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子宫内膜胞饮突表达判断冻融胚胎移植时机的研究

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第29卷第8期 井冈山学院学报(自然科学) V01.29 No.8 2008年8月 Journal of Jlm路an铲han University(Science and Technology) Aug.2008 子宫内膜胞饮突表达判断冻融胚胎移植时机的研究 肖 帆’,黄筱金 ,胡晓玲’ (1.井冈山学院医学院,江西吉安343000;2.南昌大学第一附属医院辅助生殖科,江西南昌 330006) 【摘要】目的研究利用扫描电镜观察到的子宫内膜成熟胞饮突表达判断冻融胚胎移植时机。方法对本科完成 自然排卵冻融胚胎移植123个周期进行回顾性分析,按判断冻融胚胎的移植时机方法不同分为A组(利用扫描电 镜观察到的成熟胞饮突判断)、B组(利用血LH峰来判断)。结果两组临床妊娠率分别为34.37%和17.58%。胚胎 着床率分别为16 7%和8.6%。结论 利用成熟胞饮突判断冻融胚胎移植时机可提高临床妊娠率及胚胎着床率。 【关键词】冻融胚胎;胚胎移植;着床窗;胞饮突;妊娠率 [中图分类号】R321-33 [文献标识码】A [文章编号】1673--4718(2008)08--0059-03 自从1978年世界首例试管婴儿在英国诞生以 阴道B超及血清E2、P和LH监测卵泡的排卵的情况, 来,人类辅助生殖技术(ART)得到巨大的发展,给成 排卵后的第6、7和8天分别刮取子宫内膜,投入2.5% 千上万的不孕患者带来了福音。目前体外授精一胚 戊二醛液并置于4℃冰箱中固定2 h,然后弃去戊二 胎移植(IVF—Ea3的临床妊娠率仍然很低,约为30%- 醛液,换用0.1 M PBS液,置于4℃冰箱中保存,制片后 40%。冻融胚胎移植(FET)的妊娠率只有25%t”。冻融 行扫描电镜观察胞饮突的结构及确定成熟胞饮突 胚胎移植不但避免了超促排卵(COH)周期胚胎的浪 出现日。 费,预防严重的卵巢过度刺激综合征,而且扩大了单 1.2.2冻融胚胎的准备 常规体外受精一胚胎移植 一刺激周期获得的胚胎的最大利用度,增加了IVF— (IVF-ET)或胞浆内单精子注射(ICSI)治疗周期中, ET累积妊娠率。但人类冻融胚胎移植临床妊娠率的 根据胚胎形态学参数,可将早期胚胎划分为4个等 影响因素众多,选择一个最佳的胚胎移植时机是决 级【2】。胚胎形态学评分达I、Ⅱ、Ⅲ级者可用于移植 定冻融胚胎能否发生妊娠的最后关键因素。本科 或冷冻保存。胚胎均用英国Planner 360程序冷冻仪 2004年1月~2oo6年12月共完成自然排卵冻融胚胎 慢速冷冻法冻存,快速法复苏。融解后胚胎形态学 移植l14例,共127个周期。分别利用成熟胞饮突和 评分同前,融解后形态学评分达I、Ⅱ、皿级的存活 利用血LH峰判断冻融胚胎移植时机,为评估不同判 胚胎用于移植。 断移植时机对临床结果的影响,本文对此127个周 1.2.3 LH峰测定根据病人既往月经周期情况及B 期进行了回顾性分析。 超下所见子宫内膜、卵泡发育情况进行血清E 、P和 1对象和方法 LH水平的监测。A、B两组病人均于第10d起监测B 超,如最大卵泡直径≥14 mm则分别在每天抽血用 1.1 对象 电化学发光免疫分析技术进行血清E2、P和LH水平 2004年1月-2006年12月在本科共完成自然排 测定,以确定血LH峰值日及排卵日。 卵冻融胚胎移植l14例,共127个周期。根据判断冻 1.2.4冻融胚胎的移植①实验组:以FET前模拟 融胚胎移植时机方法的不同分为A、B两组,A组为利 周期出现成熟胞饮突的时间往前推3 d为移植日。② 用成熟胞饮突判断冻融胚胎移植时机的36例36个 对照组:以血LH峰后第4 d为移植日。③妊娠结局: 周期(因其中4例未检出成熟胞饮突,未列入统计分 FET后14 d验血13-HCG,如果血B—HCG>10 IU/L初 析),B组为利用电化学发光免疫分析技术测定血LH 步诊断为生化妊娠,;移植后30-35 d行B超检查,宫腔 峰判断冻融胚胎移植时机的78例91个周期。两组患 内有妊娠囊、胎芽及胎心搏动,确定为临床妊娠。 者平均年龄为(30.6 ̄2.9)岁及(30.5 ̄1.2)岁,平均不 1.2.5统计学方法所得数据以平均数±标准差(x± 孕年限(5.8 ̄1.3)年和(5.4 ̄1.2)年,均无显著差异。 s)表示。应用SPSS14.0软件系统进行t检验和X 检 1.2方法 验。P<O.05时认为有统计学意义。 1.2.1成熟胞饮突的检测 在FET前模拟周期通过 收稿日期:2008-03-07 作者简介:肖  ̄{(1971一),女,江西吉水人,副主任医师,讲师,硕士,主要研究方向为生殖与内分泌 维普资讯 http://www.cqvip.com 60 井冈山学院学报(自然科学) 第29卷第8期 2 结果 32例32个周期中,临床妊娠数为11例,周期临床妊 娠率34.37%(11/32);B组利用血LH峰判断冻融胚胎 2.1 A、B两组患者平均年龄、平均子宫内膜厚度、 移植时机的78例91个周期中,临床妊娠16例,周期 冻融胚胎移植数目、冷冻前胚胎形态学评分及解冻 临床妊娠率17.58%。经统计学分析临床妊娠率有非 后胚胎卵裂球存活对比均无显著差异(P>0.05)。 常显著性差异(P<O.01)见表1。 