维普资讯 http://www.cqvip.com 张华等．血红索氧合酶一ｌ对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用 ・１９３・ ・论 著・ 血红素氧合酶一１对肝脏缺血再灌注 损伤的保护作用 张华，杨定华 ， 彭民浩 （广西医科大学第一附属医院肝胆外科肝移植中心，广西南宁５３００２１） ［摘要］ 目的：探讨血红素氧合酶一１（ＨＯ一１）对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法：ＳＤ大鼠３０只， 建立二套袖法原位肝移植模型。随机分为３组：对照组，无任何处理；ＣｏＰＰ处理组，供肝收获前２４ ｈ供体腹腔注射 ＨＯ一１诱导剂ＣｏＰＰ ５，ｎｇ／ｋｇ。；ＺｎＰＰ处理组，腹腔注射抑制剂ＺｎＰＰ ２０ ｍｓ／ｋｇ。移植后第三天检测肝脏移植物肝功 能，免疫组织化学方法检测肝脏移植物ＨＯ一１的表达情况。ＴＵＮＥＬ法检测凋亡变化。以Ｓｕｚｕｋｉ标准评分来反映 肝脏移植物的缺血再灌注损伤程度。结果：①ＣｏＰＰ组ＡＬＴ，ＡＳＴ较对照组和ＺｎＰＰ组明显降低（Ｐ＜０．０１）。②ＨＯ 一１表达：ＣｏＰＰ组明显高于其他组（Ｐ＜０．０５）。③移植物凋亡阳性细胞百分率：ＣｏＰＰ组明显低于对照组和ＺｎＰＰ 组（Ｐ＜０．０５）。④肝脏移植物病理变化：ＣｏＰＰ组和与对照组，ＺｎＰＰ组比较，炎症细胞浸润少，肝细胞损伤轻。肝脏 移植物Ｓｕｚｕｋｉ评分，ＣｏＰＰ组（０．７６±０．５９）明显低于对照组（１．３２±０．７４）与ＺｎＰＰ组（１．８０±０．７０），有显著统计学 差异（Ｐ＜０．０５）。结论：ＨＯ一１对肝脏移植物缺血再灌注损伤具有保护作用，其机制可能与抗炎症与抗凋亡有关。 ［关键词］血红素氧合酶一１；肝脏移植；缺血再灌注损伤 ［中图法分类号］Ｒ６５７．３ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］ １００６—９６７４（２００７）０４—０１９３—０３ ＺＨＡＮＧ Ｈｕａ，ＹＡＮＧ Ｄｉｎｇ—ｈｕａ，ＰＥＮＧ Ｍｉｎ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ＨＯ一１ ｉｎ Ｌｉｖｅｒ ｌｓｃｈｅｍｉａ Ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ Ｉｎｊｕｒｙ —ｈａｏ， （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＨｅｐａｔｏｂｉｌｉａｒｙＳｕｒｇｅｒｙＬｉｖｅｒ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ，ＦｉｒｓｔＨｏｓｐｉｔａｌＡｆｉｌｆｉａｔｅｄｔｏ ＣｕａｎｇｘｉＭｅｄｉｃａｌ Ｕ－ ｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ，Ｇｕａｎｇｘｉ，５３００２１，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｅｃｔｓ ａｎｄ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ＨＯ一１ ｓｙｓｔｅｍ ｉｎ ｉｓｃｈｅｍｉａ ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ． Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｏｒｔｈｏｔｏｐｉｃ ｌｉｖｅｒ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｋａｍａｄａ ｔｗｏ ｃｕｆｆ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｉｎ ３０ ＳＤ ｒａｔｓ．