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青梅果酒酵母的筛选与发酵工艺优化

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酿酒科技2016年第2期(总第260期)·LIQUOR—MAKING SCIENCE&TECHNOLOGY 2016 No.2(To1.260) 65 DOI:10.137460.njkj.2015433 青梅果酒酵母的筛选与发酵工艺优化 李艳,萧永坚,罗格罗 (广东顺德酒厂有限公司,广东佛山528300) 摘要: 选取11株耐受性较好的果酒酵母对青梅果酒进行发酵试验,以酒精度、总酸和感官指标为考察参数,筛 选出1株发酵能力强,所酿造果酒品质好的为最优菌株。通过研究果实成熟度、酵母添加量、主发酵温度对青梅果 酒品质的影响,确定青梅果酒的最佳酿造工艺参数。优化后的青梅果酒发酵工艺条件为:青梅果实成熟度为8~9 成;酵母接种量为0.3 g/L;主发酵温度为20℃。在此条件下进行3.5t发酵罐的生产试验,发酵过程稳定,所得的青 梅果酒酒精度为13.9%vol+O.3%vol,残糖量为O.97 g门L士0.21 gm,总酸含量为37.42 g/L ̄1.48 g/L,干浸出物含量为 51.36 g/Lil.24 g/L。 关键词:青梅酒;菌株筛选;工艺优化;发酵 中图分类号:TS262.7;TS261.1;TS261.4 文献标识码:A 文章编号:1001—9286(2O16)o2—0065—04 Screening of Yeast Strains for Plum Wine and Optimization of Its Fermentation Process LIYan.XIAOVongiianandLUOGeluo 、(Guangdong Shunde Distillery Co.Ltd.,Foshan,Guangdong 528300,China) Abstract:In this study,1 l yeast strains with good tolerance were used for hte fermentation test ofplum wine.Alcohol content.total acids con- tent and sensory indexes were used as the evaluating indexes to screen out the best yeast strain ofr plmu wine production.Besides,the effects of fruit ripen degree,yeast adding level,and chief fermenting temperature on hte quality of plmu wine were investigated,and the optimum techni- cal parameters were optimized sa follows:the ripen degree ofplum was 80%~90%,yeast adding level was 0.3 g/L,and chief fermenting tem— perature was at 20℃.Then production test was carried out in 3.5 t fermenting tank under above conditions.the whole fermentation process was stable,and alcohol content,residual sugar content,total acids content,and dry extract content ofthe produced plum wine were 13.9%vol ̄ 0-3%vol,0.97 g/L ̄0.21g/L,37.42 g/1.