第８卷第６期 中国科技论文 ＣＨＩＮＡ ＳＣＩＥＮＣＥＰＡＰＥＲ Ｖｏ１．８ Ｎｏ．６ ２０１３年６月 Ｊｕｎｅ ２０１３ 乙酰酯键和糖苷键温和氢氧化钠水解行为的研究 朱均均，朱圆圆，程 婷，季星岐，徐 勇，勇 强，佘世袁 （南京林业大学化学工程学院，南京２１００３７） 摘要：为了水解木质纤维原料中半纤维素上的乙酰酯键而不水解或少水解高聚糖，实现从源头上分离乙酸和高聚糖，减少乙 酸对乙醇发酵的影响，以纤维二糖八乙酸酯为模型化合物，研究氢氧化钠浓度、温度、液固比和时间对乙酰酯键和糖苷键水解行 为的影响。结果表明，纤维二糖八乙酸酯在液固比１００，ＮａＯＨ ５ ｇ／Ｌ，６０℃下反应６０ ｍｉｎ，其乙酰酯键水解率达到９０．３４ 。温 和氢氧化钠水解纤维二糖和葡萄糖的结果表明，氢氧化钠不仅能够水解糖苷键，也能水解碳一碳键。 关键词：乙酰酯键；糖苷键；氢氧化钠；水解行为 中图分类号：ＴＱ０３１；ＴＱ３５３ 文献标志码：Ａ 文章编号：２０９５—２７８３（２０１３）０６—０５６５—０４ Ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｂｅｈａｖｉｏｒ ｏｆ ａｃｅｔｙｌ ｅｓｔｅｒ ｂｏｎｄ ａｎｄ ｇｌｙｃｏｓｉｄｉｃ ｂｏｎｄ ｗｉｔｈ ｍｉｌｄ ｓｏｄｉｕｍ ｈｙｄｒｏｘｉｄｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｚｈｕ ＪｕＮｕｎ，Ｚｈｕ Ｙｕａｎｙｕａｎ，Ｃｈｅｎｇ Ｔｉｎｇ，Ｊｉ Ｘｉｎｇｑｉ，Ｘｕ Ｙｏｎｇ，Ｙｏｎｇ Ｑｉａｎｇ，Ｙｕ Ｓｈｉｙｕａｎ （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｎａｎｊｉｎｇ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００３７，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｃｅｌｌｏｂｉｏｓｅ ｏｃｔａａｃｅｔａｔｅ ａｓ ａ ｍｏｄｅｌ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｂｅｈａｖｉｏｒ ｏｆ ａｃｅｔｙｌ ｅｓｔｅｒ ｂｏｎｄ ａｎｄ ｇｌｙｃｏｓｉｄｉｃ ｂｏｎｄ，ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｒｅａｌｉｚｅ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ａｎｄ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｓｏｕｒｃｅ，ａｎｄ ｒｅｄｕｃｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ｏｎ ｅｔｈａｎｏｌ ｆｅｒ— ｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｔｈｒｏｕｇｈ ｈｙｄｒｏｌｙｚｉｎｇ ａｃｅｔｙｌ ｅｓｔｅｒ ｂｏｎｄ ｆｒｏｍ ｌｉｇｎｏｃｅｌｌｕｌｏｓｉｃ ｈｅｍｉｃｅｌｌｕｌｏｓｅ ｗｉｔｈｏｕｔ ｈｙｄｒｏｌｙｚｉｎｇ ｏｒ ｌｅｓｓ ｈｙｄｒｏｌｙｚｉｎｇ ｐｏｌｙ— ｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ．Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ＮａＯＨ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ｌｉｑｕｉｄ－ｓｏｌｉｄ ｒａｔｉｏ ａｎｄ ｔｉｍｅ ｏｎ ｔｈｅ ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｂｅｈａｖｉｏｒ ｗｅｒｅ ａｌｓｏ ｅｘｐｌｏｒｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｒａｔｅ ｏｆ ａｃｅｔｙｌ ｅｓｔｅｒ ｂｏｎｄ ｉｎ ｃｅｌｌｏｂｉｏｓｅ ｏｃｔａａｃｅｔａｔｅ ｃｏｕｌｄ ｒｅａｃｈ ９０．３４ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｑｕｉｄ－ｓｏｌｉｄ ｒａｔｉｏ １００，ＮａＯＨ ５ ｇ／Ｌ，６０℃，ａｎｄ ６０ ｍｉｎ．Ｔｈｅ ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ｃｅｌｌｏｂｉｏｓｅ ａｎｄ ｇｌｕｃｏｓｅ ｗｉｔｈ ＮａＯＨ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ＮａＯＨ ｗａｓ ｎｏｔ ｏｎｌｙ ａｂｌｅ ｔＯ ｈｙｄｒｏｌｙｚｅ ｔｈｅ ｇｌｙｃｏｓｉｄｉｃ ｂｏｎｄ，ｂｕｔ ａｌｓｏ ｃａｐａｂｌｅ ｏｆ ｈｙｄｒｏｌｙｚｉｎｇ ｔｈｅ ｃａｒｂｏｎ－ｃａｒｂｏｎ ｂｏｎｄ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ａｃｅｔｙｌ ｅｓｔｅｒ ｂｏｎｄ；ｇｌｙｃｏｓｉｄｉｃ ｂｏｎｄ；ｓｏｄｉｕｍ ｈｙｄｒｏｘｉｄｅ；ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｂｅｈａｖｉｏｒ 木质纤维原料生物炼制燃料乙醇的过程主要包 括预处理、纤维素酶制备及酶水解、糖液乙醇发酵等 几个关键技术［１≈］。预处理技术是第一步，其方法的 选择对后续的酶水解、乙醇发酵等技术产生很大的 影响，尤其在预处理过程中产生的抑制物，如弱酸 类、呋喃化合物类和酚类化合物对酶水解和乙醇发 酵产生一定的影响ｌ４。］。在这些抑制物中来源于半 纤维素上乙酰酯键水解产生的乙酸影响最大｜ｌ８ ］，并 且乙酸常常与糖液混合在一起。采用脱毒的方法去 除乙酸虽然可以取得一定效果，但也会增加工艺的 复杂性和经济成本＿１。。 ］。研究表明，在酸性或碱性 条件下，乙酰酯键要比糖苷键更容易水解＿１ 。因此， 笔者主要着眼于半纤维素上乙酰酯键的水解而尽量 不水解糖苷键，从而保证乙酸与高聚糖采用固液分 离即可分开，从源头上解决乙酸与糖混在一起的问 题。因为木质纤维原料结构复杂，不利于说明乙酰 酯键和糖苷键的水解问题，因此笔者以纤维二糖八 乙酸酯为模型化合物，研究氢氧化钠浓度、温度、液 固比和时间等对纤维二糖八乙酸酯水解的影响，以 期为木质纤维原料中乙酰酯键的水解提供参考 依据。 １实验部分 １．１试剂 纤维二糖八乙酸酯，色谱纯（纯度大于９８．０ ），购买于上海弘邦医药科技有限公司。氢氧化钠 及其他试剂，均为分析纯或色谱纯，购买于国药集团 化学试剂有限公司。 １．２温和氢氧化钠水解纤维二糖八乙酸酯 在１５０ ｍＬ三角瓶中，加入０．５ ｇ绝干纤维二糖 八乙酸酯，然后再加入不同液固比（５０～１５０，固体质 量以ｇ计，液体体积以ｍＬ计，下同）、不同质量浓度 （０￣１０．０ ｇ／Ｌ）的氢氧化钠溶液，在不同温度（３０～ ９０℃）、１５０ ｒ／ｍｉｎ摇床中反应不同时问（３０～９Ｏ ｍｉｎ）。