海 ，马玲 ，马汉祥 将６６例ＡＳＭ—ＩＩ级 ・（ ［摘要］ 目的 观察持续输注瑞芬太尼抑制鼻内镜手术后拔管期间应激反应的效果。方法择期行鼻内镜鼻中隔矫正手术患者分为３组：瑞芬太尼０．０７５ ・（ｋｇ・ｍｉｎ） （Ｒ１组，ｎ＝２２）、瑞芬太尼０．０５ ・ｍｉｎ） （Ｒ２组，ｎ＝２２）与空白对照组（Ｃ组，ｎ＝２２）。手术结束时，Ｒ１组和Ｒ２组停用丙泊酚，Ｒ１组继续输注瑞芬太尼 ０．０５ ・（ｋｇ・ｍｉｎ）～，Ｒ２组继续输注瑞芬太尼０．７５０ Ｉｓｇ・（ｋｇ・ｍｉｎ） 至拔出气管插管后５ ｍｉｎ，Ｃ组手术结束时同时 停用丙泊酚和瑞芬太尼。观察３组停药前（ＴＯ）、拔管前（Ｔ１）、拔管后１ ｍｉｎ（Ｔ２）、３ ｍｉｎ（Ｔ３）、５ ｍｉｎ（Ｔ４）时刻的血压和心率 变化，同时观察３组患者苏醒时间的变化。结果２组患者的性别、年龄、体重、拔管前ＳＢＰ、ＤＢＰ、ＨＲ差异无统计学意义 （Ｐ＞０．０５）。２组患者的睁眼时间、拔管时间差异无统计学意义（Ｐ＞０．５）。空白组苏醒时间明显短于瑞芬太尼组，０３组 患者苏醒时间Ｒ１组（９．８±２．６）ｍｉｎ，Ｒ２组（８．９±２．３）ｍｉｎ，Ｃ组（６．７±１．８）ｍｉｎ，空白组苏醒时间明显短于瑞芬太尼组 （Ｐ＜Ｏ．５）。结论０术后以０．０５一Ｏ．７５ ・（ｋｓ・ｍｉｎ） 速度持续静脉输注瑞芬太尼可减轻患者围拔管期心血管反应， 患者可清醒耐受气管插管通气，是一种安全、有效、可控的麻醉方法。 ［关键词］ 瑞芬太尼；气管拔管；鼻中隔手术；内镜手术；应激反应 ［中图分类号］Ｒ６１４．２ ［文献标识码］Ａ Ｔｈｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｒａｃｈｅａｌ ｅｘｔｕｂａｔｉｏｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｏｆ ｒｅｍｉｆｅｎｔａｎｉｌ ｉｎｆｕｓｉｏｎ ｉｎ ｎａｓａｌ ｅｎｄｏｓｃｏｐｉｃ ｓｕｒｇｅｒｙ ＣＡＯ Ｃｈｉ ，ＺＨＡＮＧ Ｙｏｎｇｈａｉ ，ＭＡ Ｌｉｎｇ ，ＭＡ Ｈａｎｘｉａｎｇ ．１．Ｇｅｎｅｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆＮｉｎｇｘｉａ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙｉｎｃｈｕａｎ ７５０００４，Ｃｈｉ— ｈａ；２．Ｎｉｎｇｘｉａ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙｉｎｃｈｕａｎ ７５０００４，Ｃｈｉｎａ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：ＭＡ Ｈａｎｘｉａｎｇ，Ｅｍａｉｌ：ｍａｈａｎｘｉａｎｇ＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｒａｃｈｅａｌ ｅｘｔｕｂａｔｉｏｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｏｆ ｒｅｍｉｆｅｎｔａｎｉｌ ｉｎｆｕｓｉｏｎ ｉｎ ｎａｓａｌ ｅｎｄｏｓｃｏｐｉｃ ｏｐｅｒａｔｉｏｎ． 胶原是构成烧伤创面的基质，其代谢状况可反映 创面愈合隋况，而羟脯氨酸是合成胶原的特有原料，在 组明显的上皮化以及修复后良好的表皮质量，均提示了 转染ＨＧＦ后的脐血干细胞在促进创面愈合上的优势。 胶原中的含量恒定 ，测定其含量可反映组织愈合过程 中胶原代谢水平，从而反映创面愈合情况。