&1.48 g/L and 51.36 g/1.A:1.24 g/L,respectively. Key words:plmu wine;yeast strain screening;process optimization;fermentation 青梅文化在我国历史悠远,我国自古就有“青梅煮 筛选出适合酿造青梅果酒的优良酵母菌株,丰富了青梅 酒”之说 。青梅果实含有多种营养成分,其中鲜果肉 果酒专用酵母的菌种资源,并进一步优化了所筛选菌株 中维生素B 含量为其他水果的数百倍p 】。以青梅为原料 的发酵工艺参数,为青梅发酵果酒的工业化生产提供技 发酵而成的青梅酒具有酸甜爽口、营养丰富等特点,深受 术参考。 日本消费者青睐,在我国南方一带以及东南亚等地也相当 畅销【6】。 1材料与方法 在果酒酿造的过程中,酵母起着非常重要的作用,直 1.1材料与试剂 接影响到所酿果酒品质的优劣川。因此筛选适于青梅果 试验材料:新鲜青梅,产自福建诏安。 酒发酵的酵母菌株是保证果酒品质的关键步骤。由于青 酵母:活性干酵母BV818、RV171、VIC、RV100、SY 悔具有高酸低糖的特点,果汁pH值低于2.5,市售大部分 由安琪酵母股份有限公司提供;活性干酵母DV10、 酵母因无法适应如此高的酸度环境而不能发酵,因此青 QA23、EC1118、K1、KD由上海杰兔工贸有限公司提供; 晦果酒专用酵母的研究及与之相适应的工艺条件亟待加 酵母QMIOl,为本厂从青梅果中筛选并保藏的优良果酒 强[61。本研究从收集到的11株耐受性较强的果酒酵母中 酵母。 收稿日期:2015一ll一13 作者简介:李艳(1987-),女,硕士,从事酒类微生物及果酒发酵研究工作,E—mail:L5O12o2335@126.corn。 通讯作者:罗格罗(1965一),男,食品工程师,国家一级酿酒师,E-maihlogelo@sina.com。 优先数字出版时间:2O15—12—22;地址:http:/^^n^ cnl【i.neVkcms/detail/52.1051.TS.20151222.0941.002.hmal。 66 酿酒科技2016年第2期(总第260期)·LIQUOR—MAKING SCIENCE&TECHNOLOGY 2016 No.2(To1.260) 蔗糖:广东省化州市笪桥糖业有限公司。 焦亚硫酸钠:湖南岳阳三湘化工有限公司。 1-3.4.2酵母接种量的确定 根据上述试验确定的酵母和果实成熟度发酵青梅 PDA培养基、麦芽汁培养基购于广东环凯生物有限 酒,活性干酵母接种量分别设定为0.1 g/L、0.2 g/L、0.3 g/L、 公司;酒石酸钾钠、氢氧化钠、硫酸铜、葡萄糖、硫酸、盐酸 0.4 g/L、0.5 g/L,其他发酵条件同1.3.3。每天定时测定发 等,所用试剂均为分析纯,购于天津永大化学试剂厂。 酵液的酒精含量,14 d后进行感官品评,根据试验数据确 1.2仪器设备 定较适宜的接种量。 SPX一150B—Z恒温生化培养箱(上海博玉实业有限 公司),SHA一2恒温水浴振荡器(上海浦东物理光学仪器 1.3.4.3主发酵温度的确定 根据上述试验确定的酵母、果实成熟度和接种量发 厂),LDZX一75KBS高压灭菌锅(上海申恩医疗器械厂), 酵青梅酒,分别将发酵液置于16℃、20℃、24℃、28℃ PHS一25酸度计(上海雷磁仪器厂),SW-CJ一2D超净工作 下进行发酵,其他发酵条件同1.3.3所述。每天定时对发 台(苏净净化设备有限公司),722分光光度计(上海精密 科学仪器有限公司),WYT手持折光计(成都光学厂)。 1.3试验方法 1-3.1酵母的活化与扩大培养 活性干酵母的活化:按照活性干酵母:水为1:20的 比例将活性干酵母溶于无菌水中,38℃恒温水浴活化 30min。 为使酵母添加量一致,将活性干酵母和斜面保藏酵 母进行活化和扩大培养,并将其制备成菌液浓度相同 (1×10 个/mL)的培养液。 1.3.2酵母菌一级筛选 酵母菌经活化扩大培养后,以5%的接种量接种到 装有糖度为12。Bx青梅汁的试管中,然后放入杜氏管, 置入杜氏管时确保杜氏管内无气泡。静置于培养箱中 25℃培养,48 h内观察产气情况,记录杜氏管内的气泡 产生量,以气泡产生较多的作为复筛菌株【 。 