反应结束后，迅速冷却至室温，用硫酸中和至 ｐＨ １～３采用高效液相色谱法测定纤维二糖、葡萄 糖、乙酸的质量浓度。 １．３温和氢氧化钠水解纤维二糖和葡萄糖 在１５０ ｍＬ三角瓶中，加入０．５ ｇ绝干纤维二糖 或葡萄糖，然后再加入不同浓度（０～１０．０ ｇ／Ｌ）的氢 氧化钠溶液，采用上述温和氢氧化钠水解纤维二糖 收稿日期：２０１３—０１—３０ 基金项目：国家自然科学基金资助项目（３１１００４３２）；江苏省自然科学基金资助项目（ＢＫ２０１１８１９）；高等学校博士学科点专项科研基金资助项目 （２０１１３２０４１２００１３） 作者简介：朱均均（１９７９一），男，副教授，主要研究方向：生物化工，ｚｈｕｊｊ＠ｎｊｆｕ．ｅｄｕ．ｃｎ ５６６ 中国科技论文 第８卷 八乙酸酯的最佳液固比、温度和时间来分别水解纤 维二糖和葡萄糖，采用高效液相色谱法分析纤维二 糖、葡萄糖的质量浓度。 １．４分析方法 糖（纤维二糖、葡萄糖）、乙酸的定量分析在美国 Ａｇｉｌｌｅｎｔ １１００型高效液相色谱仪（ＨＰＬＣ）上进行。 采用Ｂｉｏ—Ｒａｄ ＨＰＸ－８７Ｈ柱（７．８ ｍｍ×３００ ｍｍ），柱 温５５℃，流动相０．００５ ｍｏｌ／Ｌ的硫酸，流速０．６ ｍＬ／ ｍｉｎ，上样量１Ｏ Ｌ，示差折光检测器。外标法 测定 。 ２结果与讨论 ２．１纤维二糖八乙酸酯温和氢氧化钠水解去除乙酰 基条件的确定 ２．１．１氢氧化钠质量浓度 纤维二糖八乙酸酯在液固比为１００，不同质量浓 度（０、２．５、５．０、７．５、１０．０ ｇ／Ｌ）的氢氧化钠溶液中于 ６Ｏ℃下反应６Ｏ ｍｉｎ。氢氧化钠质量浓度对纤维二糖 八乙酸酯水解的影响如图１（ａ）所示。 从图１（ａ）中可以看出，随着氢氧化钠质量浓度 的不断增加，纤维二糖八乙酸酯的乙酰酯键不断水 解，乙酸的质量浓度从０直线增加至６．２３ ｇ／Ｌ（氢氧 化钠质量浓度５ ｇ／Ｌ）后趋于缓慢增加的趋势，这说 明碱浓度的增加可以促进酯键的水解ｌ＿】 ；纤维二糖 则呈现先增加后下降的趋势，同时在反应体系中测 得含有葡萄糖，这说明糖苷键也发生了水解，葡萄糖 质量浓度呈现先增加后缓慢下降的趋势。如果氢氧 化钠只水解乙酰酯键和糖苷键，纤维二糖在氢氧化 钠质量浓度大于５ ｇ／Ｌ时其浓度下降可以理解，但是 纤维二糖的糖苷键进一步水解产生的葡萄糖浓度应 该逐渐增加或者趋于不变，而实验结果则出现在氢 氧化钠质量浓度大于５ ｇ／Ｌ时其浓度逐渐下降，这说 明氢氧化钠可能进一步水解葡萄糖，这需要在后面 通过实验来进一步证明。 根据产生的乙酸浓度计算的乙酰酯键水解率可 以看出，在氢氧化钠质量浓度为５ ｇ／Ｌ时，乙酰酯键 水解率达到９Ｏ．３４ ，如果继续增加氢氧化钠浓度， 将会进一步促进糖苷键的水解。因此，为了尽可能 多地水解乙酰酯键而不水解或少水解糖苷键，确定５ ｇ／Ｌ的氢氧化钠质量浓度进行下一步实验。 ２．１．２温度 纤维二糖八乙酸酯在液固比为ｉ００，５．０ ｇ／Ｌ的 氢氧化钠溶液中于不同温度（３０、４５、６０、７５、９０℃）下 反应６０ ｍｉｎ。温度对纤维二糖八乙酸酯水解的影响 如图１（ｂ）所示。 从图１（ｂ）中可以看出，随着温度的不断升高，乙 酸的质量浓度先快速增加后趋于缓慢上升，纤维二 糖质量浓度一直下降，从３ｏ℃的２．０４ ｇ／Ｌ一直下降 到９０℃的０．６７ ｇ／Ｉ ，而葡萄糖质量浓度从３０℃的 ０．０７ ｇ／Ｌ快速增加到４５℃的０．７１ ｇ／Ｌ后趋于缓慢 增加的趋势。因此，结合乙酰酯键水解率和糖苷键 的水解程度，选择６０℃作为最佳温度。 ２．１．３液固比 纤维二糖八乙酸酯在５．