中国美容医学２０１０年１月第１９卷第１期Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＡｅｓｔｈｅｔｉｃ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．Ｊａｎ．２０１０．Ｖｏ１．１９．Ｎｏ．１ ６５ ・论著・ 骨髓间充质干细胞在糖尿病模型创面中向表皮细胞分化的初步研究 钟晓红，王明刚，赵李平，高新宇 （安徽医科大学附属省立医院整形外科安徽合肥２ ３０００１） ［摘要］目的：探讨糖尿病皮肤创面微环境中的骨髓间充质干细胞分化为表皮细胞的可能性。方法：从大鼠骨髓中分离纯化骨髓 间充质干细胞。选取第３—４代细胞，应用５一溴脱氧尿嘧啶（５－ＢｒｄＵ）标记技术进行细胞标记；同时采用一次性腹腔内注射链脲 佐菌素制作糖尿病大鼠模型。２周后，在大鼠背部人工造成圆形创面，将已标记的骨髓间充质干细胞以注射方式回植入糖尿病 大鼠创面组织周围，分别于注射后２、３周取材，常规石蜡包埋、连续切片，行ＢｒｄＵ和角蛋白免疫组织化学染色。结果：ＢｒｄＵ阳性 细胞出现在表皮、真皮及皮下组织各层，连续切片表皮层中部分阳性细胞同时也表达角蛋白。结论：在糖尿病渍疡愈合过程中， 骨髓问充质干细胞具有向表皮细胞分化的潜能。 ［关键词］骨髓间充质干细胞；糖尿病；创面愈合；表皮细胞；细胞分化 ［中图分类号］Ｑ８１ ３．１１ Ｑ２５４ ［文献标识码］Ａ［文章编号］１ ００８—６４ ５５（２０１ ０）０１—００６５－０３ Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｉｎｔｏ ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｃｅｌｌｓ Ｉｎ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｗｏｕｎｄ ＺＨＯＮＧ Ｘｉａｏ—ｈｏｎｇ，ＷＡＮＧ Ｍｉｎｇ－ｇａｎｇ，ＺＨＡＯ Ｌｉ—ｐｉｎｇ，ＧＡＯ Ｘｉｎ－ｙｕ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｌａｓｔｉｃ Ｓｕｒｇｅｒｙ，ｔｈｅ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ａｎｈｕｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈｅｆｅｉ ２３０００１，Ａｎｈｕｉ，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｆｅａｓｉｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ（ＭＳＣｓ）ｉｎｔｏ ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ ｏｆ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｗｏｕｎｄ． Ｍｅｔｈｏｄｓ ＭＳＣｓ ｗｅｒｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒＯｍ ｔｈｅ ｍｙｅｌｏｉｄ ｔｉｓｓｕｅ ｏｆ ｔｈｅ ｒａｔｓ．ｐｕｒｉｆｉｅｄ ａｎｄ ｃｕｌｔｕｒｅｄ．Ｔｈｉｒｄ—ｏｒ ｆｏｕｒｔｈ—ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ＭＳＣｓ ｗｅｒｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ａｎｄ ｆａｂｅｌｌｅｄ ｗｉｔｈ ５一 ｂｒｏｍｏｄｅｏｘｙｕｒｉｄｉｎｅ（５－ＢｒｄＵ）．Ｔｈｅ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｉｎｊｅｃｔｅｄ ｉｎｆｒａｐｅ小ｏｎｅａｌｌｙ ｗｉｔｈ ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｃｉｎ（ＳＴＺ）ｏｎｃｅ ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｄｉａｂｅｔｅｓ ｒａｔ ｍｏｄｅ１．Ａｆｔｅｒ ２ ｗｅｅｋｓ．ａ ｒｏｕｎｄ ｓｋｉｎ ｗａｓ ｅｘｃｉｓｅｄ ｏｎ ａｌｌ ｄｏｒｓａＩ ｂａｃｋ ｏｆ ｒａｔｓ ＢｒｄＵ—ｌａｂｅｌｌｅｄ ＭＳＣｓ ｗｅｒｅ．ｂｙ ｍｅａｎｓ ｏｆ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ．ｅｎｇｒａｆｔｅｄ ｔｏ ｓｋｉｎ ｏｆ ｔｈｅ ｒａｔｓ．