过氧化值的测定,消化装置,评分

一、原理

脂肪氧化的初级产物是氢过氧化物ROOH，因此通过测定脂肪中氢过氧化物的量，可以评价脂肪的氧化程度。

实验中过氧化值的测定采用碘量法，即在酸性条件下，脂肪中的过氧化物与过量的KI反应生成I2，用Na2S4O6，滴定生成的I2，求出每千克油中所含过氧化物的毫摩尔数，称为脂肪的过氧化值(POV)。其反应如下：

HCOHCO+ 2KIK2O + I2 +HCOHCNa2S4O6 + 2NaII2 + 2Na2S2O3

二、材料、仪器与试剂 1. 试剂

①三氯甲烷－冰乙酸混合液：取氯仿40m1加冰乙酸60m1，混匀。

②饱和碘化钾溶液：取碘化钾14 g，加水10m1，贮于棕色瓶中，如发现溶液变黄，

应重新配制。

③硫代硫酸钠标准液[c(Na2S2O3) = 0.002mol/L] ④淀粉指示剂(10g/L)

2. 仪器：碘量瓶（250mL），酸式滴定管 三、操作步骤

称取2.00～3.00g(准至0.01g)于干燥的250m1碘量瓶底部，加入30ml氯仿一冰乙酸混合液，轻轻摇动使样品完全溶解，加入l.00mL饱和碘化钾溶液，紧密塞好瓶盖，并轻轻震摇0.5min，然后，置暗处放置3min。取出立即加水100mL，充分摇匀，立即用硫代硫酸钠标准液（0.002mol/L）滴定至淡黄色，加入1mL淀粉指示剂，继续滴定至蓝色消失，记下体积V。 同时，取相同量的三氯甲烷－冰乙酸溶液、碘化钾溶液、水，按同一方法，做试剂空白试验。 四、计算

以碘的百分数表示过氧化值。

V1V2c0.1269m100%过氧化值（I2）＝

式中： V1—— 样品消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液体积，mL；

V2—— 试剂空白消耗硫代硫酸钠标准溶液滴定体积，mL； C —— 硫代硫酸钠标准滴定溶液的浓度，mol/L； M —— 试样质量，g；

0.1269为与1.00mL硫代硫酸钠标准滴定溶液[c(Na2S2O3) = 1.000 mol/L)]相当的碘的质量，g；

以每千克油脂中过氧化物中的氧的量（mmol）表示过氧化值时按下式计算：

(V1V2)cm过氧化值 ＝

测定结果取算术平均值的二位有效数，相对偏差≤10％。 五、注意事项

1. 加入碘化钾后，静置时间长短和加水量多少，对测定结果均有影响，应严格控制条件。

2. 在用硫代硫酸钠标准液滴定被测试样品时，必须在接近滴定终点溶液呈淡黄色时，才能加淀粉指示剂，否则淀粉能大量吸附碘而影响结果的准确。

1000

一）消化的机制

RCH2(NH2)COOH+H2SO→CO2+H2O+SO2+NH3 2 NH3+H2SO4→（NH4）2SO4 （二）消化的条件

凯氏定氮法中采用的是湿法消化，即以强酸为介质进行有机物的氧化。但，仅通过酸氧化，有机物的氧化的速度还是比较慢的。

一般通过提高消化沸点，加入催化剂、氧化剂加快反应速度。 1．提高消化液沸点

可加入硫酸钾(K2SO4)或硫酸钠实现此目的。

浓硫酸的沸点为329～330℃，加入K2SO4后，消化液的沸点可提高到400℃。 但K2SO4的加入量不可太大，K2SO4的投入量以能使消化液沸点保持在370～410℃为宜。因为温度太高可引起硫酸的分解过快，浪费试剂；还会导致(NH4)2SO4的分解，从而导致测定结果的偏低。

如果消化结束后，在消化容器内形成结晶块，说明K2SO4的投入量太大，氮素已经有所损失，应改进试剂配比，重新取样、消化。

2．加入催化剂，降低反应阈值

可采用的催化剂有：铜、汞、硒粉。由于汞、硒粉是有毒的物质，危害操作人员的健康，污染环境。所以一般只以CUSO4消化催化剂。其催化机制可以用下列反应方程式表示： 2CuSO4→Cu2SO4+[O]+SO2 [O]+C→CO2