０ ｇ／Ｌ的氢氧化钠溶液 中于不同液固比（５０、７５、１００、１２５、１５０），温度６０℃ 下反应６０ ｍｉｎ。为了便于数据的比较，纤维二糖八 乙酸酯在不同液固比下的浓度均转化为液固比为 １００时的浓度。液固比对纤维二糖八乙酸酯水解的 影响如图１（ｃ）所示。 从图１（ｃ）中可以看出，随着液固比的不断增加， 乙酸质量浓度呈现先直线增加后缓慢增加的趋势； 纤维二糖呈现先增加后下降的趋势，在液固比为１００ 时，纤维二糖质量浓度达到最大值，为２．４１ ｇ／Ｌ；而 葡萄糖质量浓度也呈现先增加后下降的趋势。因 此，综合考虑乙酰酯键水解率和糖苷键的水解程度， 确定最佳液固比为１００。 ２．１．４时间 纤维二糖八乙酸酯在液固比为１００，５．０ ｇ／Ｌ的 氢氧化钠溶液中于６０℃下反应不同时间（１５、３０、 ４５、６Ｏ、７５ ｒａｉｎ）。时问对纤维二糖八乙酸酯水解的影 响如图１（ｄ）所示。 从图１（ｄ）中可以看出，随着时间的延长，乙酸质 量浓度呈现先增加后缓慢增加的趋势，在时间为３０ ｍｉｎ时，乙酸质量浓度已达到６．１７ ｇ／Ｌ，相当于乙酰 酯键水解率为８８．９５ ；纤维二糖呈现缓慢下降的 趋势，葡萄糖质量浓度则呈现缓慢增加的趋势。因 此，综合考虑乙酰酯键水解率和糖苷键的水解程度， 确定最佳时间为６０ ｍｉｎ，此时的乙酰酯键水解率为 ９０．３４ ｐ（ＮａＯＨ）／（ｇ・Ｌ ） ３ｏ 篇： ９０ 一纤维二糖一葡萄糖一乙酸 纤维二糖一葡萄糖一乙酸 液固比 ｔ／ｒａｉｎ 一纤维■糖一葡萄糖—．－乙酸 — ｆ维二糖— 葡萄糖一乙酸 （ｃ） （ｄ） 图１各因素对纤维二糖八乙酸酯水解的影响 Ｆｉｇ．１ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｆａｃｔｏｒｓ ｏｎ ｔｈｅ ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｏｆ ｃｅＵｏｂｉｏｓｅ ｏｃｔａａｃｅｔａｔｅ ２．２温和氢氧化钠水解纤维二糖 纤维二糖在液固比为１００，不同质量浓度（０、２． 第６期 朱均均，等：乙酰酯键和糖苷键温和氢氧化钠水解行为的研究 ５６７ ５、５．０、７．５、１０．０ ｇ／Ｌ）的氢氧化钠溶液中于６０℃下 反应６０ ｒａｉｎ。氢氧化钠质量浓度对纤维二糖水解的 影响如表１所示。 表１ 氢氧化钠质量浓度对纤维二糖水解的影响 Ｔａｂｌｅ １ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｈｅ ｍａｓｓ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ＮａＯＨ ｏｎ ｃｅｌｌｏｂｉｏｓｅ ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｒｅａｃｔｉｏｎ 序号 ＮａＯＨ 纤维二糖 葡萄糖 ９．８２ ０．１５ ０．３２ ２．００ ０．１８ ０．８４ ０．００ ０．５０ ｂ ｌ０．０ ０．００ ０．２／ 从表ｌ中可以看出，随着氢氧化钠质量浓度的 不断增加，纤维二糖质量浓度呈现先快速下降，当氢 氧化钠质量浓度为２．５ ｇ／Ｌ时，纤维二糖质量浓度为 ０．３２ ｇ／Ｌ，后逐渐趋于零，这说明氢氧化钠能够水解 纤维二糖中的糖苷键，这才导致纤维二糖的质量浓 度下降。如果氢氧化钠只水解纤维二糖的糖苷键， 则水解产物只有葡萄糖（理论上１０ ｇ／Ｌ纤维二糖水 解产生１０．５３ ｇ／Ｌ葡萄糖），并且随着纤维二糖的不 断水解，葡萄糖的质量浓度则不断增加。但从表１舳加∞∞∞∞加ｍ 舳 ∞如∞∞加ｍ 中的数据来看，产生的葡萄糖最高为氢氧化钠为２ 黜 黜黜黜 ｇ／Ｌ时的２．