实验中显 示，伤后３ ｄ Ｂ组羟脯氨酸含量高于其它组，但差异无 统计学意义，５ ｄ后差异有统计学意义。早期的羟脯氨 酸升高，体现了对创面较好填充作用，１４ ｄ后各组羟脯 氨酸含量均较前降低。已有文献报道 ，羟脯氨酸含量 的变化趋势与创面组织的上皮化程度表现出明显的相 关陛，随着表皮细胞覆盖创面的发展，羟脯氨酸逐渐减 少，提示创面上皮化的过程正是胶原合成抑制的过程。 Ｂ组羟脯氨酸含量降低的最显著，从而得出推断，Ａｄ— ＨＧＦ修饰的脐血干细胞与其它组相比，加速创面上皮 创口收缩率结果也同样肯定了ＨＧＦ修饰的脐血干细胞 提高创面愈合速度和质量的效应。对上述实验结果分 析，显而易见，经ＨＧＦ转染后的脐血干细胞对创面愈合 有一定的促进作用，而且其作用明显优于单独使用脐血 干细胞，这种促进作用可能是双方协同作用的结果。 ［参考文献］ ［１］王杨，张翼，王锦之，等．脐血干细胞移植治疗压疮性溃疡创面 ［Ｊ］．吉林医学，２０１２，１２（３３）：７４２１—７４２３． ［２］ 哈小琴，张俊，邓芝云，等．肝细胞生长因子基因重组腺病毒修 饰间充质干细胞修复急性放射性损伤大鼠的创面［Ｊ］．中国组 织工程研究，２０１２，１６（４９）：９２２６—９２３１． 化进程更为显著，这与本实验中组织学观察得出的结果 相一致。组织学ＨＥ染色显示，在治疗后７ ｄ Ｂ组出现 ［３］ 罗瞳，李利平．脐血干细胞与创面愈合［Ｊ］．现代生物医学进展， ２０１１，１ｌ（Ｏ５）：９８６—９８８． 的上皮化程度要明显优于其他各组，２１ ｄ再生皮肤表皮 层明显增厚，并可见较多的新生血管和附属器生成。Ｂ ［基金项目］宁夏医科大学校级课题（ＸＱ２０１２００６） ［作者单位］１．宁夏医科大学总医院麻醉科，宁夏银川７５０００４ ２．宁夏医科大学，宁夏银川７５０００４ ［通讯作者］马汉祥，Ｅｍａｉｌ：ｍａｈａｎｘｉａｎｇ＠ｈｏｔｍｍ１．ｃｏｒｎ ［网络出版地址］ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉＬ／６４．１００８．Ｒ ２０ｌ３ｌ１１２．１２３０．００３．ｈｔｍｌ ［４］金丽娟，哈小琴，张诚，等．Ａｄ—ＨＧＦ修饰ＭＳＣｓ异体移植对烧 伤创面愈合的作用［Ｊ］．西北国防医学杂志，２００７，２８（１）：１２． ［５］Ｄｉｍｉｃｃｏ ＭＡ，Ｗａｔｅｒｓ ＳＮ，Ａｋｅｓｏｎ ＷＨ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｔｅｇｒａｔｉｖｅ ａｒｔｉｃｕｌａｒ ｃａｒｔｉｌａｇｅ ｒｅｐａｉｒ：ｄｅｐｅｎｄｅｎｃｅ ｏｎ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ ｓｔａｇｅ ａｎｄ ｃｏｌｌａｇｅｎ ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ［Ｊ］．Ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｃａｒｔｉｌｇｅ，ａ２００２，１０：２１８． ［６］Ｓａｎｗａｌ Ｒ，Ｃｈａｕｄｈａｒｙ ＡＫ．Ｗｏｕｎｄ ｈｅａｌｉｎｇ ａｎｄ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｐｏｔｅｎ・ ｔｉａｌ ｏｆ ｃａｒｉｓｓａ ｓｐｉｎａｒｕｍ ｌｉｎｎ．ｉｎ ａｌｂｉｎｏ ｍｉｃｅ［Ｊ］．Ｊ Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ， ２０１１，１３５（３）：７９２—７９６． ［收稿日期］２０１３—０５—２０ ［责任编辑］李洁