Ｔｈｅｙ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ３ ｇｒｏｕｐｓ：ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ｗｉｔｈｏｕｔ ａｎｙ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ｄｏｎｏｒｓ ｐｒｅｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ＨＯ一１ ｉｎｄｕｃｅｒ ＣｏＰＰ （５ｍ＃ｋｇ，ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｌｙ）２４ ｈ ｂｅｆｏｒｅ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ（Ｃｏｐｐ ｇｒｏｕｐ），ｄｏｎｏｒｓ ｐｒｅｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ＨＯ一１ ｉｎｈｉｂｉｔｅｒ ＺｎＰＰ（２０ ｍｅ，／ｋｇ，ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｌｙ）２４ ｈ ｂｅｆｏｒｅ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ（Ｚｎｐｐ ｇｒｏｕｐ）．Ｉｔｅｍｓ ｗｅｒｅ ｔｅｓｔｅｄ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ：①Ｔｈｅ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｓｅｌｑｌｍ ＡＬＴ，ＡＳＴ ｉｎ ｇｒａｆｔ ３ ｄ ａｆｔｅｒ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ．②Ｔｈｅ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ＨＯ一１ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒａｇｆｔ ３ ｄ ａｆｔｅｒ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｉｍ— ｍａｎｏｈｉｓｔｏｌｏｇｙ．③Ｔｈｅ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎｄｅｘ ｏｆ ｇｒａｆｔｓ ３ ｄ ａｆｔｅｒ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｗａｓ ｅｘａｍｉｎｅｄ ｂｙ ＴＵＮＥＬ ｍｅｔｈｏｄ．④Ｔｈｅ ｐａｔｈｏｌｏｇｉ— ｃａ］ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｉｓｃｈｅｍｉａ ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ ｏｆ ｒａｇｆｔ ｗｅｒｅ ｅｖａｌｕａｔｅｄ ｂｙ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｓｕｚｕｋｉ Ｃｒｉｔｅｒｉａ．Ｒｅｓｕｌｔｓ①Ｔｈｅ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｓｅＦＬＩｍ ＡＬ１’ａｎｄ ＡＳＴ ｉｎ ＣｏＰＰ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒ ｔｗｏ ｒｏｕｐｓ（Ｐ＜０．ｇ０５）．②Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｈ０一Ｉ ｉｎ ＣｏＰＰ ｒｏｕｐ ｇｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｒｇｏｕｐ（Ｐ＜０．０１）．