2.2 A组利用成熟胞饮突判断冻融胚胎移植时机的 表1 两组冻融胚胎存活情况及临床妊娠率比较 组别周期数平均年龄(岁)平均不孕年限内膜厚度(111113)解冻胚胎数存活胚胎(%)移植胚胎数(个)平均移植胚胎数(个)临床妊娠率(%) {P(O.O1 2-3 A组共移植胚胎9O个,平均每周期移植胚胎 胚胎3.O±O.35个,着床胚胎数为19个,胚胎着床率为 2.92+0.37个,着床胚胎数为15个,胚胎着床率为 8.6%,经统计学分析胚胎着床率有显著性差异(P< 16.7%;B组共移植冻融胚胎220个,平均每周期移植0.05)见表2。 表2 A、B两组冻融胚胎复苏前后情况及移植胚胎形态学比较 3讨论 发育情况的同时,对血LH水平进行监测是判断胚胎 移植时机的主要方法。为监测自然周期的LH峰和排 在IVF超排卵周期中,能获得较多的卵子,经培 卵,需要反复进行激素测定和超声监测,排卵发生 养后往往能获得多个形态良好的优质胚胎,在取卵 在LH峰后12-36 h,血LH起始峰在排卵前32 h,顶峰 周期移植1-3个胚胎后,将剩余的良好胚胎冷冻保 在排卵前16.5 h,LH呈脉冲式分泌,LH峰的脉冲幅度 存,将增加取卵周期的累计妊娠率。胚胎质量是移植 约在2.5倍的变化范围,可造成预测排卵时间的误 后获得临床妊娠的关键,移植胚胎冻融前后形态良 差。 好、复苏胚胎成活率高的周期的妊娠者显著高于非 胞饮突是黄体中期扫描电镜下子宫内膜腔面 妊娠者【3】,而如何判断这些冻融胚胎的移植时机也是 发育增大的光滑膜突起,形如蘑菇,其出现、完全发 保证冻融胚胎临床妊娠率的关键之一。 育及退化的时间与种植窗完全吻合。2004年Pantos A、B两组患者平均年龄、子宫内膜厚度、冻融胚 等 试验证实:对一组3次IVF失败者,将完全发育的 胎移植数目对比均无显著差异(P>0.05)。A、B两组 胞饮突作为内膜最具容受性的时间标记来调整IVF 资料胚胎冷冻前、解冻后形态学评分及冻融胚胎复 术后开始使用孕激素的时间,有76.47%的患者经两 苏成活率均无显著性差异,胚胎质量方面基本处于 次ⅣF移植周期获得了临床妊娠,健康出生率达67. 同水平。因此,在两组胚胎质量无差异的情况下,判 64%;在那些未经检测和调整的妇女中,只有33.33% 定子宫内膜与胚胎发育的同步性,即冻融胚胎的移 获得妊娠,两组妊娠结局有显著差异。Nawroth等[51在 植时机成为最后的关键。本研究中,B组资料利用血 研究激素替代周期移冻融胚胎的方案亦运用胞饮突 LH峰来判断移植时机,其临床妊娠率为17.58%,A 的出现作为估计应用孕激素的依据,选择FET的时 组资料利用成熟胞饮突来判断移植时机,其临床妊 机。故可根据胞饮突的出现、胚胎发育的不同来调 娠率为34.37%,两组资料的临床妊娠率经统计学分 整不同人群的ET时间提高胚胎的植入率。作为子宫 析有非常显著性差异。A组资料的胚胎种植率为 内膜容受性的形态标记,胞饮突在临床上已成为 16.7%,B组资料的胚胎种植率为8.6%,经统计学分析 IVF进行ET的一个重要指标嘲。 两组的胚胎种植率有显著差异。 本研究中,实验组36个周期中有32个检测到成 对自然排卵的患者在B超监测子宫内膜与卵泡 (下转第68页) 维普资讯 http://www.cqvip.com 井冈山学院学报(自然科学) 第29卷第8期 [9】王晓峰,李拴德,刘建新.大鼠胚胎神经干细胞的体外培养 [11]张建平,孙弋,司银楚.大鼠脑损伤海马神经干细胞bFGF表 及鉴定[J].中国临床神经外科杂志,2008,13(1):32-34. 达及三七总皂苷的作用研究【J].井冈山学院学 ̄200829 [10l程龙,朱培纯,司银楚,等.去大脑皮层血管成年大鼠前脑 (2):72-77. bFGF和PCNA表达及三七总皂苷作用研究【J】.中医药学 [12】曾江,崔秀明,周家明,等.三七根茎的化学成分研究【J].中 刊2003,21(5):687-689. 药材,2007,30(11):1388—1390. Effects 0f panax notoginseng saponing 0n activity and diferentiation 0f neonate rat hippocampus neUral stem cells in vitro ■ ・ ll ● ●‘ WEI Chu-rong,SUN Yi,ZHANG Jian-ping (school of Medicine,Jinggangshan University,Jian 343009,China) Abstract:Objective:Study the effects of panax notoginseng saponing on activity and differentiation of hip— pocampus neural stem cells in vitro.Methods:Hippocampus neural stem cells cultured in virto diferently were seeded in 96 plate and 1 2 plate,and the ceils cuhured in 96 plate were intervented with diversity concentration panax notoginseng saponing and at different time with same concentration and applying MTY method to detect OD value,and then observing effect of panax notoginseng saponing on activity.Results: (1)Panax notoginseng saponins can enhance activity of hippocampal neural stem ceils under a certain con— centration extent.