1.3.3二级筛选 取相同成熟度的青梅果置于发酵玻璃罐中,初次加 蔗糖lO%腌渍果实,按80 mg/L SO:的添加量加入焦亚 硫酸钠,pH值自然,腌渍3 d。分别以上述试验筛选的菌 株作为发酵菌株,酵母液的接种量为5%,于25℃条件 下发酵。加入酵母第2天添加剩余蔗糖(蔗糖添加总量 按青梅发酵果醪总糖的25%添加)a主发酵14 d,发酵 过程中每天取样1次,检测酒精度和总酸含量。主发酵 结束后倒罐密封,16 ̄20℃下进行后发酵,30 d后测定 酒精度、总糖、总酸,并结合感官品评结果,综合确定出适 合酿造青梅果酒的菌株。 1.3.4发酵工艺优化 1.3.4.1 果实成熟度对果酒品质的影响 挑选表皮绿色,质地脆硬,6~7成熟青梅作为试验 样本l;挑选表皮金黄,质地较软,口感无涩味,8~9成熟 的青梅作为试验样本2。选择由上述试验确定的酵母进 行青梅酒发酵,接种量为O_3 g/L,温度25℃,发酵14 d, 比较2种成熟度的果实酿造青梅酒的理化指标和感官评 价,最终确定适合酿造青梅酒的最佳果实成熟度。 酵液的酒精含量进行测定,14 d后进行理化分析,结合感 官品评确定较适宜的发酵温度。 1.3.4.4扩大生产试验 根据以上所确定的试验条件,进行扩大生产试验,选 用3.5 t罐,每罐加2 t青梅,按1.3.3所述青梅酒发酵生产 工艺进行,对产品的理化指标和感官指标进行测定,做3 个平行试验。 1_3.5感官评分标准 请15名评酒人员对青梅发酵原酒进行感官评定(评 酒人员包括国家一级品酒师5名,国家二级品酒师7名, 国家三级品酒师3名),评分标准见表1t ]。 表1青梅果酒的感官评分标准 霉亲 感官特征 1.3.6指标测定 酒精度的测定:采用密度瓶法n”。 总糖的测定:采用直接滴定法…】。 总酸的测定:采用直接滴定、法【 ]。 干浸出物的测定:采用密度瓶法[11】。 2结果与分析 2.1青梅酒酵母的筛选结果 2.1.1酵母菌一级筛选结果 李艳,萧永坚,罗格罗·青梅果酒酵母的筛选与发酵工艺优化 ll株酵母杜氏管发酵24 h、48 h,结果见表2。由表2 用,更适合青梅这类高酸水果的发酵生产。 可知,各酵母菌的发酵力有所差异,其中BV818、QM101、 KD、QA23在青梅汁中24 h内产气量超过杜氏管一半, 48 h内这4株酵母产气量充满或几乎充满杜氏管,表明 这4株酵母耐酸性好,适应性较强,起酵快,糖转化率高, 因此选择这4株酵母做进一步筛选。 表2 11株酵母杜氏发酵管发酵结果 注:“一”表示不产气;“+”表示产气量很少;“+”的多少表示产气 强度;“++++”表示气泡充满管 2.1.2酵母菌二级筛选结果 (1/暑一喇如 躜 发酵过程中,4株酵母的青梅发酵液中酒精含量随 发酵时间变化见图l。随着发酵的进行,酒精含量逐渐 增高,BV818和QM101启动发酵迅速,发酵第3天平均 酒精度达到8%vol,其他2株酵母起酵相对缓慢。随着 发酵的进行,酒精含量逐渐增高,发酵进行到第l4天, BV818和KD酒精含量最高,均超过13%vol,而其他2株 菌相对较低。结果表明,菌株BV818适应力较强,耐酸 性和耐酒精性能好,发酵能力相对较强。 专M 12 10 鬻s 6 4 2 O 发酵时间(d) 图1 菌株产酒精速率的比较 发酵过程中,4株酵母的青梅发酵液中总酸含量变 化见图2。随着发酵的进行,BV818、QM101和QA23青 梅果醪中总酸含量均呈下降趋势,而KD的发酵液中总 酸含量呈先上升后下降趋势,可能是KD在发酵初始阶 段有酸类物质生成。发酵到第14天,BV818和QM101 发酵液中总酸含量较低,其中,BV818总酸含量最低,为 47.77 g/L(以酒石酸计),表明BV818具有较强的降酸作 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 101l 12l314 发酵时间(d) 图2 茵株发酵液总酸含量变化的比较 上述试验所得的青梅酒经后发酵30 d,理化检测结 果和感官品评结果见表3。