（￣）Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｔｏ ｃｏｎｔｒｏｌ ｒｏｇｕｐ，ｔｈｅ ｉｎｄｅｘ ｏｆ ａｐｏｐ— ｔｏｓｉｓ ｏｆ ｒｇｆｔａｓ ｗａｓ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ ＣｏＰＰ ｒｇｏｕｐ（Ｐ＜０．Ｏ１）．＠Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒ ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ，ＣｏＰＰ ｒｏｇｕｐ ｈａｄ ｆｅｗｅｒ ｎｅｕｔｒｏ— ｐｈｉｌ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｌｏｗｅｒ ｒａｄｅ ｇｏｆ ｌｉｖｅｒ ｃｅｌｌ ｉｎｊｕｒｙ．Ｓｕｚｕｋｉ￣ｓｃｏｒｅｓ ｏｆ ＣｏＰＰ ｒｏｕｐ（０．７６±０．５９）ｗｅｒｇｅ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（１．３２±０．７４）ａｎｄ ｉｎ ＺｎＰＰ ｇｒｏｕｐ（１．８０±０．７０）（Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＨＯ一１ ｈａｓ ａ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｉｎ ｌｉｖｅｒ ｉｓｃｈｅｍｉａ ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ，ｔｈｉｓ ｅｆｅｃｔ ｍａｙ ｂｅ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｔｈｒｏｕｇｈ ｉｔｓ ａｎｔｉ—ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ａｎｄ ａｎｔｉ— ａｐｏｐｔｏｔｉｃ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｈｅｍｅ Ｏｘｙｇｅｎａｓｅ～１；Ｌｉｖｅｒ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ；Ｉｓｃｈｅｍｉａ Ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ Ｉｎｊｕｒｙ 缺血再灌注损伤（ｉｓｃｈｅｍｌａ ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｙ， 斥反应¨ｊ，同时限制了对边缘器官的应用。血红素 ＩＲＩ）是肝脏移植过程中严重的应激事件，早期移植 物无功能状态会导致更高的急性排斥反应与慢性排 ［作者简介］ 张 华（１９８０一），男，湖北黄冈人，硕士研究 生，主要研究方向：肝脏移植的临床研究。 氧化酶（Ｈｅｍｅ Ｏｘｙｇｅｎａｓｅ，ＨＯ）是催化血红素转化为 胆绿素的限速酶，同时产生一氧化碳和游离铁离 子 。ＨＯ有三种同工酶ＨＯ一１，ＨＯ一２，ＨＯ一３。 ＨＯ一１是其中诱导型的同工酶。在各种应激状态 下（如缺血、高热、低氧、高氧等）ＨＯ一１表达明显升 高，发挥强大的细胞保护作用 Ｊ。近年来国际上应 用ＨＯ一１诱导剂（ＣｏＰＰ），抑制剂（ＺｎＰＰ）调节ＨＯ ［通讯作者］ 杨定华，肝胆移植外科专家，博士生导师。 ［基金项目］ 国家自然科学基金３０４６０１３０。 维普资讯 http://www.cqvip.com ・１９４・ 郧阳医学院学报（Ｊ ＹＭＣ）２００７年８月２６（４）：１９３ ，—１的表达，发现ＨＯ一１表达上调可减轻缺血再灌 所有实验数据结果采用ＳＰＳＳ １ １．５统计软件进 注损伤，有延长器官保存时问和改善器官功能之作 用 ，国内未见类似报道。本实验通过建立大鼠原 位肝移植模型，分别应用ＨＯ一１诱导剂（ＣｏＰＰ），抑 制剂（ＺｎＰＰ）在术前处理供体，结合ＴＵＮＥＬ法和免 疫组织化学检测方法，以探讨ＨＯ一１在肝脏缺血再 行秩和检验，以均数±标准差表示，Ｐ＜０．