Cu2SO4+2H2SO4→2CuSO4+SO2+H2O

由于CuSO4是具有颜色的盐类，所以除了起催化作用外，还可作为消化终点的指示剂。 催化剂使用与否的原则：

不可认为任何一个凯氏定氮法的消化处理过程都可采用CuSO4来催化消化反应。如何确定是否加CuSO4，我们将在凯氏定氮法结束时，再作详细说明。 3 ．加入氧化剂

除浓硫酸外，其它常用的氧化剂有、双氧水、高氯酸。

其中，以双氧水效果为最好，但它作用速度太快且持效性差，操作时稍显麻烦。加双氧水时，应把定氮烧瓶取下冷却至50℃左右，否则不会起太大的作用。

高锰酸钾用于C/N较大的样品的消化。 （三）消化工具、设备及注意事项 1．定氮烧瓶的种类及使用

定氮瓶是消化的容器，一般采用长颈烧瓶（或称梨形烧瓶、），在消化时应瓶口处加一个小漏斗，且向上倾斜45度以减少介质的损耗。

近年来，消化设备有了很大的改进。如KDN型蛋白质测定仪的消化装置，以水力喷射器排除废气；配备了粗试管形状的定氮烧瓶；以环杯式电加热器为热源。 注意：用长颈烧瓶时，固态样品的转移方式。

2 ．消化的火力

应先小火，待泡沫消失后，再用大火消化。为加快消化速度，可加入石蜡油消泡，这样可提前加大火力消化，以节约消化时间。

如果用煤气炉为热源，则火苗的长短以不超过消化液面为宜。

3 ．消化过程的调控

要经常转动瓶体，以酸的加流液清洗贴在瓶壁上的残渣。对此要求：消化过程必须有人照看（其它湿法消化同此要求）。 （四）消化的过程和终点的判断 消化过程中，消化液的变化：

碳化（变黑、起泡）→ 泡沫消失（仍黑色）→酱色→变棕色→变浅→透明 达此状态，再消化0.5～1小时可停止消化。

*消化液则由黑色转为澄清时，只意味着有机物中的碳完全氧化，但不说明N素完全由有机态转为NH3了。N素完全转为NH3要比C的氧化延后。实验证明，至消化液转为澄清后，再消化0.5～1小时后，方可保证N素的最佳回收率。 （五）决定消化时间的长短的因素

与食品的组成成分及含量有关。一般而言，含糖、脂肪多的食物的消化比较困难，消化的时间就长些；如果蛋白质含量高，则消化的时间就短些。

一般样品消化4小时即可，而富含赖氨酸、组氨酸的食物，其消化的时间就要延长1～2倍的时间。

诸多因素可影响样品的消化和N素的回收率，所以凯氏定氮法的主要误差来源于消化工序。 一、 全氮的测定（60分） 考核要评分要配分 评分标准 得分 素 素 1.用少量洗涤剂洗涤玻璃仪器内外壁；0.5分 玻璃仪2.用自来水将洗涤剂清洗干净，用水量合理；0.5分 一、准备 器准备2 3.用蒸馏水将仪器润洗，用水量合理；0.5分 及清洗 4.洗涤干净，瓶壁无水滴；0.5分 二、样品的预处理 样品的称量 4 1.检查天平水平、清洁状况；1分 2.开关天平门操作正确，读数及记录正确；1分 3.每份样品称量次数不超过3次；1分 4.检查、整理天平；1分 装置图 3 消化装置图的搭建正确；3分 1.加硫酸操作正确；0.5分 2.运用纸槽加入固体试剂；1分 3.加入适量沸石；0.5分 消化 5 4.消化温度，先低温后高温；1分 5.消化终点判断正确；1分 6.冷却充分；1分 7.定容操作熟练；1分 装置图 5 蒸馏装置图搭建正确；5分 1.水蒸汽发生瓶中加水量合适；1分 2.加入适量沸石；1分 3.水蒸汽发生瓶中的液体处于酸性环境；1分 4.冷凝管插入吸收液液面之下；1分 三、蒸馏 加碱、吸收 5.移液管清洗、润洗操作正确；1分 11 6.移液管移取消化液操作正确；1分 7.移液管放液操作正确；1分 8.小玻杯中放入适量的蒸馏水密封；1分 9.蒸馏时间充分；1分 10.蒸馏后冲洗冷凝管下端；1分 11.装置图拆分顺序正确；1分 1.滴定管用待装液润洗，装标准液溶液手势正确；1分 2.装液后赶尽气泡；1分 3.调零刻度液面正确；1分 滴定操作 4.滴定前碰去管尖残液；1分 5.滴定时操作滴定管的方法正确；1分 6.滴定时管与摇瓶操作配合自如；2分 7.终点控制熟练（半滴技术）；2分 8.滴定终点时管尖残液碰入瓶内处理；1分 9.终点判断准确；3分 10.读数方法正确；1分 1、数据五、试验结果 处理 1. 原始数据记录准确、完整、美观；2分 8 2.有效数字运算符合规则；3分 3. 使用法定计量单位，公式正确，计算过程正确。3分 12 极差与平均值之比＜10%；（12分） 极差与平均值之比11%~15% ；（7~11分） 极差与平均值之比＞16%。（6分以下） 总分

四、滴定 10 2、结果