Ｏ０ ｇ／Ｌ，并且随着氢氧化钠质量浓度的 增加，葡萄糖质量浓度也在不断降低，这说明氢氧化 钠不仅能够水解糖苷键，也能水解葡萄糖生成更小 分子的物质，因此有必要研究温和氢氧化钠水解葡 萄糖的行为。 ２．３温和氢氧化钠水解葡萄糖 葡萄糖在液固比为１００，不同质量浓度（０、２．５、 ５．０、７．５、１０．０ ｇ／Ｌ）的氢氧化钠溶液中于６０℃下反 应６０ ｍｉｎ。氢氧化钠质量浓度对纤维二糖水解的影 响如表２所示。 表２氢氧化钠质量浓度对葡萄糖水解的影响 Ｔａｂｌｅ ２ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｈｅ ｍａｓｓ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ＮａＯＨ ｏｎ ｇｌｕｃｏｓｅ ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｒｅａｃｔｉｏｎ 序号 ＮａＯＨ 葡萄糖 ５ １０．０ ０．６４ 从表２中可以看出，随着氢氧化钠质量浓度的 不断增加，葡萄糖的质量浓度呈现不断下降的趋势， 从氢氧化钠为０ ｇ／Ｌ的９．８６ ｇ／Ｌ下降到１０．０ ｇ／Ｌ 的０．６４ ｇ／Ｌ，这说明氢氧化钠能够进一步水解葡萄 糖。因此，这可以说明采用氢氧化钠进行预处理木 质纤维原料后所得到的预水解液中半纤维素含量较 高而单糖含量较低的原因，并且木质纤维原料结构 复杂，碱主要破坏木质素的酯键连接和木聚糖，碱浓 度很高时木聚糖的平均聚合度也会降低口 。 ２．４纤维二糖和葡萄糖氢氧化钠水解行为的比较 为了进一步说明纤维二糖和葡萄糖在不同氢氧 化钠质量浓度（０、２．５、５．０、７．５、１０．０ ｇ／Ｌ）下于６０ ℃下反应６０ ｒａｉｎ的情况，两者的ＨＰＬＣ色谱图如图 ２所示。 ８ ９ １０ １ｌ ｌ２ ｌ３ １４ ｌ５ｒａｉｎ ｔｉｍ （ｂ） 图２纤维二糖（ａ）和葡萄糖（ｂ）氢氧化钠水解色谱图 Ｆｉｇ．２ ＨＰＬＣ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ ｏｆ ｃｅｌｌｏｂｉｏｓｅ（ａ）ａｎｄ ｇｌｕｃｏｓｅ（ｂ）ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ ｗｉｔｈ ＮａＯＨ 从图２（ａ）中的纤维二糖水解图可以看出，峰工 是纤维二糖，峰Ⅱ是葡萄糖，随着氢氧化钠质量浓度 的不断增加，峰Ｉ快速降低，峰Ⅱ先增高后降低，峰 Ⅱ之后又出现了大小不一的若干个峰，这说明产生 的糖也不断发生降解生成更小分子的物质。从图２ （ｂ）中葡萄糖水解可以看出，随着氢氧化钠质量浓度 的不断增加，峰工葡萄糖不断降低，峰Ｉ之后出现了 若干个峰，进一步说明了葡萄糖在氢氧化钠作用下 碳一碳键发生了进一步水解生成更小分子的物质，这 些小分子物质有待进一步研究。 ３结论 １）纤维二糖八乙酸酯在液固比为１００，５ ｇ／Ｌ氢 氧化钠溶液下于６Ｏ℃下反应６０ ｒａｉｎ，此时的乙酰酯 键水解率为９Ｏ．３４ 。 ２）纤维二糖在液固比为１００，不同氢氧化质量钠 浓度下于６０℃下反应６０ ｒａｉｎ，随着氢氧化钠质量浓 度的不断增加，纤维二糖质量浓度快速下降后逐渐 趋于零，葡萄糖质量浓度先增加后降低，说明葡萄糖 会进一步水解。 ３）葡萄糖在液固比为１００，不同氢氧化钠质量浓 度下于６０℃下反应６０ ｒａｉｎ，随着氢氧化钠质量浓度 的不断增加，葡萄糖质量浓度快速下降后缓慢下降， 这说明氢氧化钠能够进一步水解葡萄糖中的碳一碳键 生成更小分子的物质。 （由于印刷关系，查阅本文彩色图片，请浏览 ｈｔｔｐ：／／ｊ ｏｕｒｎａ１．ｐａｐｅｒ．ｅｄｕ．ｃｎ） ［参考文献］（Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ） Ｅｌｉ朱均均，陈尚钎，勇强，等．玉米秸秆生物炼制燃料乙 ５６８ 中国科技论文 第８卷 醇的研究＿ＬＪ］．林产化学与工业，２０１１，３１（６）：３５—４０． Ｚｈｕ Ｊｕ￣ｕｎ，Ｃｈｅｎ Ｓｈａｎｇｍｎｇ，Ｙｏｎｇ Ｑｉａｎｇ，ｅｔ ａ１． Ｂｉｏｒｅｆｉｎｅｒｙ ｏｆ ｃｏｒｎ ｓｔｏｖｅｒ ｆｏｒ ｆｕｅｌ ｅｔｈａｎｏｌ［Ｊ］．Ｃｈｅｍ Ｉｎｄ Ｆｏｒ Ｐｒｏｄ，２０１１，３１（６）：３５—４０．（ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ） ｒ２］Ｃｈｅｎ Ｗ Ｈ，Ｐｅｎ Ｂ Ｌ，Ｙｕ Ｃ Ｔ，ｅｔ ａ１．Ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｅｆｆｉ— ｃｉｅｎｃｙ ａｎｄ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｉｃｅ ｓｔｒａｗ ｂｙ ａｎ ｉｎｔｅｒｇｒａｔｅｄ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｄｉｌｕｔｅ－ａｃｉｄ ａｎｄ ｓｔｅａｍ ｅｘｐｌｏｓｉｏｎ ｆｏｒ ｂｉｏｅｔｈａｎｏｌ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｂｉｏｒｅｓｏｕｒ Ｔｅｃｈｎｏｌ， ２０１２，１０２（３）：２９１６－２９２４． ｒ３］ Ｓａｈａ Ｂ Ｃ，Ｃｏｔｔａ Ｍ Ａ．Ｌｉｍｅ ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ，ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｓａｃｃｈａｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｉｃｅ ｈｕｌｌｓ ｔｏ ｅｔｈａｎｏｌ ＿Ｊ］．Ｂｉｏｍａｓｓ Ｂｉｏｅｎｅｒｇｙ，２００８，３２（１０）：９７１—９７７． ［４］Ｐａｌｍｑｖｉｓｔ Ｅ，Ｈａｈｎ－Ｈａｇｅｒｄａｌ Ｂ．Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｇｎｏ— ｃｅｌｌｕｌｏｓｉｃ ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓ．ＩＩ：ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ａｎｄ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｒＪ］．Ｂｉｏｒｅｓｏｕｒ Ｔｅｃｈｎｏｌ，２０００，７４（１）：２５— ３３． ｒ５］ Ｋｉｍ Ｙ，Ｘｉｍｅｎｅｓ Ｅ，Ｍｏｓｉｅｒ Ｎ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｓｏｌｕｂｌｅ ｉｎｈｉｂｉ— ｔｏｒｓ／ｄｅａｃｔｉｖａｔｏｒｓ ｏｆ ｃｅｌｌｕｌａｓｅ ｅｎｚｙｍｅｓ ｆｒｏｍ ｌｉｇｎｏｃｅｌｌｕ— ｌｏｓｉｃ ｂｉｏｍａｓｓ Ｉ－ｊ］．Ｅｎｚｙｍｅ Ｍｉｃｒｏｂ Ｔｅｃｈｎｏｌ，２０１１，４８ （４／５）：４０８—４１５． ｒ６］ Ｃｏｒｔｅｚ Ｄ Ｖ，Ｒｏｂｅｒｔｏ Ｉ Ｃ．Ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ ａｎｄ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｖａｎｉｌｌｉｎ ａｎｄ ｓｙｒｉｎｇａｌｄｅｈｙｄｅ ｏｎ ｔｈｅ ｘｙｌｉｔｏｌ ｆｏｒ— ｍａｔｉｏｎ ｂｙ Ｃａｎｄｉｄａ ｇｕｉｌｌｉｅｒｍｏｎｄｉｉ［Ｊ］．Ｂｉｏｒｅｓｏｕｒ Ｔｅｃｈｎｏｌ，２０１０，１０１（６）：１８５８—１８６５． ［７］Ｚａｌｄｉｖａｒ Ｊ，Ｉｎｇｒａｍ Ｌ Ｏ．Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｏｒｇａｎｉｃ ａｃｉｄｓ ｏｎ ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌｏｇｅｎｉｃ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＬＹＯ１［Ｊ］．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ Ｂｉｏｅｎｇ，１９９９，６６（４）： ２０３—２１０． ｒ８］ Ｃｈｏ Ｄ Ｈ，Ｓｈｉｎ Ｓ Ｊ，Ｂａｅ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｅｎｈａｎｃｅｄ ｅｔｈａｎｏｌ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｄｅａｃｅｔｙｌａｔｅｄ ｙｅｌｌｏｗ ｐｏｐｌａｒ ａｃｉｄ ｈｙｄｒｏｌ— ｙｓａｔｅ ｂｙ Ｐｉｃｈｉａ ｓｔｉｐｉｔｉｓ Ｉ－Ｊ］．Ｂｉｏｒｅｓｏｕｒ Ｔｅｃｈｎｏｌ，２０１０， 】０１（１３）：４９４７—４９５１． ｒ９］ ｖａｎ Ｚｙｌ Ｃ，Ｐｒｉｏｒ Ｂ Ａ，ｄｕ Ｐｒｅｅｚ Ｊ Ｃ．Ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ｉｎｈｉｂｉ— ｔｉｏｎ ｏｆ Ｄ－ｘｙｌｏｓｅ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｂｙ Ｐｉｃｈｉａ ｓｔｉｐｉｔｉｓ［Ｊ］． Ｅｎｚｙｍｅ Ｍｉｃｒｏｂ Ｔｅｃｈｎｏｌ，１９９１，１３（１）：８２—８６． ［１Ｏ］Ｚｈｕ Ｊ Ｊ，Ｙｏｎｇ Ｑ，Ｘｕ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｄｅｔｏｘｉｉｆｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｒｎ ｓｔｏｖｅｒ ｐｒｅｈｙｄｒｏｌｙｚａｔｅ ｂｙ ｔｒｉａｌｋｙｌａｍｉｎｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｏ ｉｍ— ｐｒｏｖｅ ｔｈｅ ｅｔｈａｎｏｌ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ Ｐｉｃｈｉａ ｓｔｉｐｉｔｉｓ ＣＢＳ ５７７６ ｌ Ｊ】．Ｂｉｏｒｅｓｏｕｒ Ｔｅｃｈｎｏｌ，２０１１，１０２（２）： １６６３—１６６８． ｒ１１］Ｒａｎｊａｎ Ｒ，Ｔｈｕｓｔ Ｓ，Ｇｏｕｎａｒｉｓ Ｃ Ｅ，ｅｔ ａ１．Ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｏｆ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｆｒｏｍ ｌｉｇｎｏｃｅｌｌｕｌｏｓｉｃ ｂｉｏｍａｓｓ ｈｙｄｒｏｌｙｚａｔｅｓ ｆｏｒ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｅｔｈａｎｏｌ ｙｉｅｌｄ ａｎｄ ｖａｌｕｅ－ａｄｄｅｄ ｐｒｏｄｕｃｔ ｒｅｃｏｖｅｒｙ［Ｊ］．Ｍｉｃｒｏｐｏｒｏｕｓ Ｍｅｓｏｐｏｒｏｕｓ Ｍａｔｅｒ， ２００９，１２２（１／２／３）：１４３—１４８． Ｅ１２］Ｎｉｃｈｏｌｓ Ｎ Ｎ，Ｄｉｅｎ Ｂ Ｓ，Ｃｏｔｔａ Ｍ久Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｉｏｅｎｅｒｇｙ ｃｒｏｐｓ ｉｎｔｏ ｅｔｈａｎｏｌ ｕｓｉｎｇ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｂａｔｅｍｅｎｔ ｆｏｒ ｒｅｍｏｖａｌ ｏｆ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ＿Ｊ］．Ｂｉｏｒｅｓｏｕｒ Ｔｅｃｈｎｏｌ，２０１０， １０１（１９）：７５４５—７５５０． Ｅ１３］李忠正，孙润仓，金永灿．植物纤维资源化学［Ｍ］．北 京：中国轻工业出版社，２０１２． Ｌｉ Ｚｈｏｎｇｚｈｅｎｇ，Ｓｕｎ Ｒｕｎｃａｎｇ，Ｊｉｎ Ｙｏｎｇｃａｎ．Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｆｉｂｅｒ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ［Ｍ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：Ｃｈｉｎａ Ｌｉｇｈｔ Ｉｎ— ｄｕｓｔｒｙ Ｐｒｅｓｓ，２０１２．（ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ） ［１４］周长山．酯的碱性水解反应机理浅析［Ｊ］．唐山师范学 院学报，２００１，２３（２）：３６—３７． Ｚｈｏｕ ＣｈａｎｇｓｈａｒＬ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｅｓｔｅｒ’ｓ ａｌ— ｋａｌｅｓｃｅｎｃｅ ｈｙｄｒｏｌｙｚｅ ｒｅａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｊ Ｔａｎｇｓｈａｎ Ｔｅａｃｈ ｏＣｌｌ，２００１，２３（２）：３６—３７．（ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ） ［１５］张艳君．碱处理玉米秸秆制备乙醇的研究［Ｄ］．南京： 南京林业大学，２００９． Ｚｈａｎｇ ＹａｎｊｕｉＬ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｅｔｈａｎｏｌ ｆｒｏｍ Ｃｏｒｎｓｔｏｖｅｒ ｂｙ Ａｌｋａｌｉ Ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ Ｐｒｏｃｅｓｓ［Ｄ］．Ｎａｎｊｉｎｇ：Ｎａｎｊｉｎｇ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２００９．（ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ）