０５为有统 计学差异。 ２结果 ２．１肝脏移植术后３ ｄ移植物肝功能 灌注损伤中的作用。 １材料和方法 １．１ 材料 ＳＤ大鼠（广西医科大学实验动物中心），ＣｏＰＰ （Ｓｉｇｍａ公司），ＺｎＰＰ（Ｓｉｇｍａ公司），蛋白质Ｍａｒｋｅｒ （Ｔｉａｎｇｅｎ公司），兔抗鼠ＨＯ一１多克隆抗体（ｓｔｒｅｓｓ。 ｇｅｎ公司），ＵｈｒａＳｅｎｓｉｔｉｖｅ Ｓ—Ｐ超敏免疫组化试剂盒 （迈新生物技术开发公司），ＤＡＢ显色试剂盒（迈新 生物技术开发公司），Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ试剂盒（Ａｍｅｒ。 ｓｈａｍ公司） １．２方法 １．２．１ 实验动物分组、肝移植模型建立：健康、雄 性、清洁级雄性ｓＤ大鼠３０只，体重２２０～２５０ ｇ，随 机分成３组，每组供体，受体各５只，采用Ｋａｍａｄａ “二袖套法”建立原位大鼠肝脏移植模型＿５ Ｊ。对照 组：无任何处理。ＣｏＰＰ组：将ＣｏＰＰ溶于０．９％ ＮａＣ１，浓度为１ ｍｇ／ｍｌ（ＰＨ ７．４），供肝收获前２４ ｈ， 供体腹腔注射５ ｍ ｋｇ。ＺｎＰＰ组：将ＺｎＰＰ溶于０． ９％ＮａＣ１，浓度为４ ｍｇ／ｍｌ（ＰＨ ７．４），供肝收获前２４ ｈ，供体腹腔注射２０ ｍｇ／ｋｇ。３ ｄ后检测移植物肝功 能，谷丙转氨酶（Ａ ）、谷草转氨酶（ＡＳＴ）。 １．２．２ 免疫组化法检测肝脏移植物ＨＯ一１的表 达：采用ｓＰ免疫组织化学方法，兔抗鼠ＨＯ一１多克 隆抗体工作浓度为１：４００，以胞浆出现棕黄色颗粒 为阳性表达；ＴＵＮＥＬ法检测肝脏移植物细胞的凋亡 变化，图象分析系统计算凋亡细胞百分率及阳性面 积和灰度。 １．２．３ 移植后肝脏移植物常规病理学检查：４％甲 醛固定２４ ｈ的肝组织，石蜡包埋，切片，常规ＨＥ染 色，镜下观察，根据国际上通用的Ｓｕｚｕｋｉ标准评分 来反映原位肝移植后肝脏缺血再灌注损伤程度。 Ｓｕｚｕｋｉ评分标准根据肝窦状隙的水肿淤血阻塞、肝 细胞的坏死以及气球样变的程度分为五级，没有肝 窦状隙的水肿淤血阻塞、肝细胞的坏死以及气球样 变的评分为０分，有严重的肝窦状隙的水肿淤血阻 塞、肝细胞气球样变以及肝小叶坏死超过６０％的评 分为４分，损伤介于两者之问的评分为ｌ～３分 。 １．３数据处理 移植后３ ｄ，测定各组ＡＬＴ、ＡＳＴ的水平，与对照 组ＡＬｌＴ（３４６．４±４５．１），ＡＳＴ（４７４．４±８９．７）比较， ＣｏＰＰ组ＡＬＴ（６５．３±２７．８），ＡＳＴ（１８７．２±４３．２）明 显降低（Ｐ＜０．０１）；而ＺｎＰＰ组Ａ （５７７．８±７５．３）， ＡＳＴ（１ ０８４．４±１２７．９）则较高（Ｐ＜０．Ｏ１），有显著性 差异。 ２．２肝脏移植物病理学检查 ＣｏＰＰ组Ｓｕｚｕｋｉ评分（０．７６±０．５９）较对照组 （１．３２±０．７４）低（Ｐ＜０．０５）。肝脏结构基本正常， 门静脉周围少许肝细胞空泡变性，坏死少见，炎性细 胞浸润少。而ＺｎＰＰ组评分（１．８０±０．７０）较对照组 高（Ｐ＜０．０５），可见片状肝细胞坏死，汇管区见大量 的炎性细胞。 ２．３肝脏移植术后３ ｄ移植物ＨＯ一１表达结果 移植后３ ｄ，移植物ＨＯ一１蛋白表达情况见表１。 ＨＯ一１表达的阳性面积和灰度与对照组相比，ＣｏＰＰ组 的ＨＯ一１表达明显升高（Ｐ＜０．０１），ＺｎＰＰ组的ＨＯ一１ 表达量明显降低（Ｐ＜０．ｏ５），见图１～３。 表１移植后３ ｄ移植物ＨＯ一１蛋白表达 ｉｓ） 注： ＣｏＰＰ组与Ｃｏｎｔｒｏｌ组相比，‘Ｐ＜０．０１； ＺｎＰＰ组与Ｃｏｎｔｒｏｌ组相比， Ｐ＜０．０１ ２．４移植物细胞凋亡检查 通过计算阳性细胞百分率反映各组细胞凋亡情 况。凋亡的靶细胞主要是肝细胞和内皮细胞。与对 照组（１２．５±２．４）％相比，ＣｏＰＰ组的肝细胞和内皮 细胞凋亡明显减少（３．２±０．８）％，ＺｎＰＰ组细胞凋亡 增多（２５．８±３．１）％，见图４～６。 ３讨论 缺血再灌注损伤在临床中是十分常见的病理过 程。Ｊａｅｓｃｈｋｅ等 发现，在缺血再灌注后，老鼠肝脏 的损伤分为两个明显的阶段。