．４５Ｏ． 实验与检验医学２０１３年ｌＯ月第３ｌ卷第５期Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｎｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ￣Ｏｃｔ』 ｌ３，Ｖ９１．３ １，Ｎｏ． 血培养阳性标本直接细菌鉴定和药敏试验的评价 ・实验研究・ 罗永慧，吴昌志，舒向荣 （江西省妇幼保健院，江西南昌３３０００８） ． 摘要：目的比较直接法与常规法对血培养阳性标本进行细菌鉴定及药敏试验的一致性．探讨直接法菌种鉴定及药敏 试验的可行性。方法将血培养仪报警的阳性标本涂片革兰染色镜检，依据染色结果选择不同鉴定卡，直接上机进行菌种鉴 定及药敏试验．同时将阳性标本转种平板分离培养．分纯后的菌落按常规法上机鉴定及药敏试验．并对两种方法检测结果进 行比较。结果两种方法细菌鉴定总一致率为９３．５％，其中ｐ菌鉴定一致率为９５．４％，Ｇ＋￣Ｊｔ菌一致率９０．９％；药敏试验总符合 率达９４．６％。结论直接法菌种鉴定及药敏试验明显缩短了检测时间，且与常规法检测结果符合率高，为临床尽早抗感染治 疗提供了重要依据 关键词：细菌学技术；血培养；直接法；药物敏感试验 ． 中图分类号：Ｒ４４６．５，Ｑ９３９．９２，Ｒ６３１￣．３，Ｒ５１５．３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７４—１１２９（２０１３）０５—０４５０—０２ ＤｏＩ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１６７４—１ １２９．２０１３．０５．０１７ 菌血症和败血症是临床严重危及患者生命的 疾病．因此快速准确的细菌鉴定与药敏试验是临 床诊断和治疗的关键 为了使临床尽快地得到有 ％ＣＯ 环境中），经１８ ２４ｈ形成菌落后再行涂片革 兰染色，根据氧化酶和触酶试验初筛．常规上机进 行细菌鉴定及药敏试验．并对二者的结果进行比 较。 ２结果 效且合理的抗菌药敏结果．我们从全自动血培养 仪报警的阳性标本中抽取菌液．直接上全自动微 生物分析仪检测．同时与阳性标本按常规方法分 离菌株．再上机检测的结果进行比较．现报道如 下。 ２．１菌株鉴定结果符合率３９６份血培养阳性标本 中．常规法鉴定出细菌３８５株，其中革兰阴性杆菌 ２２１株、革兰阳性球菌１６４株。另有１１株为革兰阳 性杆菌、念珠菌或两种方法都没能鉴定出来的细 菌 而直接法与常规法鉴定相符的革兰阴性杆菌 １材料与方法 １．１标本来源选取２０１２年６月至２０１３年６月 本院发热伴感染的住院患者的血培养阳性标本 ３９６例．同一患者多次分离的菌株不重复记人，含 有复合菌的血培养阳性标本不记入 ２ｌ１株、革兰阳性球菌１４９株；两种方法细菌鉴定 革兰阴性杆菌一致率为９５．４％（２１１／２２１１、革兰阳性 球菌一致率为９０．９％（１４９／１６４１、总一致率为９３．５％ ｆ３６０／３８５），详见表１。 表１血培养阳性标本直接上机与转种菌落上机鉴定结果比较 １．２仪器与试剂ＢＡＣＴＥＣ９１２０型全自动血培养 仪、标准树脂血培养瓶均为美国ＢＤ公司生产： ＭｉｃｒｏＳｃａｎ ＷＡ９６全自动微生物分析仪、Ｇ一菌鉴定 及药敏复合板ｆＮＣＳＯ）、Ｇ＋菌鉴定及药敏复合板 ｆＰＣ３３１为美国Ｄａｄｅ Ｂｅｈｒｉｎｇ公司产品。分离用血 平板、中国蓝平板、巧克力平板为ＯＸＯＩＤ公司产 品。质控菌株：金黄色葡萄球菌ＡＴＣＣ２９２１３，大肠 埃希菌ＡＴＣＣ２５９２２，铜绿假单胞菌ＡＴＣＣ２７８５３。 １．３方法将ＢＡＣＴＥＣ ９１２０型血培养仪报警的血 培养阳性标本．