Ｔｈｅ ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ ｗｅｒｅ ｈａｒｖｅｓｔｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｗｏｕｎｄ ｔｉｓｓｕｅｓ ｆｏｒ ｐａｒａｆｔｉｎ ｅｍｂｅｄｄｉｎｇ ａｎｄ ｓｅｒｉａｌ ｓｅｃｔｉｏｎ ａｔ ｔｈｅ ２ｎｄ ａｎｄ ３ｒｄ ｗｅｅｋ ａｆｔｅｒ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ａｎｄ ｗｅｒｅ ｌｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｌｙ ｓｔａｉｎｅｄ ｂｙ ｅｉｔｈｅｒ ＢｒｄＵ ｏｒ ｋｅｒａｔｉｎ．Ｒｅｓｕｌｔｓ ＢｒｄＵ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｅｌｌｓ ａｇｇｒｅｇａｔｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ，ｄｅｒｍｉｓ ａｎｄ ｈｙｐｏｄｅｒｍｉａ．Ｉｎ ｓｅｒｉａｌ ｓｅｃｔｉｏｎ，ｓｏｍｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｅｌｌｓ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｋｅｒａｔｉｎ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ ｉｎ ｔｈｅ ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ Ｃｏｎｃ Ｊ ｕｓｉｏｎ Ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｃｏｕｒｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｗｏｕｎｄ ｈｅａｌｉｎｇ．ＭＳＣｓ ｈａｖｅ ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｔｉａＩ ｆｏｒ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｎｇ ｉｎｔｏ ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｃｅｌｌｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｍａｒｒｏｗ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ；ｄｉａｂｅｔｅｓ ｍｅｌｌｉｔｕｓ；ｗｏｕｎｄ ｒｅｐａｉｒ；ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｃｅｉｌｓ；ｃｅｌＩ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ 创面愈合是一个由细胞、细胞外基质及细胞因子等多因 为１３４￣１６１ｇ。购自安徽医科大学附属省立医院实验动物中心。 素共同参与并高度协调、相互的复杂的生物学过程，其 １．２主要试剂和仪器：胎牛血清（ＦＣＳ）（Ｈｙｃｌｏｎｅ公司）： 中任何一个环节协调不良或功能障碍均可导致创面长期难 Ｌ－ＤＭＥＭ培养基（Ｈｙｃｌｏｎｅ公司）；胰蛋白酶（Ｓｉｇｍａ公司）；５一 以愈合；而慢性难愈合创面发生机制更加复杂，至今尚未完 溴脱氧尿嘧啶（５一ＢｒｄＵ）（Ｓｉｇｍａ公司）；兔抗Ｂｒｄｕ单克隆抗体 全阐明。在临床实践中，糖尿病溃疡的治疗是慢性创面愈合 及ｓＰ系列免疫组化染色试剂盒（北京博奥森生物技术有限 中最为棘手的问题。近年来，随着组织工程学研究的不断深 公司）；小鼠抗广谱细胞角蛋白单克隆抗体及即用型ＳＡＢＣ免 入，干细胞受到前所未有的重视，特别是来源于骨髓的问充 疫组化染色试剂盒（武汉博士德生物工程有限公司）；二氨基 质干细胞；由于其具有向各种组织细胞分化的巨大潜能 ］，且 联苯胺（ＤＡＢ）显色剂（北京中杉生物技术有限公司）；ＢＢ１６型 免疫原性小，所以骨髓问充质干细胞的应用为糖尿病溃疡的 ｃ０ 恒温、恒湿培养箱及ＨＦ—ｓａｆｅ一１２００型超净工作台（德国 愈合提供可能。本实验以大鼠为研究对象，将骨髓问充质干 Ｈｅｒａｅｕｓ ａｎｄ ＬＩＳＨＥＮ公司）；ＣＫＸ４１型倒置相差显微镜（日本 细胞植入糖尿病大鼠创面组织周围，观察其向皮肤表皮细胞 Ｏｌｙｍｐｕｓ公司）；血糖仪和血糖试纸（欧姆龙公司）。 分化的潜能。 １．３骨髓问充质干细胞的分离培养、纯化和扩增：将大鼠腹 腔麻醉后引颈处死，７５％酒精浸泡ｉ０ｍｉｎ；无菌条件下取出股 １材料和方法 骨和胫骨，并用纱布将骨表面肌肉磨净，离体的骨放入培养 １．