第一个阶段（灌注后 ＜２ ｈ）以Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞诱导的氧化应激为特征。 Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞产生并释放活化氧自由基，导致急性肝 细胞损伤。第二阶段以中性粒细胞介导的炎症损伤 为特征，在第一阶段活化的Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞及损伤的肝 维普资讯 http://www.cqvip.com 张华等．血红索氧合酶一１对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用 ・１９５・ 细胞，亦可释放多种促炎因子，聚集的中性粒细胞释 放大量的氧自由基及蛋白酶，致使细胞溶解、凋亡。 胞调亡减少，缺血再灌注减轻。一氧化碳的抗凋亡 机制可能有多个途径，如通过Ｐ３８ ＭＡＰＫ途径，或通 血红素氧化酶（ＨＯ）是催化血红素转化为胆绿素的 限速酶，因其强大的细胞保护功能，自发现之日起， 引起了人们广泛的关注。近来发现ＨＯ一１表达上 调可减轻缺血再灌注损伤，延长器官保存时间和改 过调节凋亡基因（如Ｂａｘ，Ｐ５３等）与抗凋亡基因（如 Ｂｃｌ一２等）的表达ｍ 而发挥抗凋亡作用 （文中图１—６见封二） 巢喜 善器官功能…。但是作用机制争论甚大。 本实验分别应用ＨＯ一１诱导剂（ＣｏＰＰ）、抑制 剂（ＺｎＰＰ）在术前处理供体，调节ＨＯ一１的表达，术 后三天观察肝脏移植物缺血再灌注损伤情况。实验 发现，应用Ｈ０—１诱导剂（ＣｏＰＰ）、抑制剂（ＺｎＰＰ）调 节ＨＯ一１的表达是成功的。同时发现，ＨＯ一１表达 上调时，肝脏移植物的肝细胞接近正常形态，肝细胞 和内皮细胞凋亡减少，炎性细胞浸润明显减少。当ＨＯ一１表达抑制时，肝脏移植物细胞凋亡增多、肝 细胞损伤加重、炎症细胞减多、肝功能趋于恶化。提 示ＨＯ一１系统在肝脏缺血再灌注损伤的保护作用 可能与抗炎症及抗凋亡功能有关。 ＨＯ一１在催化血红素代谢时，生成胆绿素、一 氧化碳和游离铁离子。血红素是一种潜在的有害物质，不仅直接损伤细胞膜的脂质双分子层，细胞骨 架，代谢酶和ＤＮＡ，而且通过产生氧自由基，使中性 粒细胞聚集，引发炎症反应造成细胞损伤 引，同时 消耗３个氧分子和７个电子 ］。ＨＯ一１在血红素 代谢过程本身可发挥抗氧化作用。同时ＨＯ一１的 产物胆红素，Ｆｅ 也有消耗氧分子的功能。ＨＯ一１ 在肝脏的缺血再灌注中的抗炎症与抗凋亡作用可能 与其下游产物胆绿素和一氧化碳有关。 以前一直认为胆绿素和一氧化碳是有害无益的 废物。胆绿素结合到细胞膜上，导致细胞溶解，而一 氧化碳被认为是剧毒气体，它既妨碍血红蛋白与氧 气的结合，也妨碍血红蛋白与氧气的解离，造成组织 缺氧。然而随着研究的深入，发现胆绿素和一氧化 碳均有强大的功能。ＨＯ一１在肝脏的缺血再灌注 中的抗炎症与抗凋亡作用主要与二者有关。胆绿素 通过抑制补体以及调节Ｐ一选择素与Ｅ一选择素来 抑制中性粒细胞的浸润 】，从而发挥抗炎症作用。 而低浓度的一氧化碳（ＣＯＨｂ／Ｈｂ＜２０％）通过下调 促炎因子（如ＴＮＦ— 、ＩＬ一１ ｐ、ＩＬ一６、ＣＯＸ一２、ｉＮ一 ０ｓ等）和黏附分子（如ＩＣＡＭ等）的表达，减少炎症 细胞的浸润，发挥抗炎症作用¨ 。在肝脏缺血再灌 注损伤过程中细胞死亡有坏死与凋亡两种形式，尽 管凋亡在ＩＲＩ的地位还存在争议，但在器官移植模 型中发现，通过胆绿素或一氧化碳的干预，移植物细 矽 ｘ Ｍ ［１］ Ｆａｒｍｅｒ ＤＧ，Ａｍｅｒｓｉ Ｆ，Ｋｕｐｉｅｃ～Ｗｅｇｌｉｎｓｋｉ ＪＷ，ｅｔ ａｌ・ Ｌｕ玳ｍ ｕｓ 坞ｃｈｅｎｄ。ａｎｄ ｒｅｐｅ咖 ｏｎ ｎｊ“ｒｙ “ｍ。 ［２］ ｌ．ｒｉｅｖｅ ｒ［Ｊ］ ．Ｔｈｕｎ。Ｒｒ ｉ ’Ｒ１．４１：１１。０６。二 。。。 。ｉ。 ０ｆ ｈ ｔ。ｂｉｌｉｍｂｉ ｂｖ ｒｎｊ ｍ。。 ｈ ｍｅ ０ｘｙｇｅ ｛ｌｓｅ …．