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缺血修饰白蛋白的临床研究进展

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2010年l2月 现代临床医学 Dee.2010 Vol J36 No.6 第36卷第6期 JOURNAL OF MODERN CLINICAL MEDICINE [文章编号]1673—1557(2010)06—0405—03 [中图分类号]R446.11 [文献标志码]A 缺血修饰白蛋白的临床研究进展 李珊珊,陈林,张朝明 610075) (成都中医药大学,四川成都缺血修饰白蛋白(ischemia modiifed albumin,IMA)是 缺血时血清白蛋白末端序列发生改变所形成的生化产物。 与游离co 呈正比。用分光光度计测定吸光度,从而通过 对血清中游离的co 定量检测间接对IMA进行定量检 它不仅对心肌缺血的早期诊断和预后有很高的临床价值, 而且在急性冠脉综合征的早期诊断、危险分层及预后评估 中也表现出较高的临床意义。但是IMA存在的诊断时间 窗窄、特异性不高的不足又了它在临床的广泛应用。 本文就IMA的临床研究现状以及其应用前景作一综述。 1 缺血修饰白蛋白的形成机理 缺血修饰白蛋白的形成机理尚无定论。可能机理为: 缺血时人血清白蛋白(human sermn albumin,HSA)氨基末 端(N一末端)的天门冬氨酸~丙氨酸一组氨酸序列修饰改 变,导致内皮及细胞外缺氧、酸中毒、自由基损伤、细胞膜 能依赖的钠钾泵破坏以及游离铜离子(Cu )增多等一系 列变化所致 。该氨基酸序列为人类所特有,是过渡金属 钴、镍、铜离子等的结合位点,当各种原因引起缺血时,组 织因缺氧而进行无氧代谢,ATP生成减少,乳酸等代谢产 物堆积,局部微循环pH值下降,致使大量游离cu 、Fe 被释放入血。Cu 在还原剂(如维生素c)作用下被还原 为cu ,最终形成生物体内化学性质最活泼的OH・,OH・ 是体内最具损伤性的自由基,HSA易受其损害发生结构改 变,如导致N一末端序列的2~4个氨基酸乙酰化或缺失, 与过渡金属离子结合能力下降,形成IMA。这一过程中,游 离cu 被释放后,HSA迅速与之结合,将其清除,但产生的 OH・损伤HSA,使其与cu 结合能力降低,cu“再次被释 放,又进入OH・生成的过程,这一链式反应,使得IMA在 缺血后数分钟内迅速升高。这可能是机体的一种自身保 护机理,以避免或尽量减轻OH・造成的组织损伤 。 2缺血修饰白蛋白的检测 目前对缺血修饰白蛋白的检测,无论是手工检测还是 自动化分析,都足基于ACB试验(白蛋白一钴结合实验) 间接检测IMA。ACB试验已通过了美国国家药品和食品 管理局认证,这是FDA自1994年批准肌钙蛋白的测定试 验后,首次批准的用来评价心肌缺血的生化实验项目 。 其实验原理如下:止常的血清标本中白蛋白以活性形式存 在,加入含游离的氯化钻溶液时,白蛋白N一末端即可与 co“结合,使溶液中游离co“减少;心肌缺血时,cu 占据 了白蛋白的金属结合位点而致白蛋白与外源性co“结合 能力下降,加入等量的氯化钴,但结合反应后剩余的游离 co“较多 。再加入显色剂二硫苏糖醇(dithiothreitol, DTT),DTT可使含游离c0“的溶液呈红褐色,且显色深度 通讯作者:李珊珊,flyagainstwater@163 coril 测’ 。从传统的手工法发展到全自动生化检测,使得ACB 试验样品用量减少,测定时间缩短,更加简便易行。值得注 意的是,由于没有标准品,各家使用的仪器也不相同,特别 所选的测定波长也不相同,导致结果有一定差别。因此各 实验室在使用此方法时,应结合本实验室的具体情况,确定 判断阈值。当然,测定IMA方法很多,除比色测定法之外, 已报道的还有液相色谱法、质谱测定法以及核磁共振等,但 均不适合临床常规分析 。 3缺血修饰白蛋白的临床研究 3.1 与心肌缺血性疾病 3.1.1 IMA是心肌缺血标志物而非心肌损伤标志物 临 床上,心肌缺血早期的表现模糊而多样,因此不易识别。