・１１０・ 中西医结合肝病杂志２０１２年第２２卷第２期 ・临床检验・ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００５－０２６４．２０１２．０２．０１５ 化学发光法检测慢性乙型肝炎病毒感染者肝纤维化四项指标结果分析 梁新宇 田鹏飞段正军 兰州市第二人民医院肝病研究所（甘肃兰州，７３００４６） 摘要目的：探讨应用化学发光法定量检测肝纤维化指标透明质酸（ＨＡ）、层粘连蛋白（ＬＮ）、Ⅲ型前胶原氮 端肽（ＰＩＩＩＮＰ）、ＩＶ型胶原（ｃ一Ⅳ）对肝纤维化的诊断价值。方法：应用化学发光法检测１９６例慢性乙型肝炎病毒 （ＨＢＶ）感染者血清肝纤维化指标，其中ＨＢＶ携带者５０例，慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）４８例，慢性重型肝炎（简称慢重 肝）３６例，乙型肝炎肝硬化６２例，正常对照４０例，并对结果进行统计学分析。结果：患者ＨＡ、ＬＮ、ＰＩｎＮＰ、Ｃ．ＩＶ在 ＨＢＶ携带者、ＣＨＢ、慢重肝、乙型肝炎肝硬化患者之间比较，差异有显著性意义（Ｐ＜０．０５）。测定值升高的顺序为： 慢重肝＞乙型肝炎肝硬化＞ＣＨＢ＞ＨＢＶ携带者。结论：应用化学发光法动态检测肝纤维化四项指标是指导临床判断肝 纤维化程度的非损伤性的良好检测方法。 关键词肝纤维化；肝炎，乙型，慢性；化学发光法 Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｎ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｆｉｂｉｏｓｉｓ ｍａｒｋｅｒｓ ｄｅｔｅｃｔｉｖｅｄ ｂｙ ｃｈｅｍｏｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｃｈｒｏｎｉｃ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ＬＩＡＮＧ ＸＩＮ－ＹＵ，ＴＩＡＮ ＰＥＮＧ－ＦＥＩ，ＤＵＡＮ ＺＨＥＮＧ－ＪＵＮ．Ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅｓ ｉｎｓｔｉｔｕｄｅ ｉｎ ｌａｒｔｚｈｏｕ ｓｅｃｏｎｄ ｈｏｓｐｉｔａｌ（Ｌａｎｚｈｏｕ Ｃａｎｓｈｕ， ７３００４６）Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｖａｌｕｅ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ（ＨＡ），ｌａｍｉｎｉｎ（ＬＮ），ｔｙｐｅ ＩＩＩ ｐｒｏｃｏｌｌａｇｅｎ ａｍｉｎｏｐｅｐｔｉｄｅ（ＰｍＮＰ），ｃｏｌｌａｇｅｎ（Ｃ－Ｖ）．ＭｅｔＩｈｏｄｓ：Ｔｈｅ ｆｏｕｒ ｍａｒｋｅｒｓ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｏｆ １９６ ｃａｓｅ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｉｖｅｄ ｂｙ ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ，ｉｎｃｌｕｄｅｄ ＨＢＶ ｃａｒｒｉｅｓ ５０ ｃａｓｅ、 ｃｈｒｏｎｉｃ ｈｅｐａｔｉｃｓ Ｂ ４８ ｃａｓｅ，ｃｈｒｏｎｉｃ ｓｅｖｅｒ ｈｅｐａｔｉｃ ３６ ｃａｓｅ，ｅｉｒｒｏｈｏｓｉｓ ６２ ｃａｓｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｆｅｒｅｎｃｅ ａｍｏｎｇ ＨＢＶ ｃａｒｒｉｅｓ，ｃｈｒｏｎｉｃ ｈｅｐａｔｉｃｓ Ｂ，ｃｈｒｏｎｉｃ ｓｅｖｅｒ ｈｅｐａｔｉｃ，ａｎｄ ｃｉｒｒｏｈｏｓｉｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅｇｒｅｅｍｅｎｔ ｏｆ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｖａｌｕｅ ｗｅｒｅ：ｃｈｒｏｎｉｃ ｓｅｖ． ｅｒ ｈｅｐａｔｉｃ＞ｃｉｒｒｏｈｏｓｉｓ＞ｃｈｒｏｎｉｃ ｈｅｐａｔｉｃｓ Ｂ＞ＨＢＶ ｃａｒｒｉｅｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ ｉｓ ｖａｌｕａｂｌｅ ｍｅｔｈｅｄ ｆｏｒ ｄｉａｇｎｏｓｉｔｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｄｅｇｒｅｅ ｉｎ ｌｉｖｅｒ ｃｈｒｏｎｉｃ ｄｉｓｅａｓｅ． Ｋｅｙ Ｗｏｒｄｓ ｈｅｐａｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ；ｃｈｒｏｎｉｃ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ； 在纤维化发生的不同阶段，患者血清中肝纤维化指标升 １．２试剂与方法ＨＡ参考值为０～１２０ｎｇ／ｍｌ、ＬＮ参考值为 高的幅度不同及检出的阳性率也不同 Ｊ。我们应用化学发光 法检测１９６例ＨＢＶ感染者ＨＡ、ＬＮ、ＰⅢＮＰ、Ｃ—Ｖ等４项血清 Ｉ肝纤维化指标进行结果分析，现报告如下。 １资料与方法 ０～１４０ｎｇ／ｍｌ、ＰⅢＮＰ参考值为０—１２ ｎｇ／ｍｌ、Ｃ—Ｖ参考值为０ Ｉ～１２ｎｇ／ｍｌ。试剂盒及化学发光检测仪均由北京科美生物技术 有限公司提供；ＨＢＶ检测试剂盒由厦门新创生物技术公司提 供。总胆汁酸（ＴＢＡ）检测试剂盒由北京九强生物技术有限 公司提供，采用循环酶法检测。所有患者均采集清晨空腹 血清。 １．１一般资料１９６例患者，其中门诊５５例住院１４１例；年 龄在１９～６４岁，平均４４岁；男１５２例，女４４例；ＨＢＶ携带 者５０例；ＣＨＢ ４８例；慢重肝３６例；乙型肝炎肝硬化６２例， １．３统计学方法采用ＳＰＳＳ １７．０软件进行数据统计学处理。 均为代偿期患者。诊断符合２０１０年１２月中华医学会肝病学 分会与中华医学会感染病学分会联合修订的《慢性乙型肝炎 防治指南》 。另设正常体检人员４０例作为对照组。 数据以（ ± ）表示，两组样本均值间比较先行方差齐性检 验，方差齐性用 检验，否则行Ｆ检验。 ２结果 中西医结合肝病杂志２０１２年第２２卷第２期 ・１１１・ ２．１ １９６例患者血清４项肝纤维化指标检测结果见表ｌ。 胶原蛋白由５％一１０％可增加到约５０％。该四项指标不仅反 表１ １９６例患者血清肝纤维化指标及 胆汁酸检测结果比较（；±ｓ。ｎｇ／ｍ１） ＨＡ、ＬＮ、ＰＩＩＩＮＰ、Ｃ．１Ｖ各组之间相比，Ｐ均＜Ｏ．０５ 肝纤维化四项指标在ＨＢＶ携带者、ＣＨＢ、慢重肝、肝硬化４ 组患者的测定值之间比较，差异有显著性意义（Ｐ＜０．