一、实验步骤
1、分组编号
取普通琼脂平板50个，用事先准备好的记号笔分别在其底部标记1、2、3、4、5、6、7、8、9、10……48、49、50将50个平板分为5组，1-5为第一组（放在1号房间），6-10为第二组（放在2号房间），以此类推，46-50为第十组（放在10号房间）。
2、平皿沉降
选择10间屋子作为有代表性的采样点，将屋子编号1-10。将每组的普通琼脂平板分别放置室内四角及室内中央，每组的琼脂平板均放在离地面0.8-1.5m高的同样的洁净桌子或椅子上，同时打开10组的平皿盖（将皿盖置于平板底下，不可仰放，以防污染），使每个平板的培养基均暴露于空气中，10min后（视空气的清洁程度而定），盖好每个平皿盖（盖平皿盖的顺序与打开的顺序一致），分别记录每组的采样时间。
3、温箱培养
将十组的培养皿置于37℃的温箱培养24小时。
4、菌落计数
分别记录十组平皿每组的菌落总数。用事先准备好的钢笔于平板底点数每块平板上的菌落数，并将每组5个部位所得菌落数相加除以5求平均数。凡二个或几个菌落边缘有相互重叠者，均分别计算为二个或几个。
5、结果计算
将实验结果代入下面的公式计算每立方米空气中的平均菌落数。
菌落数/m3=100÷A÷t/5×1000/10×N=(50000×N) ÷（A×t）
t—平皿暴露于空气中的时间（分钟）
N—培养后，每组平皿上的菌落总数
A—所用平皿的面积（cm2）
小结：
所需实验用品：
普通琼脂平板50个、1套记号笔和标签、37℃的温箱、钢笔、计算器、0.8-1.5m高的桌子或椅子。
二、实验用品的配置
1、普通琼脂平板的制备
1）营养琼脂培养基
张同样的50
（1） 将灭菌纸放于电子天平上（精度0.0001g）除零，用灭菌药匙在灭菌纸上称量50g牛肉浸膏。将称取好的牛肉浸膏倒入1个1L的烧杯。同样方法称取蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂20g倒入上烧杯，先用洗瓶加少量蒸馏水，用灭菌玻璃棒搅拌使其溶解，再加入蒸馏水稀释至刻度。
（2） 用pH校正仪测定pH值，若不在7.2-7.4之间，则边用灭菌玻璃棒搅拌边用用碱式滴定管或酸式滴定管取1mol/L的NaOH溶液（2.2.1）或1mol/L的盐酸溶液（2.2.2）滴定调节培养基的pH，用pH校正仪使pH值达到7.2-7.4。
（3） 然后将烧杯中的培养基倒入灭菌锥形瓶,每1 000 ml培养基，可分装25～30瓶。培养基分装完毕后，应及时封盖瓶口。置于15磅高压蒸汽灭菌锅灭菌30分钟。取出后自然冷却凝固。
2）普通琼脂平板
将高压灭菌过的琼脂培养基在酒精灯和铁架台上加热融化后倒入50个无菌的平皿中，使之在平皿中形成一个至少3-5mm厚的琼脂层（直径90mm平皿约需15-20ml）。平放，略开盖。待培养基凝固后倒置存入4℃冰箱中，备用。
2溶液的配制
1）氢氧化钠溶液（1mol/L）
将灭菌纸放于电子天平上（精度0.0001g）除零，用灭菌药匙在灭菌纸上称量4g氢氧化钠。倒入一个50ml灭菌烧杯，用洗瓶加少量蒸馏水并用灭菌玻璃棒搅拌溶解。将溶
解后的试样倒入100ml的容量瓶，洗烧杯三次，将洗烧杯液体倒入容量瓶，加蒸馏水至刻度，颠倒5次左右摇匀，用记号笔和标签标注配置标注名称。
2）盐酸溶液（1mol/L）
用10ml量筒取质量分数为37.5%的浓盐酸（密度=1.19g/ml）8.2ml，倒入100ml容量瓶中，加水至刻度。颠倒5次左右摇匀，用记号笔和标签标注配置标注名称。
小结：
所需实验用品：
牛肉浸膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水、氢氧化钠、质量分数为37.5%的浓盐酸。
1架电子天平（精度0.0001g），碱式滴定管、酸式滴定管各1支，pH校正仪，1个高压灭菌锅，1台冰箱。
3根灭菌玻璃棒，2个100ml灭菌容量瓶，25-30个100ml或50ml的灭菌锥形瓶，1只酒精灯，1个10ml灭菌量筒，1个1L灭菌烧杯，1个50ml灭菌烧杯。
若干灭菌纸，5把灭菌药匙，1个洗瓶，1盒火柴，1个三角架，50个无菌平皿，金属小框或玻璃板，线，1套记号笔和标签。
三、实验材料
1、原料
牛肉浸膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、蒸馏水、氢氧化钠、质量分数为37.5%的浓盐酸。
2、仪器
1架电子天平（精度0.0001g），碱式滴定管、酸式滴定管各1支，pH校正仪，1个高压灭菌锅，1台冰箱，1个37℃的温箱，1个计算器。
3、玻璃用具
3根灭菌玻璃棒，2个100ml灭菌容量瓶，25-30个100ml或50ml的灭菌锥形瓶，1只酒精灯，1个10ml灭菌量筒，1个1L灭菌烧杯，1个50ml灭菌烧杯。
4、其他用品
1套记号笔和标签，1支钢笔，50张同样的0.8-1.5m高的桌子或椅子，若干灭菌纸，5把灭菌药匙，1个洗瓶，1盒火柴，1个三角架，50个无菌平皿，金属小框或玻璃板，线。
四、实验计划
购置实验所需各种试剂，准备实验所需的所有器材，
做好各试剂仪器高温灭菌工作，配置氢氧化钠和盐酸溶液。
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制作普通琼脂平板
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空气细菌测定
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温箱培养24小时
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菌落计数
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结果分析与报告书写
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