目 前常用于心肌缺血的诊断工具包括心电图(ECG)、心肌坏 死标志物和影像学技术等。心电图对于急性心肌梗死 (acute myocardial infarction,AMI)和不稳定心绞痛 (unstable angina,uA)有较高的特异性,但灵敏度不足 50%;心肌肌钙蛋白(cTn)I或T、肌酸激酶同工酶(CK— MB)等心肌坏死标志物往往在心肌细胞发生不可逆的损伤 后开始升高,短期和可逆的缺血发作不会导致这些标志物 水平明显变化 。超声心动图检查只有在心肌缺血造成 室壁厚度的20%以上损伤时才能检测到,而核素显像只有 在损伤心肌>10 g时才可检出 ,因而不适用于评价早期 出现的可逆性心肌缺血。研究发现,IMA在缺血发生5~ 10 min即可升高,持续约3~6 h后恢复至正常水平 。这 对于及早发现急性心肌缺血和24 h内再发心肌缺血至关 重要。 心脏介入手术是一个良好的短暂心肌缺血模型,通过 球囊扩张诱发短暂心肌缺血,术后即可表现出血清中IMA 水平升高。冠心病介入治疗(PCI)引起心肌短暂缺血的可 能机理有:①球囊扩张压迫可引起冠脉血管短暂性闭塞,从 而诱导短暂的心肌缺血发作。②球囊扩张时,短暂的冠状 动脉血供与心肌代谢失衡,造成心肌细胞代谢性损伤 。 Bar—Or等对41例行经皮腔内冠状动脉成形术(PTCA)的 患者进行研究,发现术后即刻IMA升高,6 h恢复正常,同 步测定的CK—MB、cTnI及肌红蛋白等传统的生化标志物, 示后三者在术后即刻均处于基线水平,而6 h和24 h的水 平明显升高,这提示发生心肌缺血时IMA水平的变化早于 传统的生化标志物“ 。 405 Dec.2010 现代临床医学 2010年12月 Vo1.36 No.6 JOURNAL OF MODERN CLINICAL MEDICINE 第36卷第6期 Hiortshoj等对行PCI的sT段抬高心肌梗死(sT segment elevation myocardial infarction,STEMI)患者频繁采 血进行检测。结果示:缺血发生后IMA水平在极早期升 高,40 min达高峰,2.5 h恢复正常,这提示IMA的诊断时 间窗可能更窄 。Quiles等报道IMA升高水平与球囊扩 张的次数、压力、持续时间有关” ,提示IMA不仅是缺血 的标志物,也是缺血严重程度的标志物 。。 3.1.2 IMA对急性冠脉综合征(acute coronary syndrome, ACS)患者进行准确地危险分层和预后判断的意义 ACS 等检测了30例经螺旋cT血管造影确诊的肺动脉栓塞 (PE)患者及30例健康志愿者血IMA。结果发现PE患者 的平均IMA水平高于正常对照者,且在3O例PE患者中有 29例IMA水平高于界值 。Prefumo等检测了66例妊娠 早期妇女IMA,26例未妊娠妇女血清IMA作为对照组,比 较发现妊娠早期妇女的IMA显著高于对照组,且怀孕妇女 组85%血清标本IMA水平超过用于诊断心肌缺血的标 准 。由此可见,IMA在众多非心肌缺血性疾病时可升 高,而在这些疾病中的临床价值还有待进一步的试验证实。 包括不稳定型心绞痛(unstable angina pectoris,uA)、非sT 段抬高心肌梗死(non—ST segment elevation myocardial infarction,NSTEMI)及sTEM。心肌缺血是ACS最常见的 发病原因。Pollack等对251例急性胸痛患者在入院时依 据危险因素、症状、体征、ECG表现及常用生化指标结果进 行危险分层,2周后加入IMA结果重新进行危险分层。结 果发现,不考虑血清IMA水平时,66例患者被评为极低危 险;考虑血清IMA水平时,236例患者被评为极低危险。 所有IMA阴性的患者均未发生ACS 。这说明IMA阴性 而疑似ACS患者,如同时心电图和cTn检查均阴性,提示 有很大可能可以排除ACS诊断,可以考虑让患者出院。 IMA除了极高的敏感性和阴性预测值,其评价预后的价 值也在临床研究中不断得到证实。Aparci等对50例ACS患 者随访1年后,有l0例死于心脏事件,比较死亡者和存活者 的IMA水平显示结果之间存在显著差异 。