Ｐｒｏｃ Ｎａｉｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，１９６８，６１（２）：７４８—７５５． ［３］ Ｏｔｔ ｒｂ ｉ ＬＥ，Ｃｈ。ｉ ＡＭ．Ｈ 。 ｙｇ ｓ ： 。１。ｒｓ ｏｆ ｄｅ ｌｅｎｓｅ ａｇａｉｎｓｔ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｓｔｒｅｓｓ［Ｊ］．Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｌｕｎｇ Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｐｈｙｓｉｏ！，２０００，２７９（６）：１ ０２９—１ ０３７・ ［４］ Ｋａｔｏｒｉ Ｍ，Ｂｕｅｌｏｗ Ｒ，Ｋｅ Ｂ，ｅｔ ａ１．Ｈ。 ｏ ｙｇｅ衄 。一 ｏｖｅｒｅｘｐ ｒｅ 吼ｏｎ＿ｐ ？坞ｍ ｈｉ？ｎｓ ：。？ｃｏ ：。坞ｃｈｅｍｌ ‘ 。 Ｔ 。Ｄ ｔａｔｉｏ ｎ２ ００２，７３（２）：２８‘，７ Ｌ－２９２．『５１ Ｋａｍａｄ Ｎ，Ｃａｌｎｅ ＲＹ．Ａ ｓｕｒｇｉｃａｌ ｅ ｐｅｉ－／ｅ ｃｅ ｗｉｔｌ ｅ ｈｕｎｄｒｅｄ ｔｈｉｒｔｙ ｌｉｖｅｒ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｔ［Ｊ］．Ｓｕｒｇｅｒｙ， １９８３，９３（１）：６４—６９． ［６］ Ｓｕｚｕｋｉ Ｓ，Ｔｏｌｅｄ。一Ｐｅｒｃｙｒａ ＬＨ，Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ ＦＪ，ｅｔ ａ１． ｅｕ ｒｏｐｈｉ ：ｒｄｉｌｔｒａｔｉｏ ｎａｓ ａｎ．．．￣ｍｐｏｔｒ ａ：¨ 协¨？ｎ ：坞 ：； ：ｒｅ ｏｎ２ ｕｒｙ¨ ｎ ｓｐｈｍ砒ｍ 『７］ Ｊａｅｓｃｈｋ Ｈ＿Ｒｅａｃｔｉ 。 ｖ ｄ ｉｓｃｈ ｉａ／ｒｅｐｅｒｆｔ 。ｉ ０Ｊｌ ｉｎｊ ｒｙ。ｆ ｔｈｅ ｌｉｖ ［Ｊ］．Ｃｈｅｍ Ｂｉｏｌ Ｉｎｔｅｒａｃｔ，１９９１，７９ （２）：１１５—１３６． ［８］ Ｖｅｒｍａ Ａ，Ｈｉｒｓｃｈ ＤＪ，Ｇｌａｔｔ ＣＥ，ｅｔ ａｌ・Ｃａｒｂｏｎ ｍｏｎｏｘｉｄｅ： ａ ｐｕｔａ ｉ ｅ ｎｅｕ ｌａ ｍｅｓ。ｅｎｇｅｒ［Ｊ］・Ｓｃｉｅｎｃｅ， ９９ ，２ ９（ ［９］ ｕ￣ ｏ） ：ｏｏｌ－Ｍｉ 。ＭＤ． 。 。。 ｄ 。。 ｇｅ：ｒ ‘ｈｇａｓ 。 。［ ｖｇ 船 。ｙ。ｔ ｍ： ｒｅｇｕｌ ｔ。 ０ｆ ．Ａ Ｒｅ Ｐｈ 册 。ｌ Ｔｏｘｉ一 ｏ１．１９９７．３７：５１７—５５４． ［１０］ Ｖａｃｈｈａｒａｊｍｌｉ ＴＪ，Ｗｏｒｋ Ｊ，Ｉｓｓｅｋｕｔｚ ＡＣ，ｅｔ ａ１．Ｈｅｍｅ ＯＸ ｙｇｅｎａｓｅ ｍｏｄｕｌａｔｅｓ ｓｅｌｅｅｔｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｒｅ一 ｇｉｏｎａｌ ｖａｓｅｕｌａｒ ｂｅｄｓ［Ｊ］・Ａｍ Ｊ ＰＩ ｙｓｉｏｌ Ｈｅａｒｔ Ｃｉｒｃ Ｐｈｙｓ一 一 一 ｊ ，２０００，２ （ ）： ６ 一 ６ ・ ［¨ ｅｔｏ ．Ｎ．ａｋ：Ａ Ｋｉｍ ｉｚｕ．ｋａ Ｋ ａ１．Ｐ ｒｏｔ．ｅｃｔｉ．ｏｎ：ｏｆ ｗｉｔｈ ａｒｂ。 。 ０ｘｉｄｅ『Ｊ］．Ａ Ｊ Ｐｈｙｓｉ。１ Ｒｅｎａｌ Ｐｈｙｓｉ。１， ２００４，２８７（５）：９７９—９８９． ［１２］ Ｎａｋａｏ Ａ，Ｃｈｏｉ ＡＭ，Ｍｕｒａｓｅ Ｎ．Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｃａｒ一 ｂｏｎ ｍｏｎｏｘｉｄｅ ｉｎ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ［Ｊ］・Ｊ Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｍｅｄ， ２００６， ０（ ）：６５０—６ ‘ ［收稿日期］２００ 一０６～ ０ 维普资讯 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