０５）， 并随着肝纤维的程度提高其测定值也随之升高，但到肝硬化 时则有所降低。 ２．２ １９６例患者血清肝纤维指标定量检测值的９５％置信区间 见表２。 表２ １９６例患者血清肝纤维化指标定量检测值的９５％置信区间 ３讨论 ＨＡ为基质成分之一，主要反映肝内生成的纤维量及肝细 胞受损情况；ＬＮ为基底膜中非胶原性结构蛋白，与门静脉压 力呈正相关；ＰｍＮＰ的血清含量反映肝内Ⅲ型胶原的合成水 平；Ｃ一１Ｖ为基底膜的主要成分，反映基底膜的更新率，是肝 纤维化的早期指标之一。这４项指标经动物实验和临床研究 表明它们与肝纤维化程度成 相关 。发生肝纤维化时肝内 映肝纤维化，也与肝组织炎症及坏死密切相关，因此选择灵 敏度和特异性较好的方法和试剂，同时结合ＩＩ缶床表现和肝功 能才能更好地对肝纤维化的程度进行综合评价。另外试剂的 特异性、灵敏度以及结缔组织性疾病和年龄等因素，可能影 响检测结果 。血清总胆汁酸（ＴＢＡ）是唯一可同时反映肝 细胞的分泌功能、合成功能、肝细胞损伤等方面的血清指标。 当肝细胞损伤时会导致血清ＴＢＡ含量升高 ］。ＴＢＡ又是反映 肝细胞损害较灵敏的早期指标，尤其在肝功能酶学指标改变 不明显时，其对肝硬化的诊断有一定的Ｉ临床价值。 本实验采用目前最先进的化学发光法进行检测，结果显 示ＨＡ、Ｃ—ＶＩ、ＰⅢＮＰ对肝纤维化的敏感性较高，ＬＮ对肝纤 维化的诊断有一定的局限性。尤其ＨＡ、Ｃ－ＶＩ对肝纤维化反应 较敏感，而ＨＡ更具有代表性。早期肝纤维化胶原形成时以Ｐ ⅢＮＰ为主，并且ＰⅢＮＰ与肝纤维化的活动程度密切相关。但 已有广泛的肝硬化形成时纤维化的合成与增生会不如初期活 跃，此时ＰⅢＮＰ可无明显升高 。结果显示：慢重肝的肝纤 维化指标增高的幅度大于肝硬化。同时，慢性肝纤维化不同 分期之间测定值常有重叠，肝细胞的炎症坏死时，可表现为 肝纤维化增生的过程中血清测定值可一过性升高，应动态监 测检查。传统的肝穿刺病理检查因其创伤性、局限性和禁忌 症，较难作为常规检查及动态观察 。实验证明在肝纤维化 过程中的不同阶段，肝纤维化４项血清学指标虽不能代替肝 活检，但其与肝纤维化进程密切相关，可用于临床动态观察 和疗效判断。 参考文献 ［１］邵彬，聂青和，张亚飞，等．肝病患者血清中ＴＩＭＰ．１与ＨＡ、 ＰｃⅢ、Ｃ一１Ｖ、ＬＮ水平的相关性［Ｊ］．胃肠病学和肝病学杂志， ２００６，１５（３）：２５４—２５７． ［２］中华医学会肝病学分会、感染病学分会．慢性乙型肝炎防治指南 ［Ｊ］．中华肝脏病杂志，２０１０，１９（１）：ｌ３—２４． ［３］尹珊珊，李新民，王宝恩，等．血清胶原酶对判断慢性乙型肝炎 肝纤维化及炎症程度的意义［Ｊ］．中华肝脏病杂志，２００４，１２ （１１）：６６６—６６８． ［４］高耀华，廖小林．肝纤维化的Ｉ临床生化指标研究［Ｊ］．国外医 学临床生物化学与检验学分册，２００３，２４（６）：３５１—３５２． ［５］程环．血清总胆汁酸测定在肝脏疾病诊断中的评价与应用［Ｊ］． 国际检验医学杂志，２００９，３０（８）：７８８—７８９． ［６］蔡卫民，郑敏，翁红雷，等．慢性肝炎患者血清肝纤维化指标的 检测及其意义——附２６００例（２８０例肝活检）血清指标分析 ［Ｊ］．中华内科杂志，２００１，４０：７４４８—７４５１． ［７］腾光菊，聂青和．经皮肝脏活体穿刺活检技巧及研究进展［Ｊ］． 世界华人消化杂志，２００３，１１（６）：７７５—７７６． （收稿日期：２０１１—１１—２８编辑：程良斌）