Sharma等将 IMA应用于晚期肾脏疾病患者心肌缺血的检测,并以此预测 患者存活率。结果显示IMA水平>20 U・mL 的患者生存 率显著下降 。 3.1.3与传统检测方法联合应用Sinha等首次在研究中 阐述了IMA与其它指标联合应用的临床价值。该研究收 集了208例急性胸痛患者,就诊2 h内做心电图,并测定 IMA和cTnT,比较了三者对ACS的诊断价值。结果示单独 应用IMA诊断ACS的灵敏度和特异度分别是82%、46%, cTnT为20%和99%,ECG为45%和91%。IMA虽特异度 不高,但具有很高的灵敏度,且cTnT和ECG在联合IMA后 诊断ACS的灵敏度可分别达90%和92%,三者联合的灵 敏度可提高至95% 。 在临床工作中更重要的是指标阴性时的排除价值。 Peacock等综述了8项研究,结果表明IMA与cTnT(或 cTn1)、ECG联合使用时对高危患者群的阴性预测值 (negative predictive value,NPV)为84%、在低危患者群则更 是达到91%到100% 19。可见,IMA在发现早期心肌缺血 中有独特的优势,若能与传统的检测方法联合应用、相互 补充,可在很大程度上提高ACS诊断的准确率。 3.2与非心肌缺血性疾病 体内HSA随血液循环于各组织器官,在非心源性缺血 的情况下也可出现IMA水平升高,如缺血性脑卒中、终末 期肾脏疾病、肝硬变、某些严重传染病以及外伤和一些进 行性肿瘤患者,IMA水平都有不同程度的升高20i。Turedi 406 4应用前景与局限 2002年,Wisconsin Medical Journal(WMJ)推荐理想的 心肌标志物应具备以下的标准 :①敏感性高,在心肌缺 血发生的早期就出现在血液中,并且随心肌受累范围呈正 比增加;②高度的心肌特异性,在心肌以外的其他脏器缺血 时不升高;③在血液循环中形态稳定,可持续监测以提供一 个适宜的诊断窗口期;④24 h内血中浓度恢复到基础水 平,以便检测复发性缺血;⑤容易测量,TAT(来回时间)应 为3O~60 min或更短;⑥合理的价格;⑦具有良好的分析 特异性,变异系数值低。近年来国外众多的研究显示INA 具备心肌缺血理想标志物的特征,是心肌缺血发生后到发 生细胞坏死之前的一个非常早期的指标。但是,IMA的临 床应用也存在局限性:①特异性不高,非心源性缺血及非缺 血疾病也可导致IMA升高;②目前仍无明确的检测阈值和 统一的校准品以使其规范化;③诊断时间窗窄,对发病时问 较高。尽管存在这些不足,但我们相信随着医学研究 的不断深入,IMA将会展现出越来越广阔的应用前景。 [参考文献] [1]Baror D,Curtis G,Rao N,et a1.Characterization of the Co and Ni binding mino—acid residues of the N—terminus of human albumin:an insight into the mechanism of a new assay formyocardial ischemia[J]. 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[8]邢超,缺血修饰白蛋白的研究进展与应用前景[J].国外医学:老年 医学分册,2007,28(5):199—200 9]罗伟民,工晓丽,李志远.缺血修饰白蛋白对心肌缺血的早期诊断价 值 J].山东医药,2009,49(37):65 [10]李涯,屠洪,邓海.缺血修饰白蛋白及临床应用研究现状[J].