用无菌注射器抽取阳性瓶中菌液 涂片、行革兰染色镜检，根据涂片染色结果，取菌液 ５ ＩＯＩＭ．混匀于专用接种水中．接种于专用鉴定板 注：其它中包括革兰阳性杆菌、念珠菌或两种方法都未鉴定出来的 细菌。 上．直接上机做细菌鉴定和药敏试验。同时转种血 平板、中国蓝平板、巧克力平板ｆ巧克力平板置于５ 作者简介：罗永慧，男，１９７３年ｌ１月出生，汉族，毕业于中南大学湘 雅医学院，硕士学位，专业病原生物学，主要研究方向为临床微生物。 ２．２药敏结果符合率将３８５株细菌药敏试验结 果进行比较，药敏结果直接法与常规法符合率高， 总一致率为９４．６％，详见表２。其中非发酵菌有２ 塞 验医学２０１３年１０月第３１卷第５期Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｎｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｖ Ｍｅｄｉｃ Ｏｃｔ： Ｑ１ ： ！１ ： ！ ・４５１・ 表２直接法与常规法对３８５株菌药敏试验结果的符合率 株，链球菌有５株，两种方法都没有药敏结果。 ３讨论 血培养是菌血症、败血症临床诊断和治疗的 关键【”。虽然大多数医院应用全自动血培养系统。 定一致性的同时。还对两种方法药敏检测结果的符 合率进行了比较，发现两者的符合率达９４．６％。按 照相关要求．一种新方法的建立应与参考方法进 行比较．其符合率应ｉ＞９０．Ｏ％ 结果表明对阳性血 培养标本采用直接法药敏试验．可以获得较为满 意的检测结果 提高了血培养阳性率．但是对血培养阳性标本进行 快速准确的菌种鉴定和药敏试验。依旧是微生物工 作者亟待解决的问题 血培养阳性标本按常规法进行细菌鉴定和药 敏试验，往往需要２～３ｄ。明确病原菌、早期诊断、早 我们利用直接法省略了常规法中的细菌分离 培养步骤，所需时间缩短 因此直接法克服了常规 法费时的缺点。对于及早确定病原菌和药敏结果。 为临床选择用药提供了及时有效的依据．避免了 经验用药，对提高菌血症、败血症等感染性疾病的 治愈率具有重要的意义 参考文献 【１］谢服役．血培养标本病原菌分布及耐药性分析Ｌ玎．中华医院感染 期正确治疗。是菌血症治疗成功的关健。我们采用 的阳性瓶肉汤直接法较传统法至少提前１ｄ．且与 传统法比较对３９６例血培养阳性标本细菌鉴定结 果为菌种鉴定阴性杆菌一致率为９５．４％、阳性球菌 一致率为９０．９％、总一致率为９３．５％，与有关资料 相符１５］．但高于李慧嗍所报道的两种方法菌种鉴定 学杂志，２０１３，２３（１）：２２２—２２４． 【２】吴绍莲，胡辛兰，池春燕．血培养常见病原菌的变迁和耐药性分析 总一致率８３．７％的结果 结果表明对肠杆菌科的鉴 定一致率较高．对非发酵菌和链球菌的鉴定一致 率相对较低。这可能与细菌本身培养环境要求较 高。在鉴定板中生长缓慢或不充分有关：血培养液 中微量的血液细胞和纤维成分等也可能影响了测 试板的生化反应结果 ［Ｊ］．实验与检验医学，２０１３，３１（２）：１３８—１４０． ［３】乔亚峰，叶振东，张国雄，等．血培养常见病原菌的分布及耐药性分 析［Ｊ］．实验与检验医学，２０１ １，２９（２）：１３６—１３７． 【４】张鸿．武汉市青山区血培养病原菌的分布及耐药性分析【Ｊ】．实验 与检验医学．２０１ １，２９（４）：４１ １－４１２． ［５】漆坚．全自动细菌鉴定仪对血培养阳性标本直接鉴定及药敏试 验比较 ．国际检验医学杂志，２００６，２７（５）：３９７－３９８． 【６】李慧．两种细菌鉴定法在临床血液检验中的应用［Ｊ］．现代预防医 学．２０１ １，３８（９）：１７０５—１７０６． 相对于菌种鉴定结果．临床医生更想尽早知 道药敏结果 我们在比较血培养阳性标本细菌鉴
