亚硝酸盐氮的测定

亚硝酸盐氮是氮循环的中间产物，不稳定。在水环境不同的条件下，可氧化成硝酸盐氮，也可被还原成氨。

亚硝酸盐氮在水中可受微生物作用很不稳定，采集后应立即分析或冷藏抑制生物影响。

N-（1-萘基）-乙二胺光度法：

1、原理

在磷酸介质中，PH值为1.8±0.3时，亚硝酸盐与对氨基苯磺酰胺(简称磺胺)反应，生成重氮盐，再与N-(1-萘基)-乙二胺偶联生成红色染料，在波长540nm处有最大吸收。

2、仪器：分光光度计、G-3玻璃砂心漏斗 试剂：

(1)显色剂：于500ml烧杯中加入250ml水和50ml磷酸，加入20.0g对氨基苯磺酰胺；再将1.00gN-(1-萘基)-乙二胺二盐酸盐溶于上述溶液中，转移至500ml容量瓶中，用水稀至标线 (2)亚硝酸盐氮标准贮备液：称取1.232g亚硝酸钠溶于150ml水中，移至1000ml容量瓶中，稀释到标线。每毫升约含0.25mg亚硝酸盐氮。本溶液加入1ml三氯甲烷，保存一个月。 (3)亚硝酸盐氮标准中间液：分取适量亚硝酸盐标准贮备液（使含12.5mg亚硝酸盐氮），置于250ml棕色容量瓶中，稀至标线，可保存一周。此溶液每毫升含50微克亚硝酸盐氮。 (4)亚硝酸盐氮标准使用液：取10.00ml中间液，置于500ml容量瓶中，稀至标线。每毫升含1.00微克亚硝酸盐氮。

三、实验步骤：

1、校准曲线的绘制

（1）在一组6支50ml的比色管中，分别加入0、1.00、3.00、5.00、7.00和10.0ml亚硝酸盐标准使用液，用水稀至标线，加入1.0ml显色剂，密塞混匀。静置20min后，在2h内，于波长540nm处，用光程长10mm的比色皿，以水为参比，测量吸光度。

（2）从测定的吸光度，减去空白吸光度后，获得校正吸光度，根据回归方程（y=bx+a）绘制校准曲线。

2、水样的测定

（1）当水样pH≧11时,加入1滴酚酞指示剂,边搅拌边逐滴加入(1+9)磷酸溶液,至红色消失。 （2）水样如有颜色或悬浮物，可向每100ml水中加入2ml氢氧化铝悬浮液，搅拌，静置，过滤弃去25ml初滤液。

（3）分别经预处理的水样加入50mL比色管中(如含量较高，则分取适量，用水稀释至标线)，加入1.0 mL显色剂，然后按校准曲线绘制相同步骤操作，测量吸光度。经空白校正后，从校准曲线上查得亚硝酸盐氮量。

3、空白试验 用水代替水样，按相同步骤进行测定。 测量值 体积/mL 含量/mg 吸光度

六、结果讨论

亚硝酸盐氮（N，mg/L）=m/V

式中：m----由水样测得的校准吸光度，从校准曲线上查得相应的亚硝酸盐氮的含量，ug;

溶液 标准使用液 水样 空白溶液 2 0 0.50 1.00 3.00 5.00 7.00 10.00 1 V-----所取水样的体积，mL. 注意事项：

(1)显色剂有毒，避免与皮肤接触或吸入体内。

(2)测得水样的吸光度值，不得大于校准曲线的最大吸光度值，否则水样要预先进行稀释。