深圳 2010年12月 现代临床医学 Dee.2010 第36卷第6期 JOURNAL OF MODERN CLINICAL MEDICINE V0l_36 N0.6 [17]Sharma R,Gaze DC,Pellerin D,et a1.The evaluation of isehemia modiifed albumin as a marker of myocardil iaschaemia in end stage renal disease[J].Clin Sci(Lond),2007,113(1):25—32. [18]Sinha MK,Roy D,Gaze D,et a1.Role of ischemia modified albumin,a new biochemical marker of myocardial ischemia,in the early diagnosis of acute coronary syndromes[J].Emerg Med J,2004,21(1):29—34. [19]Peacock F,Morris DL,Anwaruddin S,et a1.Meta~analysis of isehemia modiied a1bumifn to rule out acute coronary syndromes in the emergency department[J].Am HeartJ,2006,152(2):253—262. ~一~一一 一~一 .一~一一 一 ~一一 一一~一 一 l4(17):2642. 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(2010—09—20收稿;2010—10—13修回) [文章编号]1673—1557(2010)06—0407—03 [中图分类号]R777.3 [文献标志码]A 正常人群结膜囊带菌情况及影响因素的研究概况 李玉婵 ,张悦 (1.泸州医学院,四川泸州 646000;2.四川省人民医院,四川成都结膜囊长期暴露于外界环境,直接与皮肤相连,出生 610072) 2细菌种类 文献报道,正常结膜囊细菌带菌率为20.6%~ 98.8% -8 3。不久就有细菌共生,并且菌群随生活环境、年龄的变化而 不断变化。由于抗生素的广泛应用,结膜囊内细菌的种 类、耐药性、药物敏感性也在变化。在外伤、手术等条件 下,结膜囊的细菌可能导致眼内炎的发生。由于影响结膜 囊正常菌群的因素繁多且受到抗生素作用的影响,本文对 正常人结膜囊带菌情况、结膜囊菌群取样和培养方法、影 响因素及变化规律作一综述。 朱力等人的调查表明:革兰阳性菌是结膜囊 最常见的分离菌,其中最常见的是表皮葡萄球菌和金葡菌; 革兰阴性菌中最常见的是淋病奈瑟球菌和肠杆菌科 。 李霞报道的细菌培养阳性率为29.29%,前3位为表皮葡 萄球菌(51.2%)、金葡菌(19%)、微球菌属 。高岩报道 的结膜囊细菌培养阳性率(21.1%),其中葡萄球菌属最多 1 结膜囊茵群取样和培养方法 以表皮葡萄球菌培养阳性率为主要评价指标,在相同 研究条件下分别用白金环、藻酸钙拭子、干湿棉拭子取样 进行细菌培养,结果显示白金环取样培养阳性率最低,湿 (70.7%),表皮样葡萄球菌(43.9%)和金葡菌(12.6%)为 第1、第2位菌种,棒状杆菌占(12.6%) 。Mela对ICU 病房中的患者进行眼表细菌培养发现77%的患者至少培 养出一种细菌,其中铜绿假单胞菌、不动杆菌、表皮葡萄球 菌是常见的菌群。眼表细菌鉴定和局部预防性使用抗生素 棉拭子取样培养阳性率最高。滴麻药后立即取样,细菌培 养阳性率均下降。球结膜取样培养阳性率高于其它部 能够预防眼表的感染 。而目前主要关注的是眼部、全身 非炎症性疾病患者的正常结膜细菌的比较,单独对正常人 位 。同一研究人员采用相同取样方法、不同培养基,其 结果无明显差异;而不同研究对象采用相同取样方法,不 结膜囊细菌进行的研究较少。 同培养基,结果不同。表明不同研究对象培养结果差异与 所使用培养基、取样和培养方法缺乏统一标准有关 膜囊共生2种或多种细菌。 通讯作者:张悦,drzhangyue@163.com 3影响因素 3.1 一般人口学特征研究发现性别和年龄都影响结膜 囊带菌状况,60岁以上结膜囊带菌高于60岁以下的患者, 男性带菌率高于女性,有外眼病者结膜囊带菌高于无外眼 。 各种细菌培养阳性率总和超过100%,可能是因为同一结 407 

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