理化指标数据表明,不同酵 母对发酵酒中主要成分含量的影响有所差异,BV818和 KD所发酵的青梅酒酒精度较高,残糖量少,发酵彻底, 而QA23和QM101酒精度相对较低,残糖量较高,耐酒 精性能相对较差;在降酸作用上,BV818发酵液中总酸含 量最少,优于其他3株酵母。感官品评结果表明,BV818 和QM101所发酵的青梅酒色泽金黄,果香浓郁、优雅,爽 口,口感协调,风味独特,而KD和QA23所产青梅酒果香 不突出,涩味较重,口感不协调。综合发酵能力和感官品 评得分结果,BV818更适合作为青梅果酒的酿造菌株,以 该菌株作为酿造青梅酒的发酵菌株,做进一步的优化 试验。 表3 4株酵母菌发酵青梅果酒理化和 感官指标测定结果 2.2发酵工艺优化 2.2.1 果实成熟度对青梅酒品质的影响 表4不同成熟度果实所酿青梅酒理化指标和感官评价结果 用不同成熟度的青梅果发酵而成的青梅酒理化指标 检测结果和感官评分结果见表4。从理化检测结果上 看,用8~9成熟青梅所酿制的青梅酒酒精度高,发酵彻 底,总酸含量低,均优于6~7成熟青梅;通过感官品评得 出,用8~9成熟青梅酿制的青梅酒口感更加柔和圆润, 香气舒适协调,而6~7成熟青梅所酿制的青梅酒果香较 浓郁,但酸涩味较重。综合理化指标和感官评分结果得 68 酿酒科技2016年第2期(总第260期)·LIQUOR—MAKING SCIENCE&TECHNOLOGY 2016 No.2(To1.260) 表5青梅果酒理化指标和感官评价结果 出,选择8~9成熟的青梅作为酿酒原料较适宜。 2.2.2酵母接种量的确定 在酿酒过程中,酵母接种量会影响发酵进程及酒的 咖扣 冥 船 删如檠 6 4 2 0 8 6 4 2 O 口感。由图3可知,随着酵母接种量的增大,酒精度先稍 有上升而后迅速下降,当酵母接种量为0-3 g/L时,酒精 度最高,为13.6%vol,此时残糖也最低。酵母接种量在 6 4 2 O 8 6 4 2 0 起酵快的 O-3 L时所得青梅酒口感舒适协调,过高的酵母接种量 管初筛试验筛选出4株耐酸性好、适应性较强、会影响酒的口感,给果酒带来异杂味 。综合考虑确定 酵母。以酒精度、总酸和感官指标为考量参数,进一步筛 选出1株发酵能力强,所得青梅发酵酒果香和酒香协调, 酵母接种量为0-3 g/L。 酸味柔和,酒体丰满的最优菌株BV8l8。本研究在筛选 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 酵母接种量(g/L) 图3不同接种量下发酵过程中酒精度和残糖含量的变化 2.2.3发酵温度的确定 图4表明,随着温度的升高,青梅发酵酒的酒精度呈 现先升高后降低的趋势,残糖先降低后升高,温度在 20 ̄24℃时,酒精含量最高,残糖量最低;20℃时青梅发 酵液果香最为浓郁,果香味突出,口感最为协调,因此确 定发酵温度为20℃。 l6 2O 24 28 30 温度(℃) 图4 不同温度下发酵过程中酒精度和残糖含量的变化 2-3扩大生产试验结果 用3.5 t发酵罐进行青梅酒的扩大生产试验,青梅酒 的理化指标检测结果和感官品评结果见表5。从表5可 以看出,利用所筛选的酵母BV818对青梅进行整果发 酵,发酵过程均较稳定,得到的青梅果酒理化指标和感官 指标均符合标准。 3结论与讨论 本研究选取l1株耐受性较好的果酒酵母,经过杜氏 青梅酵母时未对青梅发酵液进行人工降酸处理,这与张 超等u 和叶倩文 的筛选方法有所不同,由于本研究中发 酵初始阶段酸度较高,因此所筛得的青梅果酒酵母可能 具有更强的耐酸性和降酸能力。 通过研究果实成熟度、酵母添加量和主发酵温度对 青梅果酒品质的影响,确定了青梅果酒的最佳工艺条件 为:青梅果实成熟度为8~9成熟;酵母接种量为0.3 g/L, 主发酵温度为20℃。与相关报道比较,本研究优化后的 主发酵温度和接种量与叶倩文等【 、黄星源等n 和李婀娜 等n 的研究结果有所不同,首先可能是因为所用酵母菌 株不同,其次在优化发酵工艺条件时,本研究采用青梅整 果先腌渍、再发酵的方式进行,而叶倩文等【 、黄星源等u 】 和李婀娜等n叼采用先破碎榨汁、再发酵的方式进行,果实 前处理方式不同,也可能会造成优化结果的差异。 