(2)Hippocampal neural stem cells can differentiate into neuron and glial with panax no— toginseng saponing.Conclusion:Panax notoginseng saponing can enhance the activity of hippocampus and promote hippocampus the differentiation of neural stem ceils. Key words:hippoeampal neural stem cells;panax notoginseng saponins;activity;differentiation;neurons;gha (上接第60页) 熟胞饮突,4个未检测到成熟胞饮突;而32个成熟胞 20o5.487-50lJ 饮突出现有排卵后第6天的有21个,出现在排卵后 【2]庄广伦.现代辅助生育技术【M].北京:人民卫生出版社, 第7天的有7例。出现在排卵后第8天的有4例,可见 2Oo4.24O. 成熟胞饮突出现的时间不同,利用FET前模拟周期 [3]朱依敏,黄荷风,林金菊,等.影响冻融胚胎移植成功的因素分 检测到的成熟胞饮突出现的时间指导FET,做到个 析【J].中华妇产科杂志,2001,36(5):290-292. 【4]Pantso K,Nikas G,Makrakis E,et a1.Clinical value of 体化且提高了临床妊娠率和胚胎种植率。此结果显 endometiral pinopodes detection in artilfcial donafion cycles 示,胞饮突是一种比较精确和个体化的子宫内膜接 [J].Reprod Biomed Onjine,2004,9(1):86-90. 受性标志物,能准确地反映母体子宫内膜的接受情 【5]Nawroth F,Ludwig M. What is the'ideal duration of 况,对利用LH峰移植冻融胚胎失败的患者不失为另 progesterone supplementation before the transfer of 一种判断移植时机的方法。 cryopreserve—thawed embryos in estorgen[J].progesterone erplacement protocols Hum Repel,2005,2 :1127-1134. 【6]Nikas G,Makrigiannakis A,Ann NY.Endometrial pinopodes 参考文献 and uterine receptivity[J].Acad Sci 2003,997(2):120-123. [1]陈子江.人类生殖与辅助生殖【M].北京:科学技术出版社, rll。■、lI Ie analysis ot pinopoOes ln trl ● n ● l ● l uman enaometnUm lnl ■ ● ● 量IT11 nr1’n  XIAo Fan .HUANG Xiao-jin2.HU Xiao—ling (1.School of Medicine,Jingangshan Universiyt,Ji na 343000,China; 2.Department of Assistde Reprodutive,First ̄ated Hospital,Nanehang Universiyt of Medical Sciences,Nanchang 330006,China) Abstract:Objective:To analyze pinopodes in human endometrium judging appropriate opportunity for FET. MeⅡIods:Retrospectively analyzed 1 23 transplanting cycles our center had executed.These cases were di. vided into two groups—group A(by mature pinopodes)and group B(by the blood LH peak).Results: e clinical pregnancy rate(34.37%vs.17.58%)and the embryonic nidation rate(16.7 vs.8.6%).Conclusions: Judging FET time via mature pinopodes observed by SEM can increase clinical pregnancy rate and embry— onic nidation rate. Key words:frozen・‘thawed embryo;embryo transfer;pinopodes (责任校对:彭晓冬) 

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