免疫磁珠两步法体外分离纯化小鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞的应用研究

T细胞的应用研究

黄克力;王巍;谢波;朱平;卢聪;朱小兰;麦明杰;沈二霞;吴若彬;刘怀普;黄晶晶

【期刊名称】《器官移植》 【年(卷),期】2011(2)6

【摘 要】目的 研究免疫磁珠两步法体外分离纯化小鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的效果.方法 将C57BL/6(H-2b)小鼠脾脏剪碎、过滤、去除红细胞后离心洗涤,获得小鼠脾细胞悬液.用Ficoll法分离获得单个核细胞后,通过免疫磁珠阴性加阳性选择两步法分离获得CD4+CD25+Treg和

CD4+CD25-Treg.用流式细胞仪检测所获得CD4+CD25+Treg的纯度,并比较纯化分离前后脾脏CD4+CD25+Treg的比例,用台盼蓝染色后计算

CD4+CD25+Treg的细胞存活率,并对分离后的细胞表型进行鉴定.结果 免疫磁珠阴性加阳性选择两步法纯化分离后CD4+CD25+Treg的纯度为(88.7±2.9)%,分离前CD4+CD25+Treg的平均比例为11.6 %,纯化分离后CD4+CD25+Treg的平均比例为93.7 %.细胞存活率为(93.7±4.1)%.与CD4+CD25-Treg相

比,CD4+CD25+Treg的CD44表达略有增加(P>0.05),CD45RB的表达明显下降(P＜0.05),CTLA- 4和Foxp3的表达明显增加(均为P＜0.05).结论 使用免疫磁珠两步法分离纯化,能避免激惹CD4分子,可获得高纯度且具有天然CD4+CD25+Treg表型的细胞. 【总页数】4页(P3-357)

【作 者】黄克力;王巍;谢波;朱平;卢聪;朱小兰;麦明杰;沈二霞;吴若彬;刘怀普;黄晶晶

【作者单位】510080,广东省心血管病研究所心外科广东省人民医院广东省医学科学院;510080,广东省心血管病研究所心外科广东省人民医院广东省医学科学院;510080,广东省心血管病研究所心外科广东省人民医院广东省医学科学院;510080,广东省心血管病研究所心外科广东省人民医院广东省医学科学院;510080,广东省心血管病研究所心外科广东省人民医院广东省医学科学院;510080,广东省心血管病研究所心外科广东省人民医院广东省医学科学院;510080,广东省心血管病研究所心外科广东省人民医院广东省医学科学院;中山大学免疫学教研室;510080,广东省心血管病研究所心外科广东省人民医院广东省医学科学院;510080,广东省心血管病研究所心外科广东省人民医院广东省医学科学院;510080,广东省心血管病研究所心外科广东省人民医院广东省医学科学院 【正文语种】中 文 【相关文献】

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