１实验动物：健康ｓＤ雄性大鼠８只，年龄４～６周，体质量 皿中，用高压灭菌过的磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）冲洗，再移入另一 基金项目：安徽省第一批重点科研项目（０７０２ １０２ １）；安徽高校省级自然科学研究计划项目（ＫＪ２００８Ｂ２９７）；安徽省卫生厅科研基金项目（０９Ａ０２８） 通讯作者：王明刚，教授，主任医师，硕士生导师，安徽医科大学附属省立医院整形外科；Ｅ－ｍａｉｌ：ｍｇｗａｎｇｌ１０５＠ｓｉｎａ．ＣＯｉｌ１ 中国美容医学２０１０年１月第１９卷第１期Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｅｓｔｈｅｔｉｃ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｊａｎ．２０１０．Ｖｏ１．１９．Ｎｏ．１ ６７ 细胞因子有关［１３ １７］；Ｂａｄｉａｖａｓ等 已成功证明在急性皮肤创 ［４］Ｐｉｔｔｅｎｇｅｒ Ｍ，Ｖａｎｇｕｒｉ Ｐ，Ｓｉｍｏｎｅｔｔｉ Ｄ，ｅｔ ａ１．Ａｄｕｌｔ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ：ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｆｏｒ ｍｕｓｃｌｅ ａｎｄ ｔｅｎｄｏｎ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｕｓｅ ｉｎ ｇｅｎｅ 面微环境下骨髓问充质于细胞具有分化为表皮细胞的潜能； 这也为其在慢性创面中向表皮细胞分化提供一种设想依据。 细胞角蛋白是表皮或上皮组织较特异表达的一类蛋白， 通常情况下，骨髓问充质干细胞角蛋白呈阴性表达。本实验 应用５－ＢｒｄＵ标记的异体骨髓间充质干细胞输注入糖尿病大 鼠创面组织周围，免疫组织化学染色检测表皮层中已标记的 细胞是否表达角蛋白，从而推测骨髓问充质干细胞在糖尿病 ｔｈｅｒａｐｙ［Ｊ］．Ｊ Ｍｕｓｃｕｌｏｓｋｅｌｅｔ Ｎｅｕｒｏｎａｌ ｎｔＩｅｍｃｔ，２００２，２（４）：３０９－３２０． ［５］Ｏｒｌｉｃ Ｄ，Ｋａｊｓｔｕｒａ Ｊ，Ｃｈｉｍｅｎｔｉ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｃｅｌｌｓ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅ ｉｎｆａｒｃｔｅｄ ｍｙｏｃａｒｄｉｕｍ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，２００１，４１０（６８２９）：７０１—７０５． ［６］Ｙｏｏｎ ＹＳ，Ｌｅｅ Ｎ，Ｓｃａｄｏｖａ Ｈ．Ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｂｏｎｅ—ｍａｒｒｏｗ—ｄｅｒｉｖｅｄ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｌ Ｃｅｌｌ，２００５，９７（４）：２５３—２６３． 【７］Ｆｅｒｒａｒｉ Ｇ，Ｃｕｓｅｌｌａ－Ｄｅ Ａｎｇｅｌｉｓ Ｇ，Ｃｏｌｅｔｔａ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｍｕｓｃｌｅ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｂｙ ｂｏｎｅ ｍａ￣ｏｗ—ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｙｏｇｅｎｉｃ ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒｓ［Ｊ］＿ 创面中是否具有向表皮细胞分化的潜能。糖尿病大鼠模型的 制作是采用一次性向大鼠腹腔内注射链脲佐菌素，注射４８ｈ 后，连续三次检测大鼠血糖值均明显高于正常值，符合糖尿 病模型的诊断标准。免疫组织化学染色结果显示新生表皮层 中含有较多的ＢｒｄＵ染色阳性细胞，而且部分阳性细胞同时 表达角蛋白：最终的实验结果提示：在糖尿病溃疡愈合过程 中，骨髓间充质干细胞具有向表皮细胞分化的潜能。 目前，骨髓问充质干细胞分化为多种类型细胞的分子机 制和分化能力尚未完全阐明，这可能是其应用研究的主 要因素。国外研究结果证实了干细胞是存在于高度受的 被称为“壁龛”的微环境中［１９－２ｏ］；但壁龛的组织成分相当复杂， 各种不同的组织细胞所处的微环境不同，其中最主要的就是 各种因子的不同；而且多数学者也一致认为，骨髓问充质干 细胞分化为何种细胞也与其所处的微环境密切相关，这是骨 髓间充质干细胞向其他组织细胞分化的主要原因之一。因 此，处于受损皮肤的微环境下，骨髓间充质干细胞可能具有 向皮肤组织细胞转化的潜能。