应用菌株BV818在优化的条件下进行3.5 t发酵罐 的生产试验,发酵过程稳定,所得的青梅果酒酒精度为 13.9%vol ̄0.3%vol,残糖量为0.97 g/L ̄0.21 g/L,总酸含 量为37.42 g/L+1.48 g/L,干浸出物含量为5 1.36 g/Lil.24 g/L,且酒体丰满,果香浓郁,香气协调,梅香突出。 本研究对应用活性干酵母BV818发酵青梅果酒的 工艺条件进行了初步优化,在后续试验中将会对其工艺 条件做进一步研究,以期提高青梅酒质量。由我厂分离 保藏的酵母菌株QM101为野生酵母,在发酵试验中发酵 能力略低于BV818,所得青梅酒品质较优良。具有较好 的青梅果酒酿造潜力,将来可以以此菌株为出发菌株进 行诱变育种,以期获得更适合青梅果酒酿造的优质酵母。 参考文献: [1】 林雁.论“青梅煮酒”[J】.北京林业大学学报,2007,29(增1); 110一l15. [2] 胥洪泉.“青梅煮酒”考释[J].西南师范大学学报:人文社会科 学版,2001,27(2):118. [3 3]康毅,曾凡骏,邹华雄.果梅的研究I.果梅营养成分的测定和研 究[J].天然产物研究与开发,1994,6(4):62-66. f4】 肖更生,陈卫东,李升锋,等.青梅的研究进展[J].食品工业科技, 2005,26(9):185—187. [5 5】李升锋,刘学铭,吴继军,等.青梅资源开发利用[J】.广州食品工 (下转第71页) 李净,栗岩·枝江柔雅白酒风格浅析 7l 表4枝江原酒催陈前后微量成分变化 4结论 枝江柔雅风格白酒是枝江酒业不断利用现代科学技 术改造传统产业,对生产工艺不断创新的结果。其创新 工艺可以总结为:①三曲并用,复合增香;②高温堆积,大 小香醅共蒸,奠定柔雅酒体基础;③深层地下水降度、净 化吸附、加热催陈,提升柔雅酒体品质;④科学勾调,完善 酒体,画龙点睛。 枝江酒业新开发的独具一格的柔雅风格白酒,以柔 和为前提,以微甜为基础,以绵净为标准,口感上从推崇 专家口味转移到适应消费者口味需求,提高了市场竞争 力,引领了中国白酒产业发展的新潮流,实现了枝江酒业 产品风格历史性、跨越性的转型。 表5枝江原酒催陈前后感官比较 样品 感官评语 酒 无色透明,糟香明显,入口较粗糙,尾略 加热催陈处理l5 d ’有陈香,入口较绵 参考文献: [1】李净,张明.多粮小曲白酒工艺技术的初步研究[J].酿酒科技, 2006(8):56—58. 陶坛自然储存一年 黼蛆 [] [2]李净,胡格.香型淡化后的枝江大曲酒工艺实验及调整研究 [J].酿酒科技2009(5):65—67. [3】谭光迅,李净,刘前生,等.露天贮存对浓香型基酒酸、醛、醇、 辅之,追求淡雅舒适”的设计目的。多香融合的柔雅风格 的香气口感,酸酯含量适中并平衡,达到卫生指标要求,整 体呈现淡雅舒适的复合香气,柔和微甜的绵净口感。 酯含量及感官品质的影响[J].酿酒科技,2012(8):93-95. 原酒老熟提高原酒品质[C】//中国酒业协会白酒分会技术委 白酒与传统浓香型白酒相比,不再突出以己酸乙酯为主体 [4]谭崇尧,李净,谭光迅,等.深层地下水降度净化工艺加速白酒 员会(扩大)会议论文集。2014:276—281. 稻花香酒业两项目通过宜昌市科技成果鉴定 本刊讯:近日,湖北省宜昌市科技局组织专家对稻花香酒业公司项目《酿酒副产物深度发酵及高效利用技术》《白酒中邻苯二甲酸酯 含量检测技术》进行科技成果鉴定。鉴定委员会专家审阅了相关技术资料,听取了项目工作报告和技术报告,经过讨论一致认为两项目 成果均达到国内领先水平,可进一步加大成果的推广应用力度。 据悉,《酿酒副产物深度发酵及高效利用技术》采用现代生物发酵技术、生物工程技术将酿酒副产物进行二次发酵利用,降低了生产 成本,增加了企业经济效益。《白酒中领苯二甲酸酯类物质的检测方法研究》采用串联质谱分析法、内标标准曲线法进行白酒中邻苯二甲 酸酯类物质检测,检出限、准确度、重复性均高于传统方法。(江源荐。黄筱鹂编辑) 来源:稻花香集团 2016一O1—15 

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