１１２ 现代检验医学杂志第２９卷第５期２Ｏｌ４年９月 Ｊ Ｍｏｄ Ｌａｂ Ｍｅｄ，Ｖｏ１．２９，Ｎｏ．５，Ｓｅｐｔｅ．２０１４ 类风湿性关节炎患者外周血单核细胞ＴＬＲ２的表达及意义 邹皓琳，祝峰，王新元 （武警江苏省总队医院，江苏扬州 ２２５００３） 摘 要：目的 观察类风湿性关节炎（ＲＡ）患者外周血单核细胞Ｔｏｌｌ样受体２（ＴＬＲ２）的表达变化，探讨其在类风湿性关 节炎发病中的作用。方法 采用流式细胞术检测外周血单核细胞表面ＴＬＲ２所表达的平均荧光强度，应用独立样本ｔ检 验对检测结果进行统计学处理。结果 ＲＡ患者外周血ＣＤ１４＋ＣＤ４５＋细胞表面ＴＬＲ２的平均荧光强度为３５７．６８± ８６．９７，正常人对照外周血单核细胞表面ＴＬＲ２的平均荧光强度为２２３．７１±８７．７Ｏ，活动期ＲＡ患者外周血单核细胞ＴＬＲ２ 的表达水平高于正常对照（ｔ一５．４７８，Ｐ一０．００５，Ｐ＜０．０１）。结论 活动期ＲＡ患者外周血单核细胞ＴＬＲ２表达增高，提示 其在ＲＡ发病机制中可能有重要作用。 关键词：类风湿性关节炎；单核细胞；Ｔｏｌｌ样受体２；流式细胞术 中图分类号：Ｒ５９３．２２；Ｒ３９２．１２文献标志码：Ａｄｏ￣：１０．３９６９／． ． １４．２０１４．０５．Ｏ２９ 文章编号：１６７１－７４１４（２０１４）０５—１１２ ０３ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｏｆ ＴＬＲ２ ｏｎ ｔｈｅ Ｓｕｒｆａｃｅ Ｏｆ Ｍｏｎｏｃｙｔｅ ｉｎ ｔｈｅ Ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ Ｂｌｏｏｄ ｏｆ Ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｓ Ｗｅｌｌ ａｓ Ｉｔｓ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ＺＯＵ Ｈａｏ—ｌｉｎ，ＺＨＵ Ｆｅｎｇ，ＷＡＮＧ Ｘｉｎ—ｙｕａｎ （Ａｒｍｅｄ Ｐｏｌｉｃｅ Ｃｏｒｐｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｉｎ Ｊｉａｎｇｓｕ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｊｉａｎｇｓｕ Ｙａｎｇｚｈｏｕ ２２５００３，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｘａｍｉｎｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｖａｒｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｏｌｌ—ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２（ＴＬＲ ２）ｉｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ（ＲＡ）ａｎｄ ｅｘｐｌｏｒｅ ｉｔｓ ｒｏｌｅ ｉｎ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ ＲＡ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｅａｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ ｏｆ ＴＬＲ ２ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｏｆ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ａｎｄ ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｓａｍｐｌｅｓ ｔ— ｔｅｓｔ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｍｅａｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ ｏｆ ＴＬＲ ２ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｏｆ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ＣＤ１４＋ＣＤ４５＋ｃｅｌｌ ｏｆ ＲＡ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗａｓ ３５７．