本实验采用人工制作糖尿病溃 疡微环境来诱导骨髓间充质干细胞在慢性创面中向表皮细 胞转化，实验结果证实了该细胞具有分化为表皮细胞的能 力，促进了糖尿病创面的愈合；但是，慢性创面微环境中的骨 髓问充质干细胞转化为皮肤组织细胞的分化机制与分化能 力是否和在急性刨面微环境中有所不同，以及转化的表皮细 胞是否具有正常的生理功能等这些问题尚没有相关文献报 道；新生的真皮层中分布较多的皮肤附属器，是由骨髓问充 质干细胞分化而来还是愈合中自身形成的，还需要进一步研 究证实。 总之，在糖尿病溃疡愈合过程中，骨髓问充质干细胞分 化为表皮细胞已得到初步证实，可以作为治疗该病的一种种子 细胞，为今后临床上治疗糖尿病创面提供一种有效的手段。 ［参考文献］ ［１］Ｊｉａｎｇ Ｙ，Ｊａｈａｇｉｒｄａ Ｂ Ｎ，Ｒｅｉｎｈａｒｄｔ ＲＬ，ｅｔ ａ１．Ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｃｙ ｏｆ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｄｅｒｉｖｅｄ ｒｆｏｍ ａｄｕｌｔ ｍａｒｒｏｗ［Ｊ】．Ｎａｍｒｅ，２００２， ４１８（６８９３）：４１—４９． ［２］梅福荣．０．３％戊巴比妥钠用于大鼠麻醉的方法［Ｊ］．实验动物科学与 管理，２００３，２０（３）：４４—４５． ［３］Ｆａｔｈｋｅ Ｃ，Ｗｉｌｓｏｎ Ｌ，Ｈｕｔｔｅｒ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ—ｄｅｒｉｖｅｄ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ｓｋｉｎ：ｃｏｌｌａｇｅｎ ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｗｏｕｎｄ ｒｅｐａｉｒ 【Ｊ］．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ，２００４，２２（５）：８１２—８２２． Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９８，２７９（５３５６）：１５２８一ｌ５３０． ［８］Ｄｅ Ｂａｒｉ Ｃ，Ｐｉｔｚａｌｉｓ Ｃ，Ｄｅｌｌ＇Ａｃｃｉｏ Ｆ．Ｒｅｐａｒａｔｉｖｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ：ｆｒｏｍ ｔｉｓｓｕｅ ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ｔｏ ｊｏｉｎｔ ｓｕｒｆａｃｅ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ［Ｊ］ Ｒｅｇｅｎ Ｍｅｄ，２００６，１（１）： ５９—６９． ［９］Ｌｅｅ ＫＤ，Ｋｕｏ ＴＫ，Ｗｈａｎｇ－Ｐｅｎｇ Ｊ，ｅｔ ａｌＪ Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｈｅｐａｔｉｃ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ［Ｊ］＿Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ， ２００４，４０（６）：１２７５—１２８４． ［１０］Ｏｓｗａｌｄ Ｊ，Ｂｏｘｂｅｒｇｅｒ Ｓ，Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ Ｂ，ｅｔ ａ１．Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｃａｎ ｂｅ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ ｉｎｔｏ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ『Ｊ１．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ， ２００４，２２（３）：３７７—３８４． 【１ １］Ｗｏｏｄｂｕｒｙ Ｄ，Ｓｃｈｗａｒｚ ＥＪ，Ｐｒｏｃｋｏｐ ＤＪ，ｅｔ ａ１．Ａｄｕｌｔ ｒａｔ ａｎｄ ｈｕｍａｎ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅ ｉｎｔｏ ｎｅｕｒｏｎｓ［Ｊ】．Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ Ｒｅｓ，２０００，６１（４）：３６４—３７０． ［１２】黄莉明，张娇，章庆国．５一ＢｒｄＵ标记的骨髓间充质干细胞对大鼠创 面愈合的作用研究［Ｊ】．中国美容医学，２００８，１７（４）：５２７—５３０． ［１３］Ｈａｙｎｅｓｗｏｒｔｈ ＳＥ，Ｂａｂｅｒ ＭＡ，Ｃａｐｌａｎ ＡＩ．Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｂｙ ｈｕｍａｎ ｍａｒｒｏｗ—ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ： ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ ａｎｄ ＩＬ广１ ａｌｐｈａ［Ｊ］．Ｊ Ｃｅｌｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ，１９９６， １６６（３）：５８５—５９２． ［１４］Ｍａｊｕｍｄａｒ ＭＫ，Ｔｈｉｅｄｅ ＭＡ，Ｍｏｓｃａ ＪＤ，ｅｔ ａ１．Ｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｃｕｌｔｕｒｅｓ ｏｆ ｍａｒｒｏｗ ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ（ＭＳＣｓ）ａｎｄ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｊ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｐｈｙｓｉｏｌ，１９９８，１７６ （１）：５７—６６． ［Ｉ ５］Ａｂｂｏｕｄ ＳＬ．Ａ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ ｉｓ ａ ｓｏｕｒｃｅ ａｎｄ ｔａｒｇｅｔ ｏｆｒ ｐｌａｔｅｌｅｔ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ［Ｊ】．Ｂｌｏｏｄ，１９９３，８１（１Ｏ）： ２５４７—２５５３． 【１６］Ｔａｋａｉ Ｋ，Ｈａｒａ Ｊ，Ｍａｔｓｕｍｏｔｏ Ｋｅｔ ａ１．Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｉｓ ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｖｅｌｙ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｂｙ ｈｕｍａｎ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｉｎｄｉｒｅｃｔｌｙｐｒｏｍｏｔｅｓ ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｓｉｓ［Ｊ］．Ｂｌｏｏｄ，１９９７，８９（５）：１５６０—１５６５． ［１ ７］Ｃｈｅｎ Ｘ，Ｌｉ Ｙ，Ｗａｎｇ Ｌ，ｅｔ ａ１．Ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｒａｔ ｂｒａｉｎ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｉｎｄｕｃｅ ｈｕｍａｎ ｍａｒｒｏｗ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ［Ｊ】． Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２００２，２２（４）：２７５—２７９． 【１８］Ｂａｄｉａｖａｓ ＥＶ，Ａｂｅｄｉ Ｍ，Ｂｕｔｍａｒｃ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｐａｒｔｉｃｉｐａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｄｅｒｉｖｅｄ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｗｏｕｎｄ ｈｅａｌｉｎｇ［Ｊ］．Ｊ Ｃｅｌｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ， ２００３，１９６（２）：２４５—２５０． ［１９］Ｍｏｏｒｅ ＫＡ，Ｌｅｍｉｓｃｈｋａ ＩＲ．Ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｎｉｃｈｅｓ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ， ２００６．３ １ １（５７６９）：１ ８８０—１ ８８５． ［２０］Ｓｃａｄｄｅｎ ＤＴ．Ｔｈｅ ｓｔｅｍ—ｃｅｌｌ ｎｉｃｈｅ ａｓ ａｎ ｅｎｔｉｔｙ ｏｆ ａｃｔｉｏｎ［Ｊ］＿Ｎａｔｕｒｅ， ２００６，４４１（７０９７）：１０７５—１０７９． ［收稿日期］２００９一Ｉｌ—Ｏ２ ［修回日期］２０１０—０１—０５ 编辑／张惠娟