６８±８６．９７，ｗｈｉｌｅ ｉｎ ｎｏｒｍａｌ ｃｏｎｔｒｏｌ ｉｔ ｗａｓ ２２３．７１±８７．７０．Ｉｔ ｉｎｄｉｃａｔｅｓ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＴＬＲ ２ ｏｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａｃｔｉｖｅ ｄｉｓｅａｓｅ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｉｎ ｎｏｒｍａｌ ｉｎｄｉ— ｖｉｄｕａｌｓ（￡一５．４７８，Ｐ一０．００５，Ｐ＜０．Ｏ１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｉｎｃｒｅａｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ＴＬＲ ２ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａｃｔｉｖｅ ｄｉｓｅａｓｅ ｓｕｇｇｅｓｔｓ ｉｔｓ ｉｍｐｏｒｔ ｒｏｌｅ ｉｎ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ ＲＡ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ；ｍｏｎｏｃｙｔｅ；ｔｏｌｌ—ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２；ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ 类风湿性关节炎（ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ，ＲＡ） 原微生物及其产物种类最多的分子。它不仅介导 是一类自身免疫性疾病，主要表现为慢性、对称性、 病原体相关分子模式的识别，还能够介导对热休克 蛋白等内源性抗原的识别，是联系天然免疫和获得 多滑膜关节炎和关节外病变，其发病机制目前尚未 明确。现代医学认为ＲＡ是一个与环境、细胞、病 毒、遗传、性激素及神经精神状态等因素密切相关 性免疫的桥梁。本研究通过流式细胞数（ＦＣＭ）测 定患者及正常对照外周血单核细胞表面ＴＬＲ２的 的疾病。有研究表明 ］，病变关节周围存在能够被 天然免疫系统识别的病原体相关分子模式（ｐａｔｈｏ— ｇｅｎ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｐａｔｔｅｒｎｓ，ＰＡＭＰ），提示 表达，以探讨其在ＲＡ发病机制中的作用。 １材料与方法 １．１研究对象收集于江苏大学附属医院就诊的 天然免疫与ＲＡ的发病及病情发展有关。Ｔｏｌｌ样 活动期ＲＡ患者３５例，其中女性２４例，男性１１ 受体（ｔｏｌｌ ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＴＬＲ）是一类重要模式识 别受体（ｐａｔｔｅｒｎ ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＰＲＲ），参与 例，年龄为２４～６２岁，平均年龄４２岁。符合１９８７ 年美国风湿病协会（ＡＣＲ）制定的ＲＡ分类标准和 识别多种非特异性的、保守的微生物组分以及相应 内源性配体＿１］。ＴＬＲ可对ＰＡＭＰ进行识别、结 病情活动标准。正常对照２０例，为年龄、性别相匹 配的健康体检者。 １．２试剂与仪器 流式细胞仪（ＦＣＭ）为美国ＢＤ 公司产品，ＦＡＣＳ Ｃａｌｉｂｕｒ淋巴细胞分离液购白天 津灏阳生物制品科技有限责任公司，多甲藻叶绿素 合，并引发一系列的信号转导，导致炎性介质的释 放，引起天然免疫防御，并最终激活获得性免疫系 统。ＴＬＲ家族中，ＴＬＲ２是表达范围最广、识别病 ＊作者简介：邹皓琳（１９８８一），女，本科，技师，Ｅ—ｍａｉｌ：ｚｏｕｈａｏｌｉｎ２０＠１６３．ｃｏｍ。 现代检验医学杂志第２９卷第５期２０１４年９月 Ｊ Ｍｏｄ Ｌａｂ Ｍｅｄ，Ｖｏ１．２９，Ｎｏ．５，Ｓｅｐｔｅ．２０１４ １１３ 蛋白（ＰｅｒＣＰ）荧光素标记的鼠抗人ＣＤ４５购自美国 ＢＤ公司，异硫氰酸（ＦＩＴＣ）荧光素标记的鼠抗人 ＣＤＩ４购自美国ＢＤ公司，ＰＥ标记小鼠抗人ＴＬＲ２ 单抗购自ＥＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ公司。 １．３ 方法 在，受损处及处于应激状态的细胞发出的信号也可 以引发免疫应答，参与某些免疫性疾病的发生发 展。 活化的抗原递呈细胞（ＡＰＣ）进入ＲＡ患者的 关节后在滑膜衬里细胞层大量聚集，释放各种致炎 因子破坏软骨和骨组织，ＡＰＣ细胞通过其表面各 １．３．１样品前处理：抽取静脉血２ ｍｌ，ＥＤＴＡ—Ｋ 抗凝充分混匀。加人２ ｍｌ生理盐水，轻缓混匀，缓 慢加入至２ ｍｌ淋巴细胞分离液液面上，注意不破 类受体捕获和处理抗原，其中ＴＬＲ是较重要的一 类参与分子。ＴＬＲ能够诱导重要的抗原递呈细 坏液面，置水平式离心机中２ ０００ ｒ／ｒａｉｎ，离心２０ ｍｉｎ，分离外周血单个核细胞（ＰＢＭｃ），以磷酸盐缓 冲液（ＰＢＳ）洗涤两次后，调整细胞浓度至４×ｌＯ。／ ｍｌ备用。 １．３．２流式细胞术检测细胞表面分子：取１００ ｌ ＰＢＭＣ悬液于流式细胞管中，加入抗ＣＤ４５一ＰｅｒＣＰ 单克隆抗体和抗ＣＤ１４～ＦＩＴＣ单克隆抗体各１０ ｌ， 抗ＴＬＲ２一ＰＥ单克隆抗体２ ｌ，快速震荡混匀，置室 温下避光孵育１５ ｍｉｎ。将流式细胞管１ ５００ ｒ／ｍｉｎ 离心５ ｍｉｎ后弃上清，用ＰＢＳ震荡洗涤细胞两次 后重悬。用流式细胞仪进行检测，用Ｃｅｌｌｑｕｅｓｔ软 件获取、分析数据。在ＣＤ４５一ＰｅｒＣＰ／ＣＤ１４ＦＩＴＣ散 点图上设门，选定ＣＤ１４＋ＣＤ４５＋细胞群，在 ＣＤ４５一ＰｅｒＣＰ／ＴＬＲ２一ＰＥ散点图上收集门内细胞， 应用ＷｉｎＭＤＩ２．９软件作直方图分析其平均荧光 强度。 １．４统计学分析 计量数据以均数±标准差（ ±ｓ）表示，ＲＡ组与正常对照组测定均值比较采用 独立样本￡检验。应用ＳＰＳＳ１９处理，Ｐ＜０．０５为 差异有统计学意义。 ２ 结果 ３５例活动期ＲＡ患者外周血单核细胞 ＴＬＲ２的表达水平平均荧光强度为３５７．６８，其标准 差为８６．９７，而２Ｏ例正常对照组的平均荧光强度 为２２３．７１，其标准差为８７．７Ｏ，将两组结果采用独 立样本ｔ检验，得出（ｔ一５．４７８，Ｐ一０．００５，Ｐ＜ ０．０１），表明活动期ＲＡ患者外周血单核细胞 ＴＬＲ２的平均荧光强度高于正常对照组，差异具有 统计学意义。 ３ 讨论 近年来，关于ＲＡ的发病机制相关的研 究一直是一个热点，采用流式细胞术检测ＲＡ发病 相关细胞凋亡更具敏感性ｌ２］。 ＴＬＲ是参与非特异性免疫（天然免疫）的一类 重要蛋白质分子，它作为ＰＲＲ，识别天然免疫中的 主要靶分子ＰＡＭＰ。ＰＡＭＰ是众多微生物共有的 一种保守模式分子，广泛存在于病原体细胞表面， 变异较小。机体免疫系统通过ＴＬＲ等ＰＲＲ察觉 微生物感染的存在，进而激发机体免疫反应，同时 也可识别内源性配体。内源性配体在机体应激或 是组织损伤时释放，其存在说明即使没有感染存 胞一树突状细胞（ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ，ＤＣ）的成熟，激活其 分泌一系列细胞因子及趋化因子，并诱导其共刺激 分子表达。ＴＬＲ结合ＰＡＭＰ可增强ＡＰＣ的抗原 呈递功能，促进共刺激分子和主要组织相容性复合 物ＩＩ（ＭＨＣ—ＩＩ）类分子表达，激活初始Ｔ细胞 （Ｔｎ）［３］，继而引发信号转导，激活相关免疫细胞 和／或滑膜细胞，促进其分泌致炎因子如ＩＬ一６， ＴＮＦ—ａ＿４］，以及趋化因子如ＣＣＬ２，ＣＣＬ１８，ＣＸ— ＣＬ８，ＣＸＣＬ１６，ＲＡＮＴＥＳ等［５ ］，启动机体的炎症 反应，进而激活获得性免疫反应。 有学者发现，ＲＡ患者的成纤维母细胞样滑膜 细胞（ＦＬＳ）接触微生物组分或炎症介质后，ＴＬＲ２ 表达升高，提示ＴＬＲ２可能通过启动或维持ＦＬＳ 的激活而参与ＲＡ的发病。进而有研究表明 ＴＬＲ２的配体ＰＧＮ刺激ＲＡ患者ＦＬＳ后，除血管 生成因子，ＶＥＧＦ，ＩＬ一８／ＣＸＣＬ８的分泌增加外，其 ＴＬＲ２表达也升高，进一步说明了ＴＬＲ２参与了滑 膜的病理改变［７］。同时有研究证实，ＲＡ患者 ＴＬＲ２的表达与ＤＡＳ，ＣＲＰ，ＥＳＲ呈正相关，表明 ＴＬＲ２的变化与ＲＡ滑膜的炎症发展一致＿８．９＿。本 研究采用多色荧光流式细胞术测定ＲＡ组与正常 对照组ＴＬＲ平均荧光强度，发现活动期患者 ＴＬＲ２的表达水平高于正常对照组，表明ＲＡ患者 存在天然免疫系统的活化，其通过识别ＰＡＭＰ诱 导免疫效应分子表达，产生各种吸引炎症细胞向关 节聚集的因子，从而参与病情的发生发展，提示 ＴＬＲ２可能参与ＲＡ的病理过程。通过研究ＴＬＲ 在ＲＡ病情过程中的作用，有助于明确ＲＡ的发病 机制，也对其预防及治疗提供一个新方向。关于 ＴＬＲ２的明显升高是ＲＡ的发病机制之一，还是由 于ＲＡ患者关节炎症导致ＴＬＲ２显著升高，还需要 进一步研究。 参考文献： ［１］孟列素，朱文华，吕社民．Ｔｏｌｌ样受体与类风湿关节炎 ［Ｊ］．中华风湿病学杂志，２００８，１２（１）：４５—４８． Ｍｅｎｇ ＬＳ，Ｚｈｕ ＷＨ，Ｌａ ＳＭ．Ｔｏｌｌ—ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｎｄ Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ［Ｊ］．Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｒｈｅｕｍａ— ｔｏｌｏｇｙ，２００８，１２（１）：４５－４８． （下转１１６页） １１６ 现代检验医学杂志第２９卷第５期２０１４年９月 Ｊ Ｍｏｄ Ｌａｂ Ｍｅｄ，Ｖｏ１．２９，Ｎｏ．５，Ｓｅｐｔｅ．２０１４ 些结核病人的血液中产生抗原和相应抗体结合为 ［１１ 吴静，徐 建，张映铭，等．．ｙ一干扰素释放试验对活 抗原抗体复合物，导致游离抗体滴度降低，若低于 设定显示疾病的临界值，则此时显示为阴性。或与 动性肺结核的诊断价值［Ｊ１．中华实用诊断与治疗杂 志，２０１１，２５（１２）：１１５４—１１５５，１１５９． Ｗｕ Ｊ，Ｘｕ Ｊ，Ｚｈａｎｇ ＹＭ，ｅｔ ａ１．Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ｖａｌｕｅ ｏｆ ｉｎ— ｔｅｒｆｅｒｏｎ ｇａｍｍａ ｒｅｌｅａｓｅ ａｓｓａｙ ｔｏ ａｃｔｉｖｅ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｔｕ— 个体的免疫功能异常，不产生或仅产生少量特异性 结核抗体有关。 本研究显示ＴＢ—ＩＧＲＡ法检测结核分枝杆菌 与蛋白芯片法相比较敏感度较高，且对肺内、肺外 结核的检测同样有效。阳性预测值、阴性预测值和 约登指数均高于蛋白芯片法。ＴＢ—ＩＧＲＡ无需分离 ｈｅｒｃｕｌｏｓｉｓ［Ｊ１．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ，２０１１，１２（２５）：１１５４—１１５５，１１５９． ［２］ 蒋英，赵蓉，张胜男，等．干扰素释放酶联免疫法 （ＴＢ－ＩＧＲＡ）用于检测结核分枝杆菌的优越性ＬＪ］．实 用预防医学，２Ｏ１２，１９（１）：２４—２６． Ｊｉａｎｇ Ｙ，Ｚｈａｏ Ｒ，Ｚｈａｎｇ ＳＮ。ｅｔ ａ１．Ａｄｖａｎｔａｇｅｓ ｏｆ ＩＦＮ 淋巴细胞，对操作和设备要求也相对较低，在临床 上值得推广和应用，可作为结核分枝杆菌感染的常 规诊断方法，但运用时应与临床症状以及其他诊断 方法如影像诊断、痰菌涂片、痰菌培养等相结合，同 时还要考虑患者的个体免疫状态等。ＴＢ—ＩＧＲＡ反 应假阴性的可能原因有：标本的不正确处理如剧烈 ７ ｒｅｌｅａｓｅ ａｓｓａｙ ｆｏｒ Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ［Ｊ ｊ． Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１２，１９（１）：２４—２６． ２３］ 何启军，姚 敏，吴多荣．蛋白芯片法诊断结核病的评 价［Ｊ］．中国热带医学，２０１０，１０（５）：５２３—５２４． Ｈｅ ０３，Ｙａｏ Ｍ，Ｗｕ ＤＲ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｂｙ ｐｒｏｔｅｉｎ ｃｈｉｐｓ［Ｊ］．Ｃｈｉｎａ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１０，１０（５）：５２３—５２４． 操作导致细胞受损；受试者本身免疫系统缺陷如接 受免疫抑制治疗或ＡＩＤＳ【４］。ＴＢ—ＩＧＲＡ缺点在于 ［４］ Ｒａｂｙ Ｅ，Ｍｏｙｏ Ｍ，Ｄｅｖｅｎｄｒａ Ａ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ＨＩＶ ｏｎ ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ａ ｗｈｏｌｅ ｂｌｏｏｄ ＩＦＮ—ｇａｍｍａ ｒｅｌｅａｓｅ ａｓｓａｙ ｉｎ Ｚａｍｂｉａｎ ａｄｕｌｔｓ ｗｉｔｈ ａｃｔｉｖｅ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏ— 结果阳性不能够提示临床患者的病变部位；无法根 据数值的高低来判断患者是活动性结核病或是潜 伏感染者，需要结合临床的判断。 参考文献： （上接１ｌ３页） ｓｉｓ［Ｊ］．Ｐｌｏｓ Ｏｎｅ，２００８，３（６）：２４８９—２４９５． 收稿日期：２０１４—０６—１１ 修回日期：２０１４—０６—３０ ｄｏｗｎ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ＴＬＲ４ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ＴＬＲ４一ｍｅｄｉａｔｅｄ ［２］杨明辉，袁国华，魏锦，等．流式细胞术检测类风湿 ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ｓｙｎｏｖｉａｌ 关节炎滑液对中性粒细胞凋亡的影响［Ｊ］．现代检验 医学杂志，２００６，２１（２）：４１—４３． Ｙａｎｇ ＭＨ，Ｙｕａｎ ＧＨ，Ｗｅｉ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ａｎａｌｙｓｅｄ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｓｙｎｏｖｉａｌ ｆｌｕｉｄｓ ｆｒｏｍ Ｒｈｅｕｍａ— ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ［Ｊ］．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ，２００６，４５（５）：５２７—５３２． ｌ—ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２ ［７］ Ｃｈｏ ＭＬ，Ｊｕ ＪＨ，Ｋｉｍ ＨＲ，ｅｔ ａ１．Ｔｏｌｌｉｇａｎｄ ｍｅｄｉａｔｅｓ ｔｈｅ ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ ｆａｃｔｏｒ， ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ａｎｄ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－８／ ｔｏｌｄ Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ｏｎ ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｄｅｒｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２００６，２１（２）：４１—４３． ＣＸＣＬ８ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ｓｙｎｏｖｉａｌ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ［Ｊ］． Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｌｅｔｔｅｒｓ，２００７，１０８（２）：１２１－１２８． ［３１时庆康，陈兰举．Ｔｏｌｌ样受体在类风湿性关节炎中的 作用［Ｊ］．国际儿科学杂志，２０１０，３７（１）：４２—４４． Ｓｈｉ ＱＫ，Ｃｈｅｎ ＬＪ．Ｒｏｌｅ ｏｆ Ｔｏｌｌ—ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ｉｎ ｐａ～ ［８］ 李通，左晓霞，肖献忠，等．类风湿关节炎患者外周 血单核细胞Ｔｏｌｌ样受体２的表达及意义［Ｊ］．中华风 湿病学杂志，２００６，１０（７）：３９８—４０１． Ｌｉ Ｔ，Ｚｕｏ ＸＸ，Ｘｉａｏ ＸＺ，ｅｔ ａ１．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｓｉｇｎｉｆｉ— ｃａｎｃｅ ｏｆ Ｔｏｌｌ—ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ２ ｉｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｍｏｎ— ｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ，２０１０，３７（１）：４２—４４． ［４］Ｒｏｅｌｏｆｓ ＭＦ，Ｊｏｏｓｔｅｎ ＬＡ，Ａｂｄｏｌｌａｈｉ—Ｒｏｏｄｓａｚ Ｓ，ｅｔ ａ１． Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｏｌｌ—ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ３ ａｎｄ ７ ｉｎ ｒｈｅｕ～ ｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ｓｙｎｏｖｉｕｍ ｉｓ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ａｎｄ ｃｏｓｔｉｍｕｌａ～ ｏｃｙｔｅｓ ｏｆ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ｐａｔｉｅｎｔｓ［Ｊ］．Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ，２００６，１０（７）：３９８—４０１． ［９］ 潘正论，张源潮，许冬梅，等．天然免疫分子ＴＬＲ２， ＴＬＲ４在类风湿关节炎的表达模式研究［Ｊ１．中华风 湿病学杂志，２００５，９（２）：８６—８８． Ｐａｎ ＺＬ，Ｚｈａｎｇ ＹＣ，Ｘｕ ＤＭ，ｅｔ ａ１．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐａｔｔｅｒｎ ｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｏｌｌ—ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ３，４，ａｎｄ ７／８ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎ ｓｙｎ～ ｅｒｇｉｓｔｉｃ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｂｙ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ａｒ～ ｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ，２００５，５２（８）：２３１３—２３２２． ｒ５］ Ｖａｎ Ｌｉｅｓｈｏｕｔ ＡＷ，ｖａｎ ｄｅｒ Ｖｏｏｒｔ Ｒ，ｌｅ Ｂｌａｎｃ ＬＭ，ｅｔ ａ１．Ｎｏｖｅｌ ｉｎｓｉｇｈｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ＣＣＬ１８ ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ ｂｙ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ ａｎｄ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｖｉａ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ．Ｔｏｌｌ～ ｏｆ ｔｏｌｌ ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ一２．一４ ｏｎ ｔｈｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｏｆ ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ［Ｊ］．Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ，２００５， ９（２）：８６—８８． ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ａｎｄ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ｓｙｎｏｖｉａｌ ｆｌｕｉｄ［Ｊ］．ＢＭＣ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００６，７（１）：２３． 收稿日期：２０１４—０４—０５ 修回日期：２Ｏ１４一Ｏ７—２３ ［６］Ｇｕｔｉｅｒｒｅｚ Ｃａｎａｓ Ｉ，Ｊｕａｒｒａｎｚ Ｙ，Ｓａｎｔｉａｇｏ Ｂ